国家自然科学基金(20362001) 作品数:9 被引量:38 H指数:4 相关作者: 梁智群 陈桂光 张云开 吴孔阳 黄桂华 更多>> 相关机构: 广西大学 广西科学院 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 化学工程 更多>>
一株产α-葡萄糖苷酶菌株的鉴定和选育 被引量:4 2012年 通过平板初筛和摇瓶复筛,结合酿酒酵母利用可消化性糖和高效液相色谱法,从海泥中分离到一株产α-葡萄糖苷酶菌株YX41,纯化后经形态观察、生理生化特征和26 S rDNA序列及系统发育树分析,鉴定菌株YX41为伯顿毕赤酵母。通过UV-LiCl对出发菌株YX41进行复合诱变处理,获得一株正向突变株ZG36,该突变株经摇瓶发酵,α-葡萄糖苷酶活力达到4.32 U/mL,比出发菌株提高了32%。 吴孔阳 齐宗献 黄桂华 曹喜秀 李秋蓉 陈桂光 梁智群关键词:Α-葡萄糖苷酶 诱变 高产α-葡萄糖苷酶黑曲霉的微波选育及发酵条件优化 被引量:4 2014年 采用微波诱变技术对黑曲霉J2进行选育,得到1株α-葡萄糖苷酶活力较高的突变菌株ANY-4,酶活力达到305 U/mL,比出发菌株提高了38.6%,且稳定性良好。通过单因素和正交试验得到最适培养条件为:玉米淀粉80 g/L、玉米浆干粉40 g/L、初始pH 4.5、装液量50 mL/500 mL、接种量3%、培养温度36℃、摇床转速240 r/min、培养时间40 h。在最优培养条件下进行发酵,α-葡萄糖苷酶活力达到427 U/mL,比优化前提高了40%。 易菊阳 梁钰婷 陆兵 吴昊 黄桂华 陈桂光 梁智群关键词:Α-葡萄糖苷酶 微波诱变 黑曲霉 发酵条件优化 黑曲霉α-葡萄糖苷酶cDNA的克隆及表达 被引量:12 2006年 研究黑曲霉(Aspergillus niger)M-1菌株的α-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆及表达。以M-1菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR扩增α-葡萄糖转苷酶的cDNA,重组到Trc启动子控制下的表达载体pSE380中,构建重组质粒pSE-αtg,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。初步研究表明:重组蛋白具有葡萄糖苷酶活性,最适pH为6.0,最适温度为45℃,金属离子Cu2+和Mn2+对酶活力有明显的促进作用。添加1.6mmol/L IPTG对重组菌的诱导作用最大,在培养中添加麦芽糖,对重组菌产酶有显著的促进作用。 于岚 张云开 苏艳 凌敏 陈桂光 梁智群关键词:Α-葡萄糖苷酶 RT-PCR 克隆 响应面法优化黑曲霉发酵产低聚异麦芽糖培养基 被引量:7 2012年 采用全因子试验、最陡爬坡试验以及Box-Behnken试验设计对黑曲霉CU-1(Aspergillus niger CU-1)发酵生产低聚异麦芽糖培养基的主要成分进行优化。结果表明:最优培养基成分为:麸皮浸汁体积分数4%、玉米浆添加量19.67g/L、NaNO3添加量2.24g/L、木薯淀粉糖化液添加量250g/L,在该培养条件下,在3.6L发酵罐中进行验证,发酵液中异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖总产量达到37.4%,低聚异麦芽糖总产量高达83.1%,说明Box-Behnken试验设计法用于黑曲霉发酵生产低聚异麦芽糖培养基优化是可行的,数学模型的预测值与实验观察值相符。 吴孔阳 王学军 周培华 黄时海 张云开 陈桂光 梁智群关键词:黑曲霉 Α-葡萄糖苷酶 响应面分析法 培养基优化 低聚异麦芽糖 响应面法优化黑曲霉产α-葡萄糖苷酶发酵条件 2015年 在液体发酵单因素研究的基础上,通过二水平设计的Plackett-Burman试验确定3个对黑曲霉产α-葡萄糖苷酶影响的关键因素:玉米淀粉用量、装液量和温度。再通过最陡爬坡实验逼近最大酶活区。最后利用响应面法中的Box-Behnken试验设计,进行三因素三水平的响应面分析,以期获得黑曲霉产α-葡萄糖苷酶最优的发酵培养基和发酵条件。优化结果表明,黑曲霉产葡萄糖苷酶最优条件为:玉米淀粉55.8 g/L,玉米浆干粉30 g/L,接种量4%(体积分数),装液量49.3 m L(500 m L摇瓶),摇床转速240 r/min,初始p H4.8,发酵温度36.3℃。优化后α-葡萄糖苷酶活为375.5 U/m L。 陆兵 武玉莹 李志弘 梁钰婷 王超 黄桂华 梁智群关键词:黑曲霉 Α-葡萄糖苷酶 响应面法 发酵条件优化 黑曲霉低聚异麦芽糖高产菌株的诱变选育 被引量:7 2011年 以黑曲霉GXM-3为出发菌株进行60Co-γ射线与紫外线照射复合诱变育种,通过苔盼兰平板筛选及摇瓶培养,获得42株转化木薯淀粉液化液生成低聚异麦芽糖浆能力较强的突变株。其中,突变株D-597的转化能力最强。其在3L发酵罐中发酵80h,糖浆产物中低聚异麦芽糖含量达到最高值169.4mg/mL,比出发菌株提高了37.2%,发酵周期则缩短了40h。突变株D-597在利用木薯淀粉生产低聚异麦芽糖方面具有一定的工业应用前景。 陈桂光 李玮 齐辉连 张云开 梁智群关键词:黑曲霉 低聚异麦芽糖 诱变育种 Α-葡萄糖苷酶 绿藻高效制氢影响因素的研究 被引量:5 2007年 绿藻作为生物能源的研究和开发具有诱人的发展前景。概述绿藻制氢和产氢途径的研究进展,重点介绍绿藻高效制氢的影响因素——绿藻[Fe]-氢化酶的研究和绿藻制氢的重要控制参数;对绿藻制氢作为生物能源的开发应用前景进行了展望。 潘丽霞 杨登峰 梁智群关键词:绿藻 生物制氢 透性化处理提高黑曲霉细胞α-葡萄糖苷酶的表观转苷活力 被引量:2 2011年 黑曲霉菌株D-597所产α-葡萄糖苷酶是胞内酶,完整细胞呈现的酶活力较低。研究了吐温-80、十六烷基溴化铵(CTAB)、乙醚、丙酮、戊二醛、乙醇等渗透剂的透性化效果,并对最适渗透剂戊二醛的透性化条件进行了优化,最优透性化处理条件为:每1g湿菌丝体添加30mL浓度为10%(v/v)的戊二醛溶液,处理温度30℃,处理时间60min。制备所得的透性化细胞的表观酶活达到483.9U/g湿菌体,是完整细胞表观酶活的193.3%。使用透性化细胞转化生产低聚异麦芽糖(IMO),其转化周期为24h,较完整细胞缩短24h,转化率保持在70%以上,具有一定的工业化应用前景。 陈桂光 李玮 符佳精 张云开 梁智群关键词:黑曲霉 低聚异麦芽糖 Α-葡萄糖苷酶 α-葡萄糖苷酶的异源表达及纯化研究进展 被引量:4 2011年 α-葡萄糖苷酶是工业生产低聚异麦芽糖的关键酶,应用领域较广,目前α-葡萄糖苷酶有大肠杆菌、酵母等表达系统,但酵母表达系统表达α-葡萄糖苷酶更具有显著的优势。层析是分离纯化α-葡萄糖苷酶的重要途径。概述了α-葡萄糖苷酶及其异源表达、分离纯化的最新研究进展,以便为该酶的深入研究和应用提供借鉴作用。 吴孔阳 陈桂光 黄时海 张云开 于岚 梁智群关键词:Α-葡萄糖苷酶 低聚异麦芽糖 异源表达 纯化