国家自然科学基金(30080007)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院西北大学更多>>
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- 相关领域：生物学理学化学工程更多>>
- 疏水作用色谱法同时纯化及复性基因重组人干扰素-α被引量：12
- 2001年
- 使用高效疏水作用色谱直接从大肠杆菌表达的基因重组人干扰素 α(rhIFN α)包涵体的裂解液中纯化了rhIFN α ,并在纯化的同时获得了高的复性效率 ,使复性和纯化一步完成 ,大大地简化了操作步骤。用凝胶排阻色谱对该法纯化的rhIFN α进行了纯度测定 ,纯度达到 95 %以上。该法的活性回收率分别比稀释法和透析法高 1 0倍和 1
- 郭立安
- 关键词：高效液相色谱纯化重组蛋白质
- 溶菌霉等10种标准蛋白质在高效离子交换色谱上的复性研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究变性蛋白质在高效离子交换色谱(h igh perform ance ion exchange chrom atography,HPIEC)上的保留行为及复性效率。方法分别用盐酸胍(GuHC l)、尿素(Urea)和十二烷基磺酸钠(SDS)将溶菌酶(Lys)等10种标准蛋白质变性,然后在流动相为氯化钠的条件下,用HPIEC对变性蛋白质进行复性,并测定其保留时间、Z值、质量及活性回收率。结果10种变性蛋白质中的4种在HPIEC上得到复性,其保留时间、峰形、Z值与天然蛋白基本一致,其中溶菌酶和核糖核酸酶的质量和活性回收率高,复性效果好。结论用HPIEC对变性的标准蛋白质进行复性,得到较好的复性效果,为HPIEC用于蛋白质复性的实际应用奠定了基础。
- 童卫黄亚渝王一苇郭立安
- 关键词：蛋白变性复性高效离子交换色谱
- RNase等10种标准蛋白质在高效疏水作用色谱上的复性被引量：1
- 2005年
- 目的: 研究变性蛋白质在高效疏水作用色谱(HPH IC)上的保留行为及复性效率. 方法: 分别用盐酸胍(Gu HCl)、尿素(Urea)和十二烷基磺酸钠(SDS)将核糖核酸酶(RNase)等10种标准蛋白质变性,然后在流动相为硫酸铵的条件下,用HPHIC对变性蛋白质进行复性,并测定其保留时间、Z值、质量及活性回收率. 结果: 在10种变性蛋白质中有5种在HPHIC上得到复性,其保留时间、峰形、Z值与天然蛋白基本一致,其中溶菌酶和核糖核酸酶的质量和活性回收率高,复性效果好. 结论: 用HPHIC对变性的标准蛋白质进行复性,得到较好的复性效果.
- 黄亚渝童卫郭立安
- 关键词：蛋白质变性蛋白质复性
- 还原变性核糖核酸酶的高效液相色谱复性被引量：4
- 2005年
- 目的:研究还原变性的核糖核酸酶(RNase)在高效疏水作用色谱(HPHIC)及高效离子交换色谱(HPIEC)上的复性及影响因素.方法:在二硫苏糖醇(DTT)存在的条件下用盐酸胍(GuHCl)和尿素(Urea)将RNase变性还原,先在溶液中加入氧化型谷胱苷肽(GSSG)进行氧化,然后在流动相中有低浓度变性剂存在的条件下,用HPHIC,HPIEC及稀释法对其进行复性并测定其生物活性及回收率.结果:HPHIC和HPIEC对RNase的复性效率均高于稀释法,两者的色谱固定相对RNase的复性均有所贡献.在色谱流动相中加入低浓度的变性剂可以提高复性效率,改变GSSG的浓度对复性效率也有影响.结论:用HPHIC,HPIEC对RNase进行复性,不仅复性效率高,而且快速、简便,具有很好的应用前景.
- 黄亚渝童卫郭立安耿信笃
- 关键词：核糖核酸酶蛋白折叠离子交换色谱
