国家公益性行业科研专项(200803015)
- 作品数：8 被引量：66H指数：5
- 相关作者：刘昊金宁一鲁会军张丹金扩世更多>>
- 相关机构：军事医学科学院吉林大学云南农业大学更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 2008～2010年华东部分地区猪圆环病毒2型感染血清学调查被引量：22
- 2010年
- 为了解华东地区近三年来猪圆环病毒病(porcine circovirus disease,PCVD)的流行状况,以便更好地控制该病的发生,2008年1月～2010年9月在华东地区5个省、直辖市及河南省的68个规模化猪场(均未免疫商品化猪圆环病毒疫苗)共收集1017份猪血清样品,应用商品化猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)抗体诊断试剂盒(PCV2-ELISA),对送检血清样品进行PCV2抗体水平检测。结果显示:送检猪血清中抗体阳性总数为609份,总阳性率为59.88%;2008、2009和2010年送检样品的阳性率分别为53.4%、35.33%和80.63%,PCV血清抗体阳性率呈先下降后上升的趋势;成年猪血清阳性率最高为81.40%,保育猪血清阳性率最低为41.48%,仔猪和育肥猪血清阳性率相近,分别为57.95%和52.20%,说明仔猪断奶后随母源抗体下降其抗体阳性率亦下降,但随猪龄的增长而感染逐渐加重后其抗体阳性率又升高,且不同生长阶段PCV毒抗体阳性率有明显差异。
- 赵津张小敏周斌曹瑞兵庞然何丹妮陈溥言
- 关键词：猪圆环病毒病血清学调查抗体水平ELISA
- 乙型脑炎病毒NS1蛋白的可溶性表达与抗原性分析
- 2012年
- 为获得可溶性表达的乙型脑炎病毒(JEV)NS1蛋白,将编码JEV SA14-14-2株NS1蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-c5X中,构建重组融合表达质粒pc5X-NS1;用重组质粒转化宿主菌ER2523后,经IPTG诱导得到可溶性的融合蛋白MBP-NS1;优化诱导表达条件,于28℃、0.3 mmol/L IPTG诱导4 h;最后融合蛋白经直链淀粉树脂柱纯化。结果表明:重组融合蛋白MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性。
- 刘立科陈振师任玉红步志高华荣虹
- 关键词：乙型脑炎病毒NS1蛋白原核表达
- 东北地区猪流行性乙型脑炎血清流行病学调查与分析
- 为了解东北地区猪乙型脑炎的流行情况,本文采用酶联免疫吸附试验对东北四个省份共2161份猪血清,进行血清流行病学调查和分析。结果表明,吉林省阳性率为30.72%,辽宁省为28.28%,内蒙古自治区为12.05%,黑龙江省为...
- 张丹鲁会军金扩世金宁一谭磊刘昊刘燕瑜
- 关键词：乙型脑炎病毒血清流行病学
- 文献传递
- 检测猪乙型脑炎病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用被引量：18
- 2010年
- 以乙型脑炎病毒(JEV)弱毒疫苗株作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立了检测猪乙型脑炎病毒血清抗体的间接ELISA方法。应用该法检测从江苏、安徽、山东、浙江4省部分地区收集到的1089份血样,对华东地区猪乙型脑炎血清流行病学进行初步调查。结果JEV抗体阳性率为68.2%,其中,种猪JEV抗体阳性率为82.1%,商品猪JEV抗体阳性率为62.6%。从中随机抽取135份血样与国产商品化试剂盒进行比较,间接ELISA方法的特异性和敏感性分别为92%和96.4%,2种方法的符合率为95.6%;与NS1蛋白包被建立的ELISA比较,两者的符合率为97.7%;同时,本法的阳性检出率显著高于临床普遍使用的乳胶凝集试验结果。由此表明,本试验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,适于大规模猪乙型脑炎血清流行病学调查。
- 沈婷周斌陈溥言
- 关键词：乙型脑炎病毒间接ELISA血清流行病学
- 东北地区猪流行性乙型脑炎血清流行病学调查与分析
- 为了解东北地区猪乙型脑炎的流行情况,本文采用酶联免疫吸附试验对东北四个省份共2161份猪血清,进行血清流行病学调查和分析。结果表明,吉林省阳性率为30.72%,辽宁省为28.28%,内蒙古自治区为12.05%,黑龙江省为...
- 张丹鲁会军金扩世金宁一谭磊刘昊刘燕瑜
- 关键词：乙型脑炎病毒血清流行病学
- 文献传递
- 东北地区猪流行性乙型脑炎血清流行病学调查与分析被引量：5
- 2011年
- 为研究东北地区猪乙型脑炎的流行情况,试验采用酶联免疫吸附法对采自东北地区4个省(区)的2 161份猪血液进行了血清流行病学调查和分析。结果表明:吉林省猪流行性乙型脑炎的阳性率为30.72%,辽宁省为28.28%,内蒙古自治区为12.05%,黑龙江省为10.87%;种母猪阳性率为51.02%,商品猪为10.30%;吉林省17个猪场的阳性率高低不等,有些猪场已呈现流行趋势。
- 张丹鲁会军金扩世金宁一谭磊刘昊刘燕瑜李洋
- 关键词：乙型脑炎病毒血清流行病学
- 云南省思茅地区乙型脑炎病毒及黄热病毒的分子流行病学监测被引量：5
- 2011年
- 2009年至2010年,在云南省思茅地区普文镇、思茅区、震东乡、六顺乡、勐旺乡等地共采集17880只蚊子(分为91管),其中库蚊16500只(83管),按蚊1380只(8管)。采用RT-PCR方法,对91管蚊虫样本进行流行性乙型脑炎病毒NS1基因及黄热病毒E基因片段扩增,回收阳性PCR产物,并进行测序和遗传进化分析。结果表明,思茅地区库蚊乙型脑炎病毒检测阳性率为18.1%(15管/83管),黄热病毒检测阳性率为15.7%(13管/83管),思茅地区按蚊乙型脑炎病毒检测阳性率为25%(2管/8管),黄热病毒检测阳性率为12.5%(1管/8管)。克隆的流行性乙型脑炎病毒NS1基因及黄热病毒E基因与JEV和YFV参考株进行序列比对,与乙型脑炎病毒参考株同源性为88.3%～90.7%。监测结果显示,思茅地区蚊子JEV和YFV带毒率均较高,表明当地两种虫媒病毒病流行风险高。
- 刘振江金宁一鲁会军李国江刘昊岳云强郭欢欢周红宁杨中华谢辉
- 关键词：乙型脑炎病毒黄热病毒RT-PCR
- 乙型脑炎病毒分子生物学特性及检测方法研究进展被引量：6
- 2009年
- 日本乙型脑炎是一种由乙脑病毒引起的人畜共患的病毒性传染病,人和多种动物都可感染。主要引起人的神经系统疾病,猪的繁殖障碍,对人类的健康有极大的威胁,对养殖业带来重大经济损失。本文对乙型脑炎病毒的基因组结构、结构蛋白、非结构蛋白的分子生物学特性和检测方法的研究进展进行了综述。
- 张丹金扩世金宁一鲁会军刘昊
- 关键词：乙型脑炎病毒分子生物学特性
- 乙型脑炎病毒XJ/08/01株的分离鉴定及PrM/E基因的遗传进化分析被引量：11
- 2009年
- 从新疆维吾尔自治区石河子地区某猪场采集了150份猪脑组织样品,利用RT-PCR方法进行流行性乙型脑炎病毒(JEV)NS1基因扩增,结果有32份组织样品扩增出了430 bp的特异性目的条带。用检测的阳性样品研磨液接种乳鼠进行JEV的分离,经3次乳鼠传代后获得了1株JEV,命名为XJ/08/01。在此基础上,设计引物从接毒乳鼠脑组织样品中扩增JEV的主要抗原基因PrM/E并进行序列分析,结果表明,该分离毒株与JEV疫苗株SA14-14-2的同源性为99.6%,根据基因分型法确定该分离株属于基因Ⅲ型JEV。
- 刘昊金宁一段纲尹革芬鲁会军屈勇刚于长勇张丹李霄金扩世关莎莎
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒核酸序列
- 乙型脑炎病毒E蛋白基因的原核表达及ELISA抗体检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 通过PCR方法扩增流行性乙型脑炎病毒(JEV)E基因,全长1 500 bp,将其连入经双酶切的pET-28a(+)载体,构建了重组原核表达质粒pET28a-E。将pET28a-E转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,进行SDS-PAGE分析。结果显示,E基因在大肠杆菌BL21中获得高效表达,表达的蛋白分子质量约53 ku。Western-blot分析表明,该表达产物具有良好的抗原性。在此基础上,利用该蛋白初步建立了检测猪JEV抗体的间接ELISA方法,并用武汉科前生物制品公司生产的猪JEV ELISA抗体检测试剂盒同时对250份临床采集的猪血清样品进行了检测,结果这两种方法的符合率达到92%,表明建立的ELISA方法具有较高的灵敏性和特异性。
- 刘昊尹革芬鲁会军张丹谭磊王开艳关莎莎段博芳金宁一段纲
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因抗原性
