国家自然科学基金(30500434)
- 作品数：6 被引量：33H指数：4
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- 相关机构：南方医科大学南方医院兰州医学院第一附属医院甘肃省人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三种基因亚型乙型肝炎病毒感染者的临床资料与病毒学指标差异分析被引量：1
- 2008年
- 目的调查HBV Ba、C1和C2三种基因亚型在临床致病性方面的差异，同时检测并分析三种基因亚型毒株在前C和C基因启动子区发生变异的模式。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法对来自广东地区151例慢性HBV感染者血清进行HBV基因亚型分析，同时测定所有标本前C及C基因启动子区的序列。结果151份样本中Ba亚型占53．0％（80／151），C1亚型占33．8％（51／151），C2亚型占13．2％（20／151）。三种亚型的患者在年龄和性别构成比无差异的情况下，其HBeAg阳性率以及多项肝功能指标差异均无统计学意义，但在前C及C基因启动子区的变异模式上存在明显差异：Ba亚型易发生A1896终止密码变异，T1762／A1764变异的发生概率较低；C1亚型易发生T1762／A1764变异，A1896变异发生概率较低；C2亚型发生T1762／A1764和A1896变异的概率介于Ba和C1亚型之间。结论三种HBV基因亚型毒株可能采取不同的变异模式形成HBeAg阴性HBV感染。
- 周彬王战会陈金军黄月华孙剑侯金林
- 关键词：肝炎病毒乙型基因型
- 中国乙肝病毒B基因亚型的分布被引量：14
- 2007年
- 目的调查乙肝病毒B基因亚型在我国的分布情况。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）法并结合测序法，对来自全国7个中心的共511份B基因型感染血清样本进行了检测。结果511份B基因型样本经亚型分析，确定全部为Ba亚型，未发现Bj亚型的存在。结论流行于我国南方及北方地区的乙肝病毒B基因型毒株绝大部分为Ba亚型，Bj亚型非常罕见。
- 黄月华周彬王战会马世武梁敏锋侯金林
- 关键词：基因型蛋白质亚型
- 影响HBeAg血清学状态和滴度的因素分析被引量：5
- 2009年
- 目的:分析病毒和临床因素对HBeAg血清学状态和滴度的影响。方法:采用聚合酶链式反应联合限制性片段长度多态性方法,检测302例慢性乙型肝炎患者HBVDNA基因型及pC1896A和Bcp1762A/1764G突变,雅培方法检测HBeAg/HBeAb。结果:HBeAg(+)组HBVDNA(lgcopies/mL)为6.57(3.0～8.32)比HBeAg(-)组的4.76(3.0～8.75)高(P<0.001);HBeAg(+)组pC1896A变异发生率为33.3%,pC1896A和Bcp1762A/1764G两特定位点双变异发生率为10.9%,分别比HBeAg(-)组相应的62.3%、29.9%都低(均P<0.001)。通过多元线性逐步回归分析,发现HBVDNA载量和pC1896A变异是两个独立影响HBeAg滴度的因素。结论:HBVDNA载量是HBeAg滴度的正影响因素,pC1896A变异是其负影响因素。
- 万铁林李文凡陈金军周彬王燕军孙婧耿书英侯金林
- 关键词：肝炎病毒乙型基因型HBEAG
- 乙型肝炎病毒基因型及亚型与YMDD、前C和C基因启动子变异的关系被引量：9
- 2007年
- 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因型及亚型与YMDD变异的关系,以及前C基因区终止密码变异(A1896)、基本核心启动子(BCP)区T1762/A1764变异在Ba、C1和C2三种基因亚型中的发生情况。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)法对211例服用拉米夫定后发生YMDD耐药变异的患者HBV进行基因型、基因亚型、A1896及T1762/A1764变异检测。结果211份标本中B基因型占50.7%(107/211),C基因型占49.3%(104/211),与广东地区对照人群HBV基因型分布情况相比无统计学差异(χ2=0.508,P=0.476)。进一步亚型分析发现,107份B基因型全部为Ba亚型;C基因型有C1和C2两种亚型,其中C1亚型占64.4%(67/104),C2亚型占35.6%(37/104),与广东地区对照人群C基因亚型分布情况相比也无统计学差异(χ2=0.043,P=0.836)。A1896变异在Ba亚型中的分布最高(41/107,38.3%),C2亚型次之(13/39,33.3%),C1亚型最低(9/65,13.8%),变异在不同基因亚型中的分布有统计学差异(χ2=11.839,P=0.03)。T1762/A1764变异在C1亚型中的分布最高(34/65,52.3%),C2亚型次之(17/39,43.6%),Ba亚型最低(23/107,21.5%),T1762/A1764变异在不同基因亚型中的分布有统计学差异(χ2=18.384,P<0.001)。结论HBV基因型及亚型并不影响YMDD变异的发生,但3种基因亚型发生A1896及T1762/A1764变异的模式存在明显不同。
- 王雪刚王战会马世武梁敏锋周彬侯金林
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型
- 乙型肝炎病毒聚合酶基因重组腺病毒表达系统的构建和初步鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的构建乙型肝炎病毒聚合酶基因(RT/RNaseH区段)腺病毒表达系统并初步鉴定其转录表达。方法采用PCR方法从pUC19-1.24HBV质粒中扩增RT/RNaseH区段,将该片段与pCMV-Tag2B载体连接构建腺病毒穿梭载体,将其在Bj5183细菌中重组,获得的重组质粒转染到Ad293细胞中包装,待细胞裂解后收集含病毒的上清并感染Huh7细胞,48h后通过RT-PCR鉴定目的基因转录。结果成功扩增HBVRT区并插入pC-MV-Tag2B载体,成功获得腺病毒重组质粒并在AD293中包装成病毒颗粒,病毒颗粒感染Huh7细胞后RT-PCR可以在Huh7细胞中检测到HBVRT区段mRNA转录。结论成功构建乙型肝炎病毒聚合酶基因RT/RNaseH区段的腺病毒表达系统,该系统能在Huh7细胞中转录,但逆转录蛋白的表达仍待进一步检测。
- 李晖彭劼王战会周彬余治健王程侯金林
- 关键词：HBV聚合酶重组腺病毒
- 应用腺病毒载体系统将HBV／C全基因组转导入HepG2细胞的方法学研究被引量：5
- 2008年
- 目的运用腺病毒系统将HBV/C全基因组高效地导入肝癌细胞系,为研究HBV的复制及蛋白表达情况构建技术平台。方法构建HBV/C基因型毒株的1.3拷贝全基因序列,运用腺病毒系统(AdEasy),首先将1.3拷贝HBV全基因序列插入到穿梭载体pAdTrack,经测序证实插入序列的正确性后用PmeI酶切线性化重组穿梭质粒,转化Adeasier-1感受态细胞,在细菌细胞内发生同源重组,所得重组腺病毒质粒pAdEasy-HBV/C用PacI酶切线性化,用脂质体法转染293细胞来包装重组病毒。用适量感染复数的重组腺病毒感染HepG2细胞,并对感染细胞上清中的HBVDNA、HBeAg和HBsAg分别进行了定量检测。结果成功运用腺病毒系统将1.3拷贝HBV全基因组高效率地导入HepG2细胞,导入的HBV能够运用自身的复制调控元件进行病毒的复制和蛋白表达。结论运用AdEasy系统能够简便、快速、高效地将HBV全基因组导入肝癌细胞系,为抗病毒药物的筛选及评价提供了有效的技术平台。
- 周彬梁敏锋李伟东王程王战会侯金林
- 关键词：肝炎病毒乙型腺病毒
