浙江省科技厅重点资助项目(2005C23033)
- 作品数：6 被引量：7H指数：1
- 相关作者：胡志斌严志焜潘晓华孟群周永列更多>>
- 相关机构：浙江省人民医院杭州医学院浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅重点资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 经二氮嗪强化的Celsior液延长大鼠供心冷保存时间的研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究经二氮嗪强化的Celsior液对延长大鼠供心冷保存时间的作用及机制。方法选取近交系雄性SD大鼠作为心脏移植的供、受者。根据供心保存液的不同分为对照组和实验组，每组24只。再根据供心保存时间的不同，将对照组和实验组各随机平均分为3组：对照5、8和10 h组，分别将供心置于低温单纯Celsior液中保存5、8和10h；实验5、8和10h组，分别将供心置于含30μmol／L二氮嗪的低温Celsior液中保存5、8和10h。各组供心在保存相应时间后进行大鼠颈部异位心脏移植。术后观察和比较各组供心移植后的复跳率、心肌丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、ATP酶活性、Caspase-3蛋白的表达水平、心肌细胞凋亡以及心肌超微结构的变化。结果供心血流开放30s内，实验8和10h组心脏复跳率较相应对照组显著提高；在相同保存时间下，实验组较对照组心肌MDA含量明显降低、SOD活性和心肌ATP酶活性明显增强以及Caspase-3蛋白表达和心肌细胞凋亡减少；各实验组和对照5h组心肌超微结构清晰、完整；对照8和10h组心肌超微结构受到不同程度的损伤。结论经二氮嗪强化的Celsior液能够有效延长大鼠供心的冷保存时间，其作用机制可能与二氮嗪减轻供心的缺血再灌注损伤有关。
- 胡志斌严志焜贾敬年孟群周永列赵仲生潘晓华
- 关键词：二氮嗪器官保存液心肌再灌注损伤
- 二氮嗪对移植鼠心不同时期心肌组织ATP酶活性的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨二氮嗪对移植鼠心在术后不同时期心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性的变化及其对心肌缺血再灌注损伤的作用。方法采用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植模型。SD雄性大鼠随机分为实验组、对照组和拮抗组,并在术后不同时间(5min、1周、3个月)留取标本,检测心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性,及观察心肌超微结构。结果(1)实验Ⅰ、Ⅱ组心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性均显著高于相应对照Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05);实验组中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组心肌细胞膜Na+-K+-ATPase活性增高呈递减性显著性减弱(P<0.05),实验Ⅰ组肌浆网Ca2+-ATPase活性显著高于实验Ⅱ、Ⅲ组;余差异无显著性。(2)拮抗组取消实验组DE的这一增高作用。(3)中长期各组均有良好的心肌超微结构保护,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构尚清楚,排列整齐;仅Ⅲ组偶有空泡变性。结论二氮嗪对移植鼠心长期冷缺血保存后,有更好的保存和提高细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase的活性,减轻心肌缺血再灌注损伤,维持心肌能量代谢有效地进行来发挥心肌保护作用。
- 胡志斌严志焜潘晓华贾静年周永列
- 关键词：二氮嗪NA^+-K^+-ATPASECA^2+-ATPASE
- 二氮嗪对低温保存诱导的心肌线粒体氧自由基的清除作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察二氮嗪(diazoxide,DE)对不同时程低温保存诱导产生的大鼠心肌细胞线粒体内氧自由基的清除作用。方法根据不同的低温保存时程,SD大鼠随机分9组,每组8只。利用Langendorff离体鼠心灌注法停搏大鼠心脏,然后在4℃单纯Celsior保存液或加入DE(30μmol/L)的Celsior保存液中分别保存0h、3h、6h、9h或12h后,检测心肌细胞线粒体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量的变化。且同步观察电镜下心肌超微结构的变化。结果①与对照组比较,随着冷保存时间的延长,心肌细胞线粒体内SOD活性随之降低,MDA含量随之升高,电镜结果显示心肌细胞线粒体超微结构随之破坏加剧;②与相应低温保存时程的单纯celsior液组比较,在保存液中加入DE后,上述各项指标均有明显改善,且以冷保存6h和9h后最为显著。结论DE在大鼠心脏长时程低温保存期间可通过直接清除自由基及提高线粒体SOD活力而减轻由长时程低温保存导致的心肌细胞线粒体的损伤。
- 严志焜郑鸣之胡志斌蒋建平张晓明朱立陈莹莹沈岳良
- 关键词：二氮嗪冷保存超氧化物岐化酶丙二醛
- Fas/FasL和Caspase-3在二氮嗪强化Celsior液超时冷保存鼠心移植中的表达及其意义被引量：1
- 2010年
- 目的研究心肌线粒体三磷腺苷敏感性钾离子通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,MitoKATPC)开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)添加入Celsior液中对大鼠供心超时冷保存的效果,并探讨其抗心肌凋亡作用的可能机制。方法SD大鼠112只,随机分成7组,每组16只(供者、受者各8只)。(1)Celsior组:保存液为单纯Celsior液;(2)DE组:保存液为30μmol/LDE+Celsior液;上述两组又以保存时间不同分为5 h、8 h、10 h组。(3)5-HD组:保存液为Celsior液+DE(30μmol/L)+5-HD(100μmol/L),保存时间为5 h。利用改良Heron法建立大鼠颈部异位心脏移植模型,观察移植术后5 min内心脏恢复跳动、心率表现;采用原位末端标记染色法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测心肌Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达情况;以及用电镜观察心肌超微结构等。结果(1)除5 h保存时间的心脏外,DE各组心脏移植术后30 s复跳率较相应Celsior液组显著提高;DE组心率明显较Celsior液组快(P<0.05),DE 10 h组与Celsior 5 h组无明显区别(P>0.05);(2)与Celsior液组相比,DE处理明显降低各组心肌细胞凋亡指数(P<0.05),减少Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达(均为P<0.05);DE10 h组与Celsior5 h组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)5-HD可取消上述DE的作用;(4)DE各组和Celsior 5 h组心肌超微结构保护相对较佳:肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构较为清楚;Celsior 10 h组心肌结构尚清楚,但肌纤维疏松,个别区域肌丝肌节溶解,线粒体肿胀较明显,嵴模糊。结论DE强化Celsior液冷保存的鼠供心,可能通过激活MitoKATPC,明显抑制Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达,保护线粒体功能和结构的完整,从而使心肌细胞凋亡减少,减轻缺血再灌注损伤,使得DE强化Celsior液超时(10 h)冷保存的鼠供心移植安全有效。
- 严志焜胡志斌赵仲生孟群潘晓华
- 关键词：器官保存二氮嗪CELSIOR液
- 含二氮嗪的Celsior液和HTK液对移植鼠心脏超时低温保存效果的分析被引量：1
- 2008年
- 目的评价含二氮嗪的Celsior液和HTK液对移植鼠心长时间低温保存的效果。方法将32只同种系雄性SD大鼠随机分为Celsior液组和HTK液组,每组8对。采用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植术建立模型。供体麻醉抗凝后,4℃stanford停搏液灌注心脏停跳,制备离体鼠心,保存于4℃两种不同保存液中10h。之后移植于受体,成功复跳后观察1h,留取标本并测定心率(HR)、心肌含水量(MWC)、心肌肌钙蛋白(IcTnI)、心肌酶谱[乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)]并观察心肌超微结构。结果两组大鼠心脏复跳后均跳动有力、心律齐,与Celsior液组比较,HTK液组大鼠HR明显较慢(P<005),cTnI、LDH及CK含量明显较高(P<0.05),但MWC并无明显变化(P>0.05)。心肌超微结构显示,Celsior液组大鼠心肌结构清楚,肌纤维排列较整齐,肌节清晰,偶见肌丝溶解;线粒体肿胀不明显,嵴结构相对清楚。HTK液组大鼠心肌结构尚清楚,肌纤维疏松,个别区域肌丝肌节溶解,线粒体轻度肿胀,嵴排列尚整齐,偶有空泡变性。结论含二氮嗪的Celsior液和HTK液低温长时间(10h)保存离体心脏均具有良好的心肌保护效作用,而且相对于HTK液,Celsior液的保存效果更好,可作为临床上心脏移植手术中心脏保存的一种有效的方法。
- 胡志斌潘晓华严志焜
- 关键词：心脏保存HTK二氮嗪
- 二氮嗪强化Celsior液可安全延长供心低温保存时限被引量：1
- 2009年
- 目的评价二氮嗪（Diazocide，DE）强化Celsior液对移植鼠供心长时程（10h）低温保存的有效性，并探讨其可能作用机制。方法采用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植模型。SD近亲大鼠随机分为3组，（1）对照组：单纯Celsior液保存鼠心；（2）实验组：30μmol／LDE＋Celsior液保存鼠心；（3）拮抗组：100μmol／L5．HD＋30μmol／LDE＋Celsior液保存鼠心5h；前两组根据保存时间不同分为5、10h组。观察移植心脏复跳情况，并分别于复跳后5min、1周、3个月时留取标本，检测心肌MDA含量、SOD活性、心肌ATP酶、TNF-α、Fas／FasL、Caspase-3、AI等指标以及超微结构检查。结果（1）相同保存时间，实验组与对照组比较，术后5min和1周各指标均有明显优越性；术后3个月时各指标亦较佳，心肌MDA含量低下、SOD和Na^＋．K^＋．ATP酶活性高及FasL、TNF-α基因表达低差异有统计学意义；（2）5-HD消除了实验组中添加DE的优势作用；（3）实验10h组与对照5h组比较，各指标均稍有优越性；（4）DE各组和Celsior5h组心肌超微结构保护相对较佳：肌纤维排列整齐，肌节清，线粒体肿胀不明显，嵴结构较为清楚；Celsior10h组心肌肌纤维疏松，部分区域肌丝肌节溶解，线粒体肿胀较明显，嵴模糊。结论DE强化Celsior液长时程冷保存鼠供心可较国际公认4～6h延长至10h，仍安全有效。其主要原因可能与DE介导mito-KATP C开放，早期阶段抑制氧化应激引起的细胞凋亡、阻止细胞内钙超载、降低凋亡相关基因表达等对抗心肌缺血再灌注损伤的心肌保护作用有关。
- 严志焜胡志斌孟群贾敬年赵仲生周永列潘晓华
- 关键词：二氮嗪心肌再灌注损伤心脏移植细胞凋亡
