浙江省中医药科技计划项目(2010ZB088)
- 作品数：6 被引量：63H指数：5
- 相关作者：郝卯林王万铁周俊辉陈海娥赵珊更多>>
- 相关机构：温州医科大学温州医学院附属第一医院温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省中医药科技计划项目浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 姜黄素通过抑制内质网应激和JNK通路过度活化减轻小鼠肺缺血再灌注损伤被引量：28
- 2013年
- 目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)是否通过抑制内质网应激和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路过度活化来减轻小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤。方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位I/R损伤模型。实验随机分为6组(每组10只),包括假手术组(sham组)、I/R组、DMSO组(I/R+DMSO组)和Cur组(I/R+Cur低、中、高剂量组)。实验结束后处死小鼠,留取左肺,检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜、电镜观察肺组织形态结构变化,并进行肺组织损伤评估(IQA);RT-PCR检测JNK和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA表达;West-ern blotting检测磷酸化JNK(p-JNK)和GRP78的蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI)。结果:与sham组相比,I/R组和DMSO组W/D、TLW、IQA及AI均明显升高(P<0.01),JNK、GRP78 mRNA和p-JNK、GRP78蛋白表达量上升(P<0.01),光镜、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化。I/R组与DMSO组相比,上述各指标无显著差异(P>0.05)。与I/R组和DMSO组相比,I/R+Cur低、中、高剂量组各组GRP78mRNA和蛋白表达量无明显变化(P>0.05),W/D、TLW、IQA及AI下降(P<0.05或P<0.01)且肺组织损伤减轻,JNK mRNA和p-JNK蛋白质表达量亦下降,以I/R+Cur高剂量组下降最为明显(P<0.01)。结论:缺血/再灌注引发肺组织细胞发生过度的内质网应激,损伤肺组织。Cur能减轻肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与抑制JNK信号通路的过度活化有关。
- 赵珊马迎春刘亚坤周俊辉郝卯林陈海娥孙勤王万铁
- 关键词：内质网应激再灌注损伤姜黄素
- 靶向小干扰RNA对小鼠肺缺血／再灌注损伤时细胞凋亡及CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白的作用被引量：14
- 2013年
- 目的观察靶向小干扰RNA（siRNA）对小鼠肺缺血／再灌注损伤（PIRI）时细胞凋亡及CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的影响。方法荧光标记法观察靶向siRNA在小鼠体内的分布并评估转染效率。C57BL／6J小鼠50只，随机分为5组（n=10）：假手术组（Sham组）、缺血／再灌注组（I／R组）、I／R＋载体组（I／R＋Vehicle组）、I／R＋阴性对照组（I／R＋Control—siRNA组）和IVR＋CHOP．siRNA组（I／R＋CHOP—siRNA组）。取左肺，检测肺湿／干重比（W／D）、总肺水含量（TLW）和肺泡损伤定量评估（]QA），光镜和电镜观察肺组织结构改变，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Westernblot检测CHOP、葡萄糖调节蛋白78（GR-VT8）mRNA和蛋白表达水平，原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测细胞凋亡指数（AI）。结果靶向siRNA通过滴鼻法可有效分布于肺脏中。与Sham组比较，L／R组中CHOP、GRP78mRNA和蛋白表达水平（0．80±．03、0．80±0．02；0．80±0．04、0．84±0．02）均升高（P〈0．05），W／D（5．24±0．49）、TLW（4．24±0．49）、IQA[（42．80±4．21）％]和AI[（34．50±1．51）％]均明显增加（P〈0．01）；肺组织形态结构发生明显损伤；与I／R＋Vehicle组和L／R＋Contr01．siRNA组比较，I／R＋CHOP-siRNA组中GRP78mRNA和蛋白表达水平（0．84±0．04、0．85±0．04）无明显变化（P〉0．05），而CHOPmRNA和蛋白表达水平（0．40±0．03、0．44±0．04）均降低（P〈0．05），W／D（2．54±0．24）、TLW（1．54±0．24）、IQA[（16．71±2．33）％]和AI[（11．50±1．58）％]亦均降低（P〈0．01）；肺组织形态结构损伤减轻。结论靶向siRNA对I／R损伤肺具有良好的保护作用，其机制可能与其对抗过度的未折叠蛋白反应（UPR）中CHOP介导的细胞凋亡有关。
- 周俊辉王良荣郝卯林应磊孙勤王万铁
- 关键词：CCAAT肺缺血再灌注损伤小干扰RNA
- 姜黄素对小鼠肺缺血/再灌注损伤时细胞凋亡及CHOP的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:本研究旨在探讨姜黄素(CUR)对小鼠肺缺血/再灌注(I/R)损伤时细胞凋亡及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的影响。方法:C57BL/6J小鼠60只,随机分为6组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血/再灌注+二甲基亚砜组(DMSO组)以及缺血/再灌注+姜黄素剂量100 mg/kg、150 mg/kg和200mg/kg组(CUR-100组、CUR-150组和CUR-200组)。分别于再灌注3 h留取左肺,检测湿干/重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜和电镜观察肺组织形态学结构改变并进行肺组织损伤定量评估(IQA);逆转录-PCR、Western blot测定CHOP和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA和蛋白表达水平;原位末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI)。结果:与Sham组相比,I/R组和DMSO组中CHOP和GRP78mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),W/D、TLW、IQA和AI均明显增加(P<0.01),肺组织形态学和超微结构均发生明显损伤;与DMSO组相比,CUR-100组、CUR-150组和CUR-200组各组GRP78mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),而CHOPmRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),W/D、TLW、IQA和AI亦均下降(P<0.01),肺组织形态学异常改变趋近于正常。结论:I/R引发小鼠肺组织细胞过度的未折叠蛋白反应,并通过CHOP途径引起细胞凋亡,损伤肺组织;姜黄素对I/R损伤发生的小鼠肺脏具有良好的保护作用,其机制可能与其对抗过度的未折叠蛋白反应中CHOP途径引起的细胞凋亡有关。
- 周俊辉郝卯林赵珊陈海娥陈丹应磊孙勤王万铁
- 关键词：姜黄素缺血细胞凋亡小鼠
- siRNA沉默过度内质网应激下JNK基因在缺血/再灌注肺损伤中的作用被引量：11
- 2014年
- 目的:探讨siRNA沉默过度内质网应激(ERS)下C-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在缺血/再灌注肺凋亡中的作用。方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位缺血/再灌注(I/R)损伤模型。实验随机分为7组(n=10),包括假手术组(Sham组),缺血/再灌注组(I/R组),PBS+Lipofectamine2000TM转染试剂组(I/R+PBS+Lipo组),阴性对照组(I/R+SCR组),JNK-siRNA组(I/R+siRNAJNK1组、I/R+siRNAJNK2组、I/R+siRNAJNK3组)。各组实验结束后处死小鼠,留取左肺,分别检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜观察肺组织形态结构变化,并进行肺组织损伤评估(IQA);RT-PCR、检测JNK和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的基因表达;Western blot检测磷酸化JNK(p-JNK)和GRP78的蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI)。结果:与Sham组相比,I/R+PBS+Lipo组和SCR组各组W/D、TLW、IQA、JNK与GRP78 mRNA和p-JNK、GRP78蛋白质表达量及AI均明显升高(P<0.01),光镜显示肺组织结构出现明显损伤性变化,且各组两两比较,上述各指标均无统计学差异;与I/R+PBS+Lipo组和SCR组相比,JNK-siRNA各组GRP78表达水平无明显变化,余各指标均降低(P<0.05,P<0.01)且肺组织损伤减轻。结论:I/R引起肺组织细胞发生过度的ERS,并通过JNK通路引起细胞凋亡,损伤肺组织。
- 郝卯林赵珊陈海娥陈丹宋冬何金波汪洋王万铁
- 关键词：内质网应激JNK缺血再灌注损伤
- caspase-12-siRNA预处理对小鼠肺缺血再灌注损伤的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 评价caspase-12靶向小干扰RNA（caspase-12-siRNA）预处理对小鼠肺缺血再灌注损伤的影响.方法 C57BL/6J雄性小鼠40只,6～8周龄,体重16～24 g,采用随机数字表法,将其分为4组（n=10）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、阴性对照组（NC组）和caspase-12-siRNA预处理组（siRNA组）.IR组、NC组和siRNA组采用夹闭左肺门30 min,再灌注3h的方法制备肺缺血再灌注损伤模型.造模前48 h时,NC组滴鼻法给予阴性对照siRNA 20μg,siRNA组滴鼻法给予caspase-12-siRNA 20 μg,总体积50μl.再灌注3h时,处死小鼠,取肺组织,测定肺湿重/干重比值（W/D比值）和肺水含量,光镜下观察病理学结果,计算肺泡损伤定量评估指数（QEI）和细胞凋亡指数,电镜下观察超微结构.结果 与S组比较,IR组和NC组肺W/D比值、肺含水量、肺泡损伤QEI和细胞凋亡指数均升高,siRNA组肺泡损伤QEI和细胞凋亡指数升高（P＜0.05）；与IR组和NC组比较,siRNA组肺W/D比值、肺含水量、肺泡损伤QEI和细胞凋亡指数均降低（P＜0.05）,病理学损伤减轻；IR组和NC组上述各指标比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 caspase-12-siRNA预处理可减轻小鼠肺缺血再灌注损伤.
- 周俊辉陈丹陈海娥赵珊郝卯林林丽娜王万铁
- 关键词：缺血预处理再灌注损伤
- 姜黄素对肺缺血/再灌注损伤小鼠Caspase-12及细胞凋亡的影响被引量：13
- 2014年
- 目的研究姜黄素(curcumin,CUR)对肺缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤小鼠天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(cysteinyl aspartate specific proteinase-12,Caspase-12)及细胞凋亡的干预作用。方法采用C57BL/6J小鼠制作在体单侧肺原位I/R损伤模型。采用随机数字表法将60只小鼠分为6组,每组10只。假手术组(简称Sham组)、I/R组、I/R加二甲基亚砜(简称I/R加DMSO)组,I/R分别加100、150、200 mg/kg CUR(简称I/R加CUR-100、I/R加CUR-150、I/R加CUR-200)组。实验结束留取左肺,测定肺湿/干重比(W/D)和总肺水含量(TLW),光镜观察肺组织形态学改变,进行肺组织损伤定量评估(IQA),电镜观察肺组织超微结构改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测Caspase-12和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA及蛋白表达水平,原位末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡指数(AI)。结果与Sham组比较,I/R组Caspase-12和GRP78 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05),W/D、TLW、IQA和AI均增加(P<0.05,P<0.01),肺组织形态结构均发生明显损伤;与I/R加DMSO组比较,I/R加CUR-1 00组、I/R加CUR-1 50组、I/R加CUR-200组GRP78 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05),而Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05),W/D、TLW、IQA和AI亦均下降(P<0.05,P<0.01),肺组织形态学异常改变趋近于正常。结论姜黄素对I/R损伤发生的小鼠肺脏具有较好的保护作用,其机制可能与其对抗过度的未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)中Caspase-12引起的细胞凋亡有关。
- 周俊辉赵珊陈海娥陈丹郝卯林应磊林丽娜王万铁
- 关键词：CASPASE-12姜黄素细胞凋亡
