江苏省高校自然科学研究项目(08KJB310009)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：黄瑞吴淑燕李嫄渊李琼储元元更多>>
- 相关机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自噬对鼠伤寒沙门菌所致的巨噬细胞凋亡的影响被引量：8
- 2010年
- 为探讨鼠伤寒沙门菌与巨噬细胞共作用时细胞自噬对凋亡的影响,用加入自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和未加RAPA的RPMI1640过夜培养小鼠腹腔巨噬细胞J774A.1,以携带一分子量为100kb毒力质粒的鼠伤寒沙门菌标准毒株SR-11为受试菌。首先测定RAPA对菌量及细胞活性的影响,然后建立细胞感染模型,在细菌与细胞共作用后动态观察24h,不同时间点检测细胞超微结构变化、自噬泡的形成、Beclin-1和Bcl-2的表达、细胞存活率和胞内活菌计数以及细胞凋亡情况。结果显示,RAPA单独作用于细菌或细胞时菌量及细胞活性均无变化;而对细胞感染模型而言,RAPA作用与否细胞内的细菌数及细胞存活率均有显著改变,RAPA可明显降低细胞内活菌数及其所致的巨噬细胞凋亡率(P<0.05);RAPA干预组在细菌与细胞共作用早期,部分细菌可被双层膜包裹形成自噬泡,细胞超微结构正常;Beclin-1的表达量增加,而Bcl-2的表达量降低;后期细胞破坏程度明显轻于未用RAPA组。以上结果提示,通过调控细胞自噬水平以减轻宿主细胞凋亡,可作为防治某些感染性疾病的新途径。
- 吴淑燕李琼储元元李嫄渊黄瑞秦正红
- 关键词：鼠伤寒沙门菌巨噬细胞自噬凋亡
- 小鼠髓系树突状细胞的体外扩增和超微结构被引量：2
- 2010年
- 背景:树突状细胞可激发初始型T细胞,是目前所知机体功能最强的专职抗原递呈细胞,但对其超微结构的研究鲜见报道。目的:观察小鼠髓系树突状细胞不同发育阶段以及CD40配基化和肿瘤坏死因子α刺激后树突状细胞的超微结构特征。方法:无菌取小鼠骨髓前体细胞,采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4联合方案体外诱导获得未成熟树突状细胞,负载早期凋亡的肿瘤细胞后采用小鼠CD40L转基因CHO细胞和肿瘤坏死因子α刺激48h,按常规方法制备超薄切片,透射电镜观察树突状细胞的超微结构特征。结果与结论:前体细胞及未成熟树突状细胞内有清晰可见的吞饮泡,未成熟树突状细胞的胞质内可见"C"形和环形溶酶体;凋亡肿瘤细胞负载的树突状细胞可见凋亡小体被吞噬或包裹的现象,小鼠CD40L转基因CHO细胞和肿瘤坏死因子α均可促进树突状细胞成熟,但肿瘤坏死因子α作用后,部分树突状细胞有自噬和凋亡改变。结果提示,小鼠骨髓来源树突状细胞在不同分化发育阶段有其特殊的超微结构表现,肿瘤坏死因子α可介导树突状细胞发生自噬和凋亡。
- 吴淑燕王响英杨刚李苏安黄瑞
- 关键词：树突状细胞超微结构自噬凋亡小鼠
- 伤寒沙门菌质粒诱导巨噬细胞凋亡被引量：4
- 2009年
- 为探讨伤寒沙门菌质粒pRST98上毒力基因与小鼠巨噬细胞J774A.1凋亡的关系及可能机制,将鼠伤寒沙门菌标准毒株SR-11、低毒株RIA和pRST98经接合转移导入RIA的接合子pRST98/RIA,体外分别与小鼠巨噬细胞J774A.1共培养,Giemsa染色法确定细菌对细胞的感染复数(multiplicity,MOI)。于0、1、3、6、12和24h用Annexin V-FITC试剂盒检测细菌感染后细胞凋亡情况;用透射电镜观察细胞的变化;用JC-1染色法、激光扫描细胞仪及激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位(△Ψm)的改变。结果显示,细菌与J774A.1的最佳MOI为100∶1。从感染后3h起,J774A.1的凋亡率表现为SR-11组>pRST98/RIA组>RIA组(P<0.05);电镜观察的结果显示3h起各组细胞内可见染色质边聚等凋亡改变,12h见凋亡小体,以SR-11组最为明显,pRST98/RIA组多于RIA组,24h各组细胞多为坏死改变;感染后J774A.1线粒体△Ψm下降的百分率表现为SR-11组、pRST98/RIA组和RIA组依次降低。以上结果表明携带质粒pRST98的宿主菌毒力增强,感染后使巨噬细胞的凋亡率随时间延长而增加。
- 眭阳吴淑燕宋国蓉李嫄渊吕杰黄瑞
- 关键词：鼠伤寒沙门菌质粒透射电镜观察ANNEXIN
- 雷帕霉素对伤寒沙门菌质粒pR_(ST98)与巨噬细胞相互作用的影响被引量：3
- 2010年
- 研究自噬诱导剂雷帕霉素(RAPA)对伤寒沙门菌质粒pRST98与巨噬细胞相互作用的影响。用加入RAPA和未加药的RPMI1640培养巨噬细胞J774A.1后,分别与携带pRST98的伤寒沙门菌ST8,无质粒的伤寒沙门菌ST10和鼠伤寒沙门菌标准毒株SR-11共作用,观察细胞自噬和凋亡情况。结果显示,MDC染色后2h和4h细胞自噬泡的数量SR-11组ST8组>ST10组,RAPA干预后ST8组凋亡率下降,ST10组凋亡率升高(P<0.05);电镜下2～4h可见部分细菌被双层膜包裹,8h起可见凋亡改变。RAPA作用后,ST8组细胞破坏减轻,ST10组加重。提示伤寒沙门菌质粒pRST98与细胞自噬有关,在早期可抑制自噬,其诱导的巨噬细胞凋亡可被RAPA减轻,而RAPA能使ST10诱导的巨噬细胞凋亡增强。
- 李琼吴淑燕储元元廖莉李嫄渊黄瑞
- 关键词：雷帕霉素伤寒沙门菌巨噬细胞自噬
