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平均分布细胞进行鼠疫杂交瘤株克隆化的实验研究被引量：6: 2007年; 目的探讨在建立了分泌抗鼠疫F1抗原的单克隆抗体杂交瘤株后,对其进行克隆化的实验方法。方法对我课题组融合成功的5株杂交瘤株,采用初步计数后取约100个细胞,平均分布于96孔细胞培养板进行克隆化,用间接ELISA法检测培养孔上清的抗体。结果用该方法进行克隆化,在96孔板中单克隆生长孔平均为26孔、多克隆为15孔,在1～2次克隆后,上清抗体检测均达到100%,与有限稀释法无差异。结论采用计数100个细胞进行克隆化的方法是可行的。; 杜春红陈平尹家祥钟佑宏于国林王鹏; 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体鼠疫克隆化

鼠疫F1单克隆抗体建株过程中的动物免疫被引量：3: 2005年; 目的探讨在建立抗鼠疫F1抗原的单克隆抗体杂交瘤株的过程中抗原免疫的剂量及免疫方法.方法采用F1抗原常规免疫、改良的F1抗原脾内注射免疫以及EV菌免疫3种方法免疫6～8周龄,体重为10～20g,健康的雌性BALB/c小鼠,并用间接ELISA法检测尾血中的抗体. 结果在常规免疫中,200μg 组和100μg组免疫效果优于50μg组,而200μg组和100μg组免疫效果基本一致;改良的F1抗原脾内注射免疫,血中抗体效价较高;EV菌免疫的效果不理想. 结论用F1抗原常规免疫小鼠,免疫剂量用100μg/只较为合适;若要缩短免疫时间,采用改良的脾内注射免疫法是理想的选择.; 尹家祥于国林陈平杜春红唐雪; 关键词：鼠疫F1抗原动物免疫单克隆抗体

血清学诊断技术在鼠疫诊断中的应用被引量：6: 2007年; 在鼠疫诊断学中．病原学诊断在鼠疫防治和科研工作中占据着十分重要的地位，鼠疫菌株的分离是确定鼠疫流行最直接和经典的方法。然而．分离鼠疫菌并非容易，尤其是要从人的样品中获得鼠疫菌。此时．血清学诊断技术在回顾性的诊断人和动物鼠疫、流行病学研究以及鼠疫监测中将是非常有用的技术。; 尹家祥于国林董兴齐; 关键词：鼠疫血清学试验

胶体金试纸条在一次鼠疫疫区处理中的应用被引量：5: 2006年; 目的:检验鼠疫检测胶体金试纸条(查抗原及抗体)在疫区处理中的应用效果。方法:分别用胶体金试纸条及血凝法对疫区的49份自死鼠及10份疑似病人血清进行了检测。结果:该试纸条与血凝法的符合率为100%,检出阳性脏器标本8份,阳性血清3份;敏感性上,胶体金试纸条较血凝高一个滴度。结论:鼠疫检测胶体金试纸条操作简便、快捷,有较好的特异性与敏感性,可用于疫区处理。; 王鹏尹家祥雷坤邓敏梁云于国林; 关键词：鼠疫胶体金试纸条疫区

胶体金免疫层析法快速诊断鼠疫的实验研究被引量：15: 2006年; 目的建立一种快速、简易的检测鼠疫F1抗原的胶体金免疫层析法(G ICA)。方法采用直径为20nm胶体金颗粒,标记F1单克隆抗体,并将标记物以6μL/cm喷于玻璃纤维;将另1株F1单克隆抗体与羊抗鼠IgG以1μL/cm喷线固定于硝酸纤维素膜上,装配后以4mm/条切割制成免疫层析检测试条。分别用粗制F1抗原和EV菌对该试纸条的敏感性进行测定,同时用44株鼠疫近缘菌及昆明小鼠、黄胸鼠、褐家鼠、大足鼠的正常血清等标本进行特异性检测。结果本试纸条可在15m in之内完成实验,检测粗制F1抗原的浓度可达0.5ng/mL,最小检出EV菌菌量为10万个;本方法的特异性为100%。结论G ICA检测鼠疫F1抗原特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。; 王鹏杜春红郭英尹家祥石丽媛陈平唐雪钟佑宏黄鹏吴明寿董兴齐于国林; 关键词：鼠疫胶体金免疫层析 F1抗原

胶体金免疫层析法检测鼠疫腐败材料被引量：12: 2006年; 目的评价胶体金免疫层析法(G ICA)对鼠疫腐败材料检测效果。方法将感染的动物脏器,分别置于室温(25℃)和37℃下,在保存的不同时期,用胶体金试纸条进行检测,细菌培养和反向血凝(R IHA)同步检测。结果感染材料,保存300d后,G ICA、R IHA检测均为阳性,20天后细菌培养为阴性;正常材料,保存300d后R IHA检测为阳性,而G ICA检测为阴性。结论对鼠疫腐败材料的检测G ICA优于R IHA和细菌培养,可广泛应用于现场材料的检测。; 郭英王鹏吴明寿于国林; 关键词：鼠疫胶体金免疫层析

胶体金免疫层析法诊断鼠疫的特异性试验被引量：3: 2006年; 目的研究胶体金免疫层析法用于鼠疫快速诊断的特异性。方法采用胶体金免疫层析测试条和鼠疫反向间接血凝试验(RIHA)平行检测。结果检测鼠疫菌F1抗原具有很强的特异性,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森等其他细菌发生交叉免疫反应。结论该方法简便、快速、敏感,适合现场鼠疫监测。; 戴瑞霞李敏刘兰李存香金泳张青雯于国林; 关键词：鼠疫胶体金免疫层析

金标法进行鼠疫F1McAb亚类的鉴定被引量：3: 2007年; [目的]对实验室融合成功的6株杂交瘤株分泌的鼠疫F1单克隆抗体进行Ig亚类鉴定,为后面的抗体纯化工作作出准备。[方法]采用胶体金标记法鼠单抗亚型测定试剂盒进行检测。[结果]6株杂交瘤株的亚型分别为IgM、IgG2a、IgG2b、IgG3和两株IgG1,轻链全为к链。[结论]采用金标法进行鼠单抗亚类鉴定,操作简便,结果清晰、稳定,不需特殊设备,值得采用。; 杜春红陈平钟佑宏尹家祥于国林; 关键词：金标法亚类

检测鼠疫抗体胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：5: 2006年; 目的建立快速、简易的检测鼠疫F1抗体的胶体金免疫层析法(G ICA)。方法(1)采用胶体金颗粒标记纯化F1抗原,并将标记物喷于玻璃纤维;同时将纯化F1抗原喷线固定于硝酸纤维素膜上,用于F1抗体的捕捉;按常规组装成检测鼠疫抗体免疫层析试纸条。(2)采用该试纸条与血凝法对同一份兔抗F1抗体进行检测,以评价该试纸条的敏感性。(3)采用该试纸条对44株非鼠疫菌的免疫鼠血清进行检测,以评价该试纸条的特异性。(4)采用该试纸条、血凝法及ELISA对607份血清标本进行检测,以评价该试纸条对现场材料的检测效果。结果(1)该试纸条可在15 m in之内完成检测;(2)在敏感性上,该试纸条对同一份免疫兔血清的检测较血凝法高一个滴度;(3)对被试的44株所选菌株的免疫鼠血清的检测均为阴性;(4)在对607份血清标本的检测中,免疫层析试纸条、血凝及ELISA三种方法的符合率中度,而免疫层析试纸条的敏感性分别比血凝与ELISA高111%和90%。结论以纯化的鼠疫F1抗原为基础建立的G ICA检测鼠疫F1抗体的方法特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有较大的推广应用价值。; 王鹏石丽媛郭英杜春红尹家祥黄鹏钟佑宏董珊珊吴明寿于国林; 关键词：鼠疫 F1抗体

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