国家教育部博士点基金(200803890009) 作品数:8 被引量:21 H指数:3 相关作者: 陈伟 梁文裕 郑少泉 游向荣 谢东丽 更多>> 相关机构: 福建农林大学 福建省农业科学院 广西农业科学院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
焦核龙眼种子败育的cDNA-AFLP分析 被引量:1 2011年 采用cDNA-AFLP技术对龙眼(Dimocarpus longan Lour.)正常和败育的种子进行了差异表达分析,并对差异明显的片段进行回收、克隆、测序,以及利用NCBI中的BLAST数据库已知序列进行同源性比对。结果表明:在11条重复性较好的差异片段中有3个Transcript-derived fragments(TDFs)分别与Ca2+-ATP酶、纤维素酶、质体ATP/ADP转运蛋白具有较高的相似性,其中TDF2和TDF7下调表达,TDF5上调表达,这可能影响了龙眼种子发育过程中的许多重要代谢途径,从而引起龙眼种子败育;有4个TDFs与一些hypothetical蛋白的序列相似;另有4个TDFs在蛋白数据库中未找到匹配的序列,核酸数据库中比对的结果也显示较高的E-值,说明为非同源基因。 唐晰 谢东丽 刘潇 蒋际谋 梁文裕 陈伟关键词:龙眼 种子败育 CDNA-AFLP 龙眼花芽ANS基因的克隆与原核表达 被引量:2 2010年 运用蛋白质组学比较龙眼(Dimocarpus longan Lour.)正常成花和成花逆转花芽的蛋白质组变化,结果表明,ANS蛋白(anthocyanidin synthase)在龙眼成花逆转花芽中下调表达。应用RACE方法克隆ANS蛋白的全长cDNA,长度为1477 bp,包括1个1071 bp的开放阅读框,编码357 bp的氨基酸序列,GenBank的登录号为FJ479616(GI:218202927)。将ANS在大肠杆菌中表达,获得1个约46 kD的外源蛋白。这说明ANS蛋白在龙眼成花逆转过程中起作用。 游向荣 许鸿川 梁文裕 陈清西 郑少泉 陈伟关键词:龙眼 成花逆转 差异蛋白 ANS 克隆 龙眼花芽与叶芽差异蛋白分析 被引量:2 2009年 以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)花芽和叶芽为材料,对龙眼花芽与叶芽分化发育过程中的差异蛋白质进行分析和鉴定,并探讨其生物学功能。本研究共鉴定出10个差异蛋白质:ATP synthase beta subunit,fructokinase,LHCII type I chlorophyll a/b binding protein,peroxidase,ascorbate peroxidase,14-3-3 protein,14-3-3 family protein,putative cytosolic cysteine synthase 7,retrotransposon protein,putative,Ty1-copia subclass,Protein Group similar to lateembryogenesis abundant proteins。这些差异蛋白质可能与龙眼花芽与叶芽的物质和能量代谢、自由基清除和抗氧化作用、信号转导和基础代谢、氨基酸代谢等生理过程密切相关。 庞国彩 谢东丽 陈清西 陈伟 龙强关键词:龙眼 花芽 叶芽 蛋白质组 双向电泳 质谱 龙眼转醛醇酶基因的克隆与原核表达 被引量:2 2009年 转醛醇酶作为磷酸戊糖途径非氧化阶段的关键酶,在调节植物PPP对环境胁迫的应答中起重要作用。该研究应用RACE方法克隆了龙眼(Dimocarpus longan Lour.)花芽中转醛醇酶的基因,获得一段长度为1655bp的cDNA,其中包括一个1320bp的开放阅读框,已登陆GenBank,登陆号为FJ472991(GI:217795375)。将转醛醇酶全长cDNA在大肠杆菌中表达,获得一个约55kD带有组氨酸标签的外源蛋白。RT-PCR结果显示,TALmRNA在龙眼成花逆转花芽中有较明显的表达量上调,说明TAL在一定程度上影响了龙眼正常成花。 游向荣 许鸿川 梁文裕 郑少泉 陈伟关键词:龙眼 转醛醇酶 基因 克隆 原核表达 龙眼成花逆转花芽α-tubulin基因的克隆与原核表达 被引量:4 2011年 运用蛋白质组学方法比较龙眼(Dimocarpus longanLour.)正常成花和成花逆转花芽的差异蛋白质组,并应用RACE方法克隆其中上调表达的α-微管蛋白基因α-tubulin,获得一段长度为1641 bp的cDNA,其中包括1个1350 bp的开放阅读框[GenBank登录号:FJ479617(GI:218202929)]。将α-tubulin全长cDNA在大肠杆菌中表达,获得1个约49.6 kD的外源蛋白,经Western blotting验证为α-微管蛋白。RT-PCR和Western blotting分别检测了α-tubulin在转录和翻译水平上的表达,结果表明,α-微管蛋白在成花逆转的龙眼花芽中上调表达,可能是逆转花芽形态差异表现的原因之一。 游向荣 黄榕辉 王喜军 黄春梅 梁文裕 陈伟关键词:龙眼 花芽 克隆 原核表达 龙眼14-3-3基因的克隆与原核表达 被引量:1 2009年 以龙眼(Dimocarpus longanLour.)为试材,应用同源克隆和RACE方法从花芽中获得了调控蛋白14-3-3的全长cDNA序列,GenBank登录号为FJ479618(GI:218202931)。该cDNA全长1121bp,包括一个783bp的开放阅读框,编码261个氨基酸,序列比较分析显示14-3-3cDNA具有较高的保守性。半定量RT-PCR分析结果表明,14-3-3mRNA在龙眼叶芽、叶片、花芽和成熟的花中都有表达,但在花芽中表达量最大。构建了pET14-3-3原核表达系统,将14-3-3全长cDNA在大肠杆菌中表达,获得一个分子量约为34kD的可溶性融合蛋白,经Western blotting验证,该蛋白为14-3-3蛋白。 游向荣 王平 梁文裕 郑少泉 陈伟关键词:龙眼 花芽 克隆 原核表达