国家公益性行业科研专项(200803026)
- 作品数：4 被引量：19H指数：3
- 相关作者：管雪婷张翼李雁冰田国斌王飞更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项“十二五”国家科技计划农村领域云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 蓝舌病病毒在细胞内生长特性和在抗原快速纯化中的应用
- 2013年
- 为了解决原来蓝舌病病毒抗原提取中,步骤繁琐效率低的特点,研究了一种高效提取蓝舌病病毒抗原的方法。进行了蓝舌病病毒在细胞内生长特性的研究,采用酶染色等方法对不同接种量、不同培养时间的细胞内病毒含量进行测定,发现可以在感染细胞未产生病变前收获细胞,通过简单加工获得高浓度的病毒抗原。该方法快速高效,适用于蓝舌病的抗原生产,用于蓝舌病C-ELISA以及琼脂扩散实验中。该方法可推广用于其它病毒的纯化中。
- 苗海生李乐朱剑波肖雷李华春
- 冷藏蓝舌病样品的Real-time PCR检测和病毒颗粒稳定性研究被引量：6
- 2013年
- 为了探测长期冷藏对蓝舌病样品的Real-time PCR检测结果和蓝舌病病毒活性的影响,本试验对18份4℃保存了10～18年的样品进行Real-time PCR检测,并对其中10份全血样品进行蓝舌病病毒分离和免疫酶染色,结果显示所有检测样品都为Real-time PCR阳性,从10份全血样品分离出5株蓝舌病病毒,通过免疫酶染色进一步证实为蓝舌病活病毒。研究结果提示冷藏蓝舌病病毒的活性高达18年,其稳定性超过目前现有的认识。
- 苗海生李乐朱建波肖雷李华春
- 关键词：蓝舌病稳定性
- 应用固相竞争ELISA、液相阻断ELISA和中和试验检测口蹄疫抗体的比较研究被引量：8
- 2011年
- 为了评价建立的口蹄疫固相竞争酶联免疫吸附试验(solid phase competition ELISA,SPC-ELISA)方法与传统的中和试验(VNT)和液相阻断酶联免疫吸附试验(liquid phase block ELISA,LPB-ELISA)检测方法之间的关系,本研究对野外采集的不同种类的猪、牛和牦牛共94份血清样品分别进行O型口蹄疫病毒SPC-ELISA、LPB-ELISA和VNT检测,并分别比较3种方法的符合率和阳性检出率。结果表明,建立的O型口蹄疫病毒SPC-ELISA方法与VNT具有很好的符合率,达88.3%,其中,猪和牦牛血清符合率高达90%和89.5%,阳性检出率为91.2%比LPB-ELISA更符合VNT,因此建立的SPC-ELISA方法比LPB-ELISA方法更符合VNT。
- 廖德芳李乐苗海生高林信爱国朱明旺李华春
- 关键词：口蹄疫VNT符合率阳性检出率
- H9亚型禽流感病毒血凝素特异性单因子血清制备被引量：5
- 2011年
- 为制备特异性的H9亚型禽流感病毒(AIV)单因子血清,本研究分别将6株不同亚群的H9亚型AIV的血凝素(HA)基因以鸡偏嗜的密码子进行优化,经全基因合成插入高效真核表达载体pCAGGS中,构建的真核重组质粒转染293T细胞进行瞬时表达,间接免疫荧光试验结果表明,重组质粒中的HA目的基因获得表达。将重组质粒以200μg/只的剂量免疫1月龄SPF鸡,6周后采血分离血清。交叉微量血凝抑制试验结果表明,血凝抑制效价可达8 log2～12 log2,灵敏度高,与其他AIV亚型抗原无交叉反应,型特异性强。
- 陈晓妹王飞张翼刘丽玲田国斌曾显营管雪婷程成陈化兰李雁冰
- 关键词：禽流感病毒H9亚型真核表达重组质粒
