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母血中胎源RASSF1A基因的表达水平对于子痫前期的预测价值被引量：4: 2014年; 目的研究子痫前期患者在妊娠早、中期血浆中胎源性RASSF1A基因的水平，探讨其在预测子痫前期发生和发展中的作用。方法选取孕妇325名，分别在其孕7～12周、13～18周及19-24周采外周血，提取游离DNA，采用甲基化敏感的限制性酶切消化法联合荧光定量PCR技术检测血浆中超甲基化RASSF1A基因的含量，同时监测孕妇血压、尿蛋白值及临床表现，将最终发展为子痫前期的孕妇列入子痫前期组，从正常孕妇中随机选取30名列入对照组，回顾性分析两组孕妇血浆中超甲基化RASSF1A基因水平的差异，并进一步分析子痫前期临床分类、分型与该基因浓度的关系。结果（1）325名孕妇中26例发展为子痫前期患者，在妊娠13～18周子痫前期组超甲基化RASSF1A基因平均含量为141．62拷贝数／mL，正常妊娠组为98．90拷贝数／mL，差异有统计学意义；妊娠19～24周子痫前期组RASSF1A基因含量为对照组的2．03倍。（2）在妊娠13～24周，重度子痫前期超甲基化RASSF1A基因浓度均高于轻度子痫前期，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与晚发型重度子痫前期组相比，在妊娠19～24周早发型重度子痫前期组RASSF1A基因的浓度升高（P〈0．05）。结论孕妇血浆中超甲基化RASSF1A基因浓度的异常变化可能发生在妊娠中期，对早期预测子痫前期的发生及进展具有重要意义。; 王健杨晶武晓红穆雅琴李拴明崔克王喜英赵富玺; 关键词：子痫前期荧光定量PCR 非侵入性产前诊断

NAC对感染性早产小鼠胎盘TLR4和NF-κB的表达影响被引量：1: 2009年; 目的:探讨感染性早产小鼠胎盘Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-kappaB p65(NF-κBp65)的表达以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对表达的影响。方法:利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测早产小鼠胎盘TLR4、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达,以及NAC干预后早产率、TLR4和NF-κB p65的表达变化。结果:对照组TLR4、NF-κB p65少量表达,而早产小鼠模型组两种蛋白表达都显著升高(P<0.05);NAC预防组和模型组相比,TLR4表达无明显变化,而NF-κB p65表达明显减少(P<0.05),并且早产率下降明显(P<0.05);NAC治疗组和模型组两种蛋白的表达差异无统计学意义。结论:NAC可以降低小鼠的早产率以及NF-κB p65在胎盘的表达。; 邢志伟赵富玺刘润花穆雅琴; 关键词：NAC 早产胎盘 NF-ΚB

利用母胎间基因甲基化的差异性检测母血中微量胎儿DNA方法的建立被引量：1: 2011年; 随着表观遗传学方法在无创性产前诊断中的逐步应用，第一个普通应用的胎儿表观遗传学标记低甲基化maspin基因突破了胎儿性别和基因多态性的局限，为母血中胎儿DNA应用于临床开辟了新的领域，象征着非创伤性产前诊断的研究向前迈进了一大步。; 王健赵富玺刘润花武永明郭俊成穆雅琴; 关键词：胎儿DNA 基因甲基化母血 MASPIN基因非创伤性产前诊断无创性产前诊断

孕妇血浆中胎儿表观遗传标记的检测效率评价: 2014年; 目的分析母血中非性别依赖的胎儿表观遗传学标记超甲基化Ras相关区域家族1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因的检测效率,探讨其替代SRY基因检测游离胎儿DNA的可行性. 方法选择2011年5月1日至2012年4月30日于山西省大同市第一和第五人民医院进行产前检查的正常妊娠妇女50例,分别于妊娠早、中、晚期采集外周静脉血,胎儿出生后确定为男胎的孕妇（28例）为研究对象.选择20例同期体检的健康未妊娠女性作为阴性对照.通过甲基化敏感的限制性内切酶消除母源性（非甲基化）RASSF1A基因,采用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应检测胎源性（超甲基化）RASSF1A基因,同时测定孕妇血浆中SRY基因并作为参照,对检测结果进行相关性分析.统计学方法采用Shapiro-wilk分析、Pearson或Spearman秩相关分析和x2检验. 结果 28例男胎孕妇共进行84次检测,超甲基化RASSF1A基因最早于妊娠第8＋2周检出,检出率97.62％（82/84）.对照组未检测到超甲基化RASSF1A基因和SRY基因.妊娠早、中、晚期孕妇血浆中酶切后RASSF1A基因及SRY基因的含量分别为（60.19±14.16） copies/ml与（58.22±15.13） copies/ml（r=0.933,P＜0.01）、（99.18±28.44） copies/ml与（95.43±32.33） copies/ml（r=0.931,P＜0.01）、（144.93±33.51） copies/ml与（132.96±28.24） copies/ml（r=0.654,P＜0.01）.酶切后RASSF1A和SRY基因含量均与孕周呈正相关（r分别为0.933和0.896,P均＜0.01）. 结论检测表观遗传学标记超甲基化RASSF1A基因所得的游离胎儿DNA结果与SRY基因具有较高的一致性,该基因突破了胎儿性别的局限,有助于扩大无创伤性产前诊断的临床应用范围.; 王健杨晶刘润花穆雅琴郭俊成武晓红刘丽华白光梅赵富玺; 关键词：肿瘤抑制蛋白质类甲基化产前诊断

甲基化荧光PCR检测母血中游离胎儿maspin基因的研究被引量：1: 2012年; 目的:探讨Taqman探针与甲基化特异性PCR(MSP)技术结合测定孕妇血浆中甲基化maspin(M-maspin)基因和非甲基化maspin(U-maspin)基因的可行性,并分析微量U-maspin的临床意义。方法:选择正常早、中、晚期妊娠妇女各30例为研究对象,健康未妊娠女性30例为对照,提取其血浆游离DNA。通过含目的基因质粒标准品绘制标准曲线,并应用甲基化荧光PCR方法检测各组血浆标本亚硫酸氢盐修饰后M-maspin基因和U-maspin基因的含量,分别代表母源性游离DNA和胎源性游离DNA水平。结果:除3例早期妊娠孕妇外,其余孕妇血浆中均检出了U-maspin基因,平均浓度在早期妊娠组为57拷贝/ml,中期妊娠组为121拷贝/ml,晚期妊娠组为561拷贝/ml;占母源性M-maspin基因的比例分别为1.88%、3.21%、9.58%。结论:母血中U-maspin基因具有游离胎儿DNA的动力学特点,可能成为一种通用胎儿标记物,应用甲基化荧光PCR技术检测孕妇血浆中微量U-maspin基因方法准确、可行。; 李拴明王健杨晶赵富玺

N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖诱导的小鼠感染性早产的影响: 2009年; 目的:初步探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预防感染性早产的作用机制。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的感染性早产小鼠模型(模型组)胎盘NF-κBp65、TNF-αmRNA和蛋白的表达,以及NAC干预后(NAC预防组和NAC治疗组)早产率、NF-κBp65和TNF-α的表达变化,并以正常孕鼠作对照。结果:对照组孕鼠无早产的发生,而模型组全部早产,组间比较有显著性差异(P<0.01);对照组NF-κBp65、TNF-α有少量表达,模型组则都显著升高(P<0.05);NAC预防组与模型组比,NF-κBp65和TNF-α表达明显减少(P<0.05),且早产率也明显下降(P<0.05);NAC治疗组与模型组相比无统计学差异。结论:NAC可降低感染性早产小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-α的表达,对于感染性早产有保护作用。; 邢志伟赵富玺刘润花穆雅琴; 关键词：早产 NAC

感染性早产小鼠胎盘TLR4,NF-κB和TNF-α的表达及NAC的干预作用研究被引量：3: 2009年; 目的:通过研究感染性早产小鼠胎盘Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4),核转录因子-kappaB p65(Nuclear factor-kappaB p65,NF-κBp65)和肿瘤坏死因子α(Tumornecrosis factor-alpha,TNF-α)的表达以及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)的干预影响,探讨一种预防小鼠感染性早产发生的新策略。方法:利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测早产小鼠胎盘TLR4、NF-κBp65、TNF-αmRNA和蛋白的表达,以及NAC干预后早产率、TLR4、NF-κBp65和TNF-α的表达变化。结果:对照组都有TLR4、NF-κBp65、TNF-α的少量表达,LPS模型组和对照组相比三者表达都显著升高(P<0.05);NAC+LPS和模型组相比,TLR4表达无明显变化,而NF-κBp65和TNF-α表达明显减少(P<0.05),并且早产率也明显下降(P<0.05);LPS+NAC治疗组和模型组相比无统计学意义。结论:NAC可以降低感染性早产小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-α的表达,在早产的预防中有一定作用。; 赵富玺邢志伟刘润花; 关键词：早产胎盘 NF-ΚB TNF-Α NAC

定量检测子痫前期孕妇血浆中超甲基化的RASSF1A基因被引量：3: 2010年; 目的探讨子痫前期孕妇血浆中超甲基化的Ras相关区域家族1A（ras association domain family 1A，RASSF1A）基因的水平变化及应用价值。方法选择晚期妊娠子痫前期患者60例为实验组，其中轻度和重度子痫前期各30例；正常晚期孕妇60名为对照组。提取血浆游离DNA，经甲基化敏感的限制性内切酶处理，实时定量检测酶切前、后RASSF1A基因的浓度，同时检测β肌动蛋白（β-actin）基因以确保酶的完全消化。结果子痫前期孕妇血浆中超甲基化的RASSF1A基因含量为正常妊娠组的3．31倍。轻、重度子痫前期患者浓度有差异，中位数分别为1659．00copies／mL及2036．50copies／mL（P〈0．05）。结论子痫前期孕妇血浆中的超甲基化RASSF1A基因含量明显升高，且浓度水平与子痫前期的严重程度相关。; 王健赵富玺武永明刘润华穆雅琴; 关键词：孕妇血浆子痫前期

Toll样受体4/核因子κB与早产被引量：2: 2009年; 早产是妊娠期围生儿死亡及并发症的主要原因之一。经研究证实，感染与早产的发生密切相关，而Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF—κB）在脂多糖信号转导过程中起着重要作用。TLR4识别LPS并启动活化信号，从而激活NF—κB，后者转位入核内诱导细胞因子产生，介导炎性反应。TLR4与NF—κB炎症信号转导途径己成为早产研究的热点。本文概述了TLR4／NF—κB信号转导通路以及相关因子，并且阐明了TLR4／NF-κB-9早产的密切关系，以期早产研究的新方向。; 邢志伟赵富玺; 关键词：TOLL样受体4 核因子ΚB 早产

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山西省科技攻关计划项目(20080311072)

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