国家重点基础研究发展计划(2003CB515505)
- 作品数：20 被引量：46H指数：4
- 相关作者：周鸿敏昌盛陈必成蔡明杜敦峰更多>>
- 相关机构：华中科技大学中国人民解放军总医院解放军第307医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经菌毛蛋白-1在移植肾组织中的表达及意义
- 2007年
- 神经菌毛蛋白-1（Neuropilin-1；NRP-1）是一种位于神经纤维轴突上的跨膜糖蛋白，其长度为130～140kd，1995年首次被Fujisawa等发现。最初多是关于NRP-1作为信号素Ⅲ（semaphorin Ⅲ）和血管内皮生长因子（VEGF）受体的研究。2002年Tordjman等发现NRP-1是引发初次免疫应答的一种基本物质。2004年Bueder等。又发现NRP-1组成性表达于调节性T淋巴细胞表面，
- 张利改周鸿敏童荔郭晖杨成陈忠华
- 关键词：神经纤维蛋白-1移植肾组织菌毛NRP-1跨膜糖蛋白
- 小鼠CD4^+CD25^+T细胞的分离、鉴定和体外功能的检测被引量：8
- 2005年
- 目的 建立CD4 + CD2 5 + T细胞的免疫磁性分离(MACS)方法,并检测其体外免疫抑制功能。方法 分离C5 7BL 6小鼠和Balb c小鼠脾脏细胞后运用MACS法分离CD4 + CD2 5 + T淋巴细胞,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测选出细胞的活性和纯度,用淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能。结果 MACS分选法分选出的CD4 + CD2 5 + T细胞活性>97% ,纯度>95 % ;此方法获得的CD4 + CD2 5 + T细胞在体外不增殖,经丝裂原活化后可以抑制同品系小鼠和异品系小鼠的CD4 + CD2 5 -T细胞增殖,这种抑制作用具有剂量依赖性。结论 MACS法可简单迅速分选出高纯度无菌CD4 + CD2 5 + T细胞,且不影响细胞活力。CD4 + CD2 5 + T调节性细胞在体外具有免疫无能和免疫抑制作用;丝裂原活化的该细胞免疫抑制功能具有剂量依赖性,但不具有抗原特异性。
- 周洁袁劲周鸿敏杜敦峰陈必成昌盛陈忠华
- 关键词：CD4^+CD25^+T细胞免疫磁性分离免疫抑制
- 输注脾细胞建立输血相关的移植物抗宿主模型被引量：3
- 2006年
- 目的探讨输注同种脾细胞建立小鼠输血相关的移植物抗宿主(TA-GVHD)模型及其特点。方法分离C57BL/6(H-2b)脾细胞,分别经静脉输注给Balb/c(H-2d)裸鼠与F1代(C57BL/6×Balb/c H-2b/d),建立输血相关的移植物抗宿主模型。活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(5,6-carboxyfluorescein diacetate succini midyl ester,CFSE)标记供者脾细胞,通过流式细胞仪分析供者细胞在受者体内的增殖;免疫组化分析供者脾细胞survivin的表达;检测Balb/c裸鼠体内抗供者抗体及IL-10浓度;分析皮肤、小肠、肝脏的病理变化。结果输注同种脾细胞成功建立急性TA-GVHD模型。受者脾脏及外周可以检测到标记后增殖的供者细胞。小鼠的病理改变主要出现在肝脏,浸润细胞早期表达survivin。小肠及皮肤未见明显的病理改变。TA-GVHD裸鼠第7天IL-10、抗-Balb/c显著升高。结论输注同种脾细胞可以建立TA-GVHD模型,并具有简单、快速、稳定的特性,为诊断、治疗GVHD提供了良好的模型。
- 陈必成昌盛向芙莉郭晖唐莉金昊曾宁陈忠华
- 关键词：淋巴细胞
- 抗CD132抗体介导同种异型抗原激活的T细胞凋亡(英文)
- 2005年
- 目的研究抗CD132单抗在体外对T细胞增殖的抑制作用以及其可能的临床应用价值。方法分离BALB/c、C57BL/6小鼠的脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养(MLC)。分别于第一天(组1)或第三天(组2)加入抗CD132单抗(终浓度达到100mg·L-1)。用流式细胞技术检测细胞增殖(CFSE),T细胞凋亡(PE-CD3,FITC-Annexin-v)以及细胞分裂周期(propidiumiodidestain)。T细胞Survivin的表达则用免疫化学染色法检测。结果混合淋巴细胞培养的结果显示CFSE标记的脾细胞出现了不同程度的荧光强度减弱,提示不同分裂次数的细胞存在。与MLC组比较,组1和组2中均未发现有进一步细胞分裂的迹象存在。在第3天时,组1可以检测到部分T细胞凋亡,而在培养的最初两天并无此现象。在组2中,第4天处于G2/M期的细胞出现减少而凋亡细胞增多。对照组无此现象发生(P<0.01)。同时,在MLC组中可检测到survivin在T细胞表达,而在组1和组2中则未能检测到。结论研究表明阻断CD132信号途径可以通过诱导同种异型抗原活化的T细胞凋亡而抑制T细胞增殖。因此,抗CD132单抗很有希望成为器官移植中抗排斥的临床药物。
- 陈必成昌盛唐莉张鑫向芙莉郭晖陈忠华
- 关键词：细胞培养抗体介导细胞凋亡T细胞器官移植
- 肾移植患者发生移植肾功能延迟恢复的危险因素分析及预测被引量：6
- 2006年
- 目的研究肾移植患者发生移植肾功能延迟恢复(DGF)的相关危险因素及预测方法。方法回顾性分析212例具有完整人类白细胞抗原(HLA)配型资料的尸体肾移植患者的临床资料,对患者的性别、年龄、血型、乙型肝炎病毒感染情况、心功能分级、是否再次移植、透析时间长短、HLA配型情况、供肾热缺血时间、供肾冷缺血时间以及血管开放后泌尿时间进行严格的记录和评估。用一元logistic回归方法初步找出与DGF发生相关的因素,再用多元逐步logistic回归方法找出导致DGF发生的各项高危险因素,建立移植肾功能延迟恢复的logistic回归模型。结果本组患者DGF发生率为16.51%。由一元logistic回归方法分析发现在α=0.05的水准上,DGF与心功能分级、透析时间、HLA-Ⅰ类错配、HLA总错配及移植肾冷缺血时间有关,但与是否再次移植、性别、年龄、血型、乙型肝炎病毒感染情况、肾脏热缺血时间、血管开放后泌尿时间等均无明显的相关性。用多元逐步lo-gistic回归分析方法发现患者心功能分级、HLA-Ⅰ类抗原错配和移植肾冷缺血时间是影响DGF的重要因素。结论DGF的发生不是移植肾冷保存时间过长或其它任何单一因素导致的,而是由供肾质量、免疫学因素和受者功能状况等多种因素决定的。应用DGF的多元回归预测模型,可以计算出患者发生DGF的概率,从而进行必要的临床干预,预防DGF的发生。
- 陈杰曾凡军金昊明长生陈知水张伟杰林正斌刘敦贵陈忠华
- 关键词：肾移植LOGISTIC模型
- 舒莱预防肾脏移植物急性排斥反应的随机对照试验研究被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨白细胞介素2受体单克隆抗体--舒莱(Simulect)对移植肾急性排斥反应的预防作用以及用药的安全性与药物的毒副作用.方法:将我器官移植移植中心1999年3月～2002年10月共46例肾移植受者为研究对象,随机分成舒莱组(23例)和对照组(23例),两组肾移植术后均接受以Neoral为基础的三联免疫抑制剂.舒莱组术前2h和术后4d各给予舒莱20mg静脉滴注.观察急性排斥反应、Neoral、皮质激素和硫唑嘌呤用量及药物的毒副作用.实验室检测血CsA浓度和肝肾功能.结果:研究结果表明,舒莱组无1例发生急性排斥反应,对照组术后8周内发生3例4次急性排斥反应.两组均未发生明显的毒副作用.两组间Neoral用量及血CsA浓度无明显差异.对照组因发生急性排斥反应,8周内皮质激素用药量总量大于舒莱组.结论:舒莱对移植肾急性排斥反应具有明显的预防作用,且用药方法简便,疗程短,无明显的毒副作用.
- 蔡明石炳毅陈忠华钱叶勇莫春柏周文强
- 关键词：肾移植移植物排斥舒莱
- 免疫抑制状态下小鼠MD-1表达的影响因素及其在皮肤移植中的效应被引量：2
- 2006年
- 目的探讨免疫抑制状态下小鼠MD-1表达的影响因素及在皮肤移植中的效应。方法采用小鼠同种皮肤移植模型,以环孢霉素A(CsA)、他克莫司(FK506)、霉酚酸酯(MMF)或雷帕霉素(SRL)为免疫抑制手段。结果CsA和MMF能抑制脾细胞的MD-1表达和增殖反应强度,下调血清IL-2水平和上调IL-10水平,并显著延长皮肤移植物平均存活时间(MST);FK506对IL-10水平无明显影响;而SRL对MD-1表达及IL-2与IL-10水平均无明显影响。MD-1表达水平与脾细胞增殖反应强度和血清IL-2水平呈极显著正相关,和IL-10水平呈极显著负相关。结论CsA、FK506和MMF能抑制小鼠MD-1的表达,其作用与血清IL-2水平下调有关。在免疫抑制状态下,MD-1表达下调与同种皮肤移植物存活时间延长有关,而其表达上调对排斥反应的发生具有一定的指示作用。
- 张鑫陈必成昌盛陈忠华
- 关键词：免疫抑制剂皮肤移植
- Neuropilin-1在CD4^+CD25^+T细胞上的表达被引量：2
- 2007年
- 目的探讨neuropilin-1(NRP1)在外周血中CD4^+CD25^+T细胞上的表达以及意义。方法收集肾移植术后长期存活、慢性移植物肾病和急性排斥患者以及健康成年人的外周血,分离外周血淋巴细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞上NRP1和Foxp3的阳性细胞的百分比。结果各组CD4^+CD25^+T细胞NRP1的表达率差异有统计学意义(P<0.05);各组CD4^+ CD25^+T细胞Foxp3的表达率差异亦有统计学意义(P<0.05)。长期存活组CD4^+CD25^+T细胞NRP1和Foxp3表达率分别为19.76%±3.84%、50.19%±3.90%,显著高于对照及慢性移植物肾病和急性排斥组(P<0.05);急性排斥组的CD4^+CD25^+T细胞NRP1和Foxp3表达率最低4.64%±1.26%、17.24%±5.29%。各组CD4^+CD25^+T细胞NRP1表达变化趋势与Foxp3变化趋势相同。结论NRP1在长期存活组的外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞的表达上调,在急性排斥组时表达下调,且其在各组的表达变化趋势与Foxp3的表达变化趋势是一致的,这就提示CD4^+CD25^+NRP1^+T细胞是一群调节性T细胞,即NRP1是CD4^+CD25^+T_(reg)的一个重要的表面标志。
- 张利改周鸿敏童荔蔡兰军徐逸吴轲陈忠华
- 关键词：肾移植移植耐受调节性T细胞NEUROPILIN-1
- 改进法建立大鼠颈部异位心脏移植模型被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨大鼠颈部异位心脏移植模型的改进。方法:120只Lewis鼠随机分为2组,实验组40对,行改进法颈部异位心脏移植,大鼠供心无名动脉和肺动脉分别与受者颈总动脉和颈外静脉行端侧吻合;对照组20对,行Chen氏法(陈忠华所创之术式)心脏移植。结果:实验组总缺血时间和术中出血量分别为(45.74±1.67)min与(0.97±0.23)ml,移植心存活时间超过6周。对照组分别为(56.06±3.07)min与(2.18±0.27)ml,移植心存活时间超过6周。结论:改进术式可减少术中失血、提高手术速度、明显缩短供心总缺血时间,为安全、简便和可行的方法,值得推广。
- 黄建敏周鸿敏陈忠华
- 关键词：心脏移植异位移植
- CD8^+CD28^-NRP-1^+T细胞在肾移植手术后患者外周血中的比例变化及意义被引量：3
- 2007年
- 用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义。选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例,慢性移植物肾病者20例,急性排斥者15例,取受试者外周静脉血,分离单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞在CD8^+CD28^-T细胞群中的比例。结果表明组间比较得出,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞比例在四组之间均有统计学差异(P<0.05)。其中在长期存活组表达量最高,其CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts的比例分别为16.15%±1.49%和11.90%±2.73%,其次为正常健康人(13.83%±2.38%、9.44%±2.03%),然后为慢性移植物肾病组(8.03%±2.67%、5.26%±0.65%),而急排组最低(3.34%±1.73%、2.36%±1.14%),并且四组间这两种细胞呈同一变化趋势且前者的变化幅度大于后者。组内比较显示,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞比例均高于CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞(P<0.05)。CD8^+CD28 NRP-1^+Ts细胞可以从整体水平上反映肾移植术后患者的免疫状态,它比CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞更能全面的反映术后患者的预后情况。
- 童荔张利改周鸿敏蔡兰军徐逸吴轲李俊华陈忠华
- 关键词：NEUROPILIN-1CD8^+TS细胞肾移植
