您的位置： 专家智库 > >

国家重点基础研究发展计划(2003CB515508)

作品数：7 被引量：4H指数：1
相关作者：沈倍奋黎燕李松肖鹤于鸣更多>>
相关机构：军事医学科学院北京大学更多>>
发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 5篇细胞
  • 4篇免疫
  • 4篇免疫抑制
  • 4篇CD4
  • 3篇淋巴
  • 3篇淋巴细胞
  • 3篇免疫抑制剂
  • 2篇新型免疫抑制...
  • 2篇排斥
  • 2篇分子
  • 1篇凋亡
  • 1篇亚胺
  • 1篇移植排斥
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛移植
  • 1篇抑制物
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光素
  • 1篇诱导细胞
  • 1篇诱导细胞凋亡

机构

  • 6篇军事医学科学...
  • 2篇北京大学

作者

  • 6篇沈倍奋
  • 5篇李松
  • 5篇黎燕
  • 4篇于鸣
  • 4篇肖鹤
  • 2篇冷希圣
  • 2篇朱继业
  • 2篇高杰
  • 2篇张磊
  • 1篇张纪岩
  • 1篇孙瑛勋
  • 1篇董波
  • 1篇崔健
  • 1篇张静蕊
  • 1篇冯健男
  • 1篇沈丹华
  • 1篇张晗
  • 1篇李涛

传媒

  • 4篇中华微生物学...
  • 1篇军事医学科学...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇中华普通外科...

年份

  • 4篇2007
  • 1篇2006
  • 1篇2004
  • 1篇2003
共 7 条 记 录，以下是 1-7
全选 清除 导出
排序方式：
FKBP12/BAX双聚体诱导细胞凋亡模型的建立
2003年
目的　建立FKBP12 /BAX双聚体可诱导细胞凋亡生物效应的细胞模型 ,并利用阳性药物对其进行鉴定。方法　RT PCR扩增鼠源性BAX全长基因 ,插入pUC18载体进行测序鉴定。将鉴定正确的mBAX插入载体pC4FV1E中 ,构建pC4FV1E/BAX表达质粒。将表达质粒与pcDNA3.1共转染HEK2 93细胞 ,建立pC4FV1E/BAX neo和neo基因稳定表达的细胞模型。利用形态学方法、流式细胞术等对化学药物诱导FKBP12 /BAX双聚体介导的细胞凋亡进行定性及定量的分析。结果　RT PCR、Westernblot法分别从mRNA及蛋白水平检测到FKBP12 mBAX融合基因的整合及表达 ;阳性化合物AP2 0 187作用 4～ 6h后 ,Giemsa染色可见明显的凋亡小体 ;钙依赖核酸内切酶亦被激活 ,出现典型的“DNAladder” ;天然产物FK5 0 6可竞争性地抑制这种阳性药物诱导的细胞凋亡。结论　FKBP12 /BAX双聚体可诱导细胞凋亡生物效应的细胞模型的建立 ,为FK5 0 6类小分子化合药物的高通量筛选提供可应用的技术平台。
肖鹤张纪岩于鸣沈倍奋李松黎燕
关键词：细胞凋亡细胞模型共转染免疫抑制剂
根据CD4立体构型设计的新型免疫抑制物J2抑制小鼠胰岛移植急性排斥反应的初步观察
2007年
目的评价基于CD4立体构型设计的新型免疫抑制物J2对小鼠胰岛移植后急性排斥反应的影响。方法将900～1000个DBA/2（H-2^d）小鼠的胰岛移植在糖尿病模型C57BL/6（H-2^b）小鼠肾被膜下。移植前用台盼蓝和双硫腙染色检测胰岛细胞活性和纯度。将C57BL/6小鼠随机分为5组,每组10只,在胰岛移植后第1～10天腹腔内注射J2,每天一次。对照组注射生理盐水、CsA组注射环孢素A（10 mg/kg）;实验组J2A组（1mg/kg）、J2B组（4 mg/kg）、J2C组（8 mg/kg）。术后监测不同时间各组小鼠的血糖变化及移植胰岛的存活时间,并观察移植胰岛在术后第三天及发生急性排斥反应时的组织病理学及免疫组化表现。结果获得的胰岛细胞的活性＞95%,纯度＞85%。胰岛移植术前各组糖尿病小鼠的血糖平均高于20.0mmol/L,术后前四天各组小鼠的血糖下降明显,均低于11.1 mmol/L,且各组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。移植第7天以后,对照组、J2A组小鼠的血糖较术后前四天明显升高（P＜0.05）。术后第八天开始,对照组、J2A组小鼠血糖升高平均高于11.1 mmol/L;CsA组、J2B组、J2C组的血糖仍低于11.1 mmol/L,三组之间无明显差异,但明显低于对照组和J2A组（P＜0.05）。病理学检查示移植后第三天各组移植的胰岛细胞轻度水肿,形态大致正常;移植后第八天对照组、J2A组的移植胰岛出现急性排斥反应病理改变,其他组病理未见排斥表现,小鼠胰岛素抗体免疫组化结果显示胰岛素阳性。CsA组（21.6±2.1 d）、J2B组（19.0±2.7d）、J2C组（18.7±2.3d）的移植胰岛存活时间比较差异无统计学意义,但分别较对照组（8.1±0.56d）、J2A组（8.3±0.48d）显著延长（P＜0.01）。结论一定剂量的J2具有和CsA相似的免疫抑制作用,可明显抑制小鼠胰岛移植后排斥反应的发生,显著延长移植物的存活时间。
高杰朱继业刘沐芸李涛张栋沈丹华冷希圣
关键词：胰岛移植小鼠CD4
芳酰肼类小分子有机化合物J2的免疫抑制作用被引量：1
2006年
目的:研究芳酰肼类小分子有机化合物J2的免疫抑制作用。方法:利用3H-TdR掺入法检测混合淋巴细胞培养,通过玫瑰花结计数评价细胞黏附实验,利用流式细胞术检测IL-2和IFN-γ,通过凝胶阻滞电泳分析(electrophoresis mob ility sh ift assay,EMSA)研究活化T细胞核因子(nuc lear factor of activated T cells,NF-AT)的表达。结果:J2对混合淋巴细胞培养中反应细胞的增殖具有抑制作用,其IC50为(67.75±4.47)μmol/L;J2可以抑制表达CD4的HEK293/CD4细胞和表达MHCⅡ类分子的Daud i细胞之间的细胞黏附;对反应细胞的IL-2和IFN-γ的产生具有抑制作用;并抑制NF-AT的表达。结论:小分子有机化合物J2具有一定的免疫抑制作用。
张静蕊于鸣黎燕李松沈倍奋
关键词：化合物免疫抑制细胞黏附分子淋巴细胞
CD4小分子拮抗剂的筛选及功能测定
2007年
目的筛选靶向CD4 D1功能表位的小分子化合物，并对其介导的免疫抑制功能进行初步评价。方法分别利用MqT以及^3H-TdR掺人法，检测小分子化合物对混合淋巴细胞反应（MLR）的抑制作用，筛选出具有一定剂量依赖抑制效应的小分子化合物；并进一步通过C57BL／6→BALB／c小鼠同种异体皮肤移植模型，对筛选出的小分子化合物的抗移植排斥作用进行初步评价。结果在筛选的19个小分子化合物中，J2呈现出良好的剂量依赖性地抑制T淋巴细胞增殖的作用。进一步抗小鼠皮肤移植排斥反应实验发现，J2能够有效延长皮肤植片的存活时间。结论小分子化合物J2具有良好的免疫抑制作用。
张磊肖鹤张晗于鸣李松沈倍奋黎燕
关键词：小分子化合物混合淋巴细胞反应免疫抑制
应用羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂探讨新型免疫抑制剂J2作用机制
2007年
目的探讨基于CD4立体构型设计的新型免疫抑制剂(J2)在小鼠体内的免疫抑制作用以及其作用机制。方法将羧基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的C57BL/6(H-2b)小鼠的淋巴细胞4×10~6～6×10~6经尾静脉注入经^(60)钴照射(900拉德)后的DBA/2(H-2d)小鼠体内构建模型。将DBA/2小鼠随机分为5组,每组5只,模型建立后即刻腹腔注射J2,每天1次。对照组注射生理盐水、CsA组注射环孢素A(10mg/kg体重);实验组J2A组(1mg/kg体重)、J2B组(4 mg/kg体重)、J2C组(8mg/kg体重)。给药3d后分组处死DBA/2小鼠取脾制备淋巴细胞,用CD3、CD4、CD8单抗分别标记受检T细胞,FACS流式细胞仪检测CD4^+T细胞和CD8^+T细胞在小鼠体内分裂增殖的情况,并检测CD4^+T细胞的凋亡情况。结果CFSE标记C57BL/6小鼠的脾淋巴细胞着染率大于99%。对照组分裂的CD4^+ T细胞(75.4±1.58)%、分裂的CD8^+ T细胞(83.48±1.25)%明显多于CsA组和实验组(P<0.01)。J2B组和J2C组分裂的细胞数分别与CsA组比较差异无统计学意义(P>0.05),但J2A组多于CsA组(P<0.05)。对照组CD4^+ T细胞早期凋亡的比例(41.1±3.4)%明显高于其他各组(P<0.01)。J2A组(35.6±4.1)%、J2B组(24.0±3.7)%和J2C组(13.6±2.3)%CD4^+ T细胞早期凋亡的比例显著高于CsA组(7.4±1.9)%(P<0.05)。结论J2可能抑制T细胞亚群CD4^+ T细胞的活化,从而进一步抑制CD8^+ T细胞的分裂增殖而具有免疫抑制作用。
高杰朱继业张栋沈倍奋冯健男冷希圣
关键词：免疫抑制环孢素ACD4
CD4拮抗类肽分子和非肽类小分子化合物筛选的细胞模型的建立被引量：1
2004年
目的　建立基于CD4分子和MHCⅡ类分子相互作用的细胞黏附模型。方法　RT PCR扩增人源性CD4胞浆缺陷型基因 ,克隆入绿色荧光表达载体pEGFP N1中。将pEGFP N1/CD4转染HEK2 93细胞 ,G4 18筛选稳定克隆。利用Westernblot方法及激光共聚焦显微技术检测和观察细胞中CD4分子的表达及定位。结果　RT PCR、Westernblot法分别从mRNA及蛋白水平检测到细胞中CD4分子的整合及表达 ;激光共聚焦显微镜观察到CD4分子于细胞核外周尤其是胞膜分布。HEK2 93/CD4稳定细胞克隆与Raji细胞孵育 1h后 ,可见玫瑰花环的形成 (rosetteformation) ,而CD4抗体能够明显抑制这种玫瑰花环的形成。结论　HEK2 93/CD4 Raji细胞黏附模型的建立 ,为CD4拮抗类肽分子和非肽类小分子化合物的筛选提供了一个可应用的技术平台。
肖鹤李松沈倍奋黎燕
关键词：CD4分子RAJI细胞拮抗肽类EGFP
FTY720介导的淋巴细胞归巢作用对外周淋巴细胞的影响被引量：2
2007年
FTY720是由ISP-I衍生而来的一类新型免疫抑制剂。近年来的研究显示，FTY720在器官移植排斥以及自身免疫性疾病的一系列模型中显示出良好的治疗效果。研究表明，FTY720主要通过减少外周淋巴细胞数目发挥免疫抑制作用，但其具体作用机制仍存在争议。一部分观点认为FTY720是通过诱导外周淋巴细胞发生凋亡而引起白细胞数急剧下降；另一部分观点则认为FTY720是通过阻断淋巴细胞外流，即将淋巴细胞阻断在次级淋巴组织中，从而阻止活化的淋巴细胞迁移至移植器官或炎症组织部位，达到免疫抑制作用。本研究通过流式细胞技术以及荧光染料标记细胞跟踪技术证实：FTY720主要是通过促进外周循环中的淋巴细胞归巢而发挥其免疫抑制作用。
肖鹤崔健张磊董波孙瑛勋于鸣李松沈倍奋黎燕
关键词：FTY720外周淋巴细胞淋巴细胞归巢新型免疫抑制剂介导器官移植排斥
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0