湖南省教育厅科研基金(01C182)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：张长习谢文彪高绪照陈强谱林绪涛更多>>
- 相关机构：南华大学滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人枯否细胞在同种肝移植免疫中作用机制初步探讨被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨肝脏枯否细胞（KC）在肝移植后早期免疫反应中的可能作用.方法 将KC和（或）异体PBMC共培养,收集细胞上清液,培养结束时分别收获培养的KC和PBMC.检测HLA-G在细胞表面的表达;测定上清液中NO、IFN-γ、IL-10和TGF-β1的浓度;MTT试验观察KC对淋巴细胞增殖的影响.结果 实验组及对照组中KC和PBMC表面均未检测到HLA-G的表达.与不含KC实验组相比,含KC实验组中,NO、IL-10和TGF-β1的产量显著升高,而IFN-γ呈相对偏低趋势;对照组中未能检测到IL-10和IFN-γ的分泌,仅含KC的对照组中含少量NO及TGF-β1,且显著低于实验组.MTT实验发现,不含KC实验组OD值显著高于含KC实验组及对照组.结论 体外KC接触异体PBMC后早期,各细胞膜表面均无HLA-G表达,但参与了NO及Th2/Th3样细胞因子的分泌调节,并能抑制淋巴细胞增殖反应,可能促进肝脏移植早期免疫耐受的形成.
- 张长习谢文彪林绪涛张帆管清海陈强谱
- 关键词：肝移植枯否细胞一氧化氮细胞因子免疫耐受
- 大鼠及人肝枯否细胞的分离纯化和培养被引量：2
- 2007年
- 目的改进大鼠肝枯否细胞分离、纯化和培养技术,探讨从人体肝脏手术标本中分离、纯化和培养枯否细胞的可行有效方法。方法32只SD大鼠肝脏及9例人体肝脏手术标本用于本实验。大鼠肝脏经门静脉、人体肝组织通过肝静脉灌注预灌流液,灌注后肝脏标本采用离体胶原酶灌注消化获得细胞悬液,差速离心获得富含KC的肝非实质细胞。改传统PBS重悬肝非实质细胞为25%percoll重悬,形成新percoll梯度由上向下为:PBS、含肝非实质细胞的25%percoll、50%percoll,不连续密度梯度离心分离获得枯否细胞,最后选择性贴壁进一步纯化。应用吞噬功能实验对KC进行鉴定,台盼蓝拒染实验判定细胞活力。结果最终获得的枯否细胞的产量分别为:大鼠3.1±0.5×106/g肝脏,人体肝脏组织为2.3±0.4×106/g肝脏,细胞活力和纯度均达90%。结论本实验建立的大鼠及人体肝脏枯否细胞分离方法,简便经济,效果稳定,获得的枯否细胞可用于进一步的实验研究。
- 张长习高绪照谢文彪
- 关键词：枯否细胞细胞培养
