中国博士后科学基金(2013M541204)
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
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- 饥饿及取食不同植物后莲草直胸跳甲消化酶差异表达基因筛选
- 2022年
- 为探究莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila体内与寄主专一性相关的消化酶基因,利用前期构建的转录组数据库筛选差异表达的消化酶基因,采用实时荧光定量PCR检测饥饿及取食喜旱莲子草Alternanthera philoxeroides、莲子草Al.sessilis、甜菜Beta vulgaris、莙荙B.v.var.cicla后莲草直胸跳甲成虫体内差异表达消化酶基因的表达量。结果显示,转录组分析共搜索到221个与消化相关的基因,主要编码脂肪酶和蛋白酶;进一步筛选到编码蛋白酶、脂肪酶和糖酶3大类的26个差异表达的消化酶基因。与取食寄主植物喜旱莲子草相比,取食不同非寄主植物和饥饿处理后莲草直胸跳甲成虫体内消化酶基因表达量发生显著变化。除β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-Gal)基因外,取食不同植物及饥饿处理后莲草直胸跳甲成虫体内4个胰蛋白酶(trypsin,Try)、5个氨肽酶(aminopeptidase,Am)、8个脂肪酶(lipase,Lip)、5个β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,β-Glu)和1个α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,α-Glu)基因的表达量均显著增加,而2个α-淀粉酶(α-amylase,α-Amy)基因表达量只在取食不同植物后显著增加,在饥饿处理后显著降低。表明莲草直胸跳甲成虫对非寄主植物莲子草、甜菜和莙荙有一定程度的适应,同时对饥饿胁迫也有一定的抵抗能力,而相关的消化酶基因可能参与这些过程。
- 李恩郭灵柴艳萍贾栋贾栋马瑞燕
- 关键词：莲草直胸跳甲寄主专一性消化酶差异表达基因
- 喜旱莲子草次生代谢物对莲草直胸跳甲谷胱甘肽S-转移酶和淀粉酶活性的影响被引量：3
- 2018年
- 为明确喜旱莲子草的次生代谢物对其专食性天敌-莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila成虫解毒酶和消化酶的影响,利用不同浓度的橙花叔醇、齐墩果酸和甜菜碱浸叶处理喜旱莲子草Alternanthera philoxeroides,连续饲喂莲草直胸跳甲1~3 d后,测定莲草直胸跳甲谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和淀粉酶(AMS)的活性变化。结果表明,橙花叔醇、齐墩果酸和甜菜碱均能抑制莲草直胸跳甲的GSTs活性,0.1%橙花叔醇和20%甜菜碱处理24 h时的GSTs活性最低,分别为45.67 U/mg和53.95 U/mg,0.2%齐墩果处理72 h时的GSTs活性最低,为98.77 U/mg,且莲草直胸跳甲对橙花叔醇的刺激存在着一种适应机制;0.5%橙花叔醇和0.1%齐墩果酸处理24 h后的GSTs活性最高,分别为243.10 U/mg和250.22 U/mg,是对照的1.55倍和1.59倍,存在诱导激活现象。甜菜碱对莲草直胸跳甲的AMS活性有明显的抑制作用,20%甜菜碱处理72 h后AMS活性最低,为1.01 U/mg,是对照的55.92%。表明喜旱莲子草3种次生代谢物均能抑制谷胱甘肽S-转移酶活性,其中橙花叔醇和齐墩果酸对谷胱甘肽S-转移酶有诱导激活作用,而甜菜碱对淀粉酶抑制作用较强。
- 杨永昌柴艳萍马瑞燕李鑫郭艳琼高玲玲
- 关键词：喜旱莲子草莲草直胸跳甲谷胱甘肽S-转移酶淀粉酶
- 莲草直胸跳甲羧酸酯酶基因AhCesB1的克隆、序列分析及表达特征被引量：3
- 2017年
- 莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila是入侵杂草喜旱莲子草的专食性天敌。为进一步明确莲草直胸跳甲寄主专一性的分子机制,通过分析其转录组数据克隆羧酸酯酶(carboxylesterases,Car Es)基因,采用RT-PCR技术从其体内获得1个羧酸酯酶B簇基因并进行生物信息学分析,同时利用实时定量PCR方法检测其在不同身体部位及不同发育阶段的表达特性,并对饥饿处理、取食靶标植物喜旱莲子草和非靶标植物莙荙后该基因的表达水平进行比较。结果显示,克隆得到1条莲草直胸跳甲羧酸酯酶基因的cDNA全长序列,长度为1 851 bp,开放阅读框长度为1 647 bp,编码548个氨基酸,以该基因推导的氨基酸序列与其它物种的CarEs进行聚类分析,发现此基因为羧酸酯酶B簇家族成员,命名为AhCesB1(GenBank登录号KT032151)。实时定量PCR检测结果显示,AhCesB1基因在莲草直胸跳甲3龄期表达量最高,成虫期和蛹期表达量次之,卵、1龄和2龄期表达量相对较低。AhCesB1基因在头和中肠的表达量较低,在其余身体部分表达量较高。取食莙荙后AhCesB1表达量显著增高,为饥饿处理的13.7倍,而取食喜旱莲子草与饥饿处理并无显著差异。表明莲草直胸跳甲AhCesB1在不同发育阶段和成虫不同身体部位具有不同的表达水平,而非寄主植物莙荙可以诱导该基因的表达,推测羧酸酯酶在莲草直胸跳甲代谢次生物质中发挥着重要作用。
- 郭艳琼柴艳萍张建宇郝炯马瑞燕高玲玲
- 关键词：莲草直胸跳甲羧酸酯酶基因克隆
- 饥饿程度及取食不同植物对莲草直胸跳甲消化酶的影响被引量：12
- 2016年
- 为明确莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila成虫消化酶的作用,分别采用3,5-二硝基水杨酸法、福林-酚法、碘-淀粉比色法测定其取食喜旱莲子草、莙荙及饥饿48 h后纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶的变化,以及饥饿不同时间对3种消化酶的影响。结果表明,取食不同植物后,莲草直胸跳甲成虫的纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶活力差异显著,其中取食莙荙后其体内纤维素酶(葡聚糖外切酶、葡聚糖内切酶、β-葡萄糖苷酶)和淀粉酶活力最高,分别为3.07、6.63、6.79、23.48 U/mg,是对照的1.21、3.18、2.43和1.34倍;取食喜旱莲子草后其蛋白酶活力最高,为25.09μg·mg^(-1)·min^(-1)。饥饿不同时间对莲草直胸跳甲成虫体内纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶活力有显著影响,随着饥饿时间的延长,纤维素酶、淀粉酶活力均逐渐降低,而蛋白酶活力呈先升高后降低的趋势,饥饿36 h对成虫蛋白酶活力的促进作用最强,为20.64μg·mg^(-1)·min^(-1),是对照的1.11倍;饥饿60 h后其蛋白酶活力最低,仅为10.17μg·mg^(-1)·min^(-1)。表明饥饿初期对莲草直胸跳甲成虫消化酶起促进作用;取食莙荙后可增强其体内淀粉酶、纤维素酶的分解作用,取食喜旱莲子草可增强其体内蛋白酶活力。
- 柴艳萍张建宇王苑馨贾栋马瑞燕郭艳琼
- 关键词：莲草直胸跳甲淀粉酶喜旱莲子草
- 取食非靶标植物对莲草直胸跳甲消化酶活力的影响被引量：2
- 2021年
- 莲草直胸跳甲是入侵杂草喜旱莲子草的专食性天敌,为探究莲草直胸跳甲无法在非靶标植物正常完成生活史的原因,将消化酶作为研究的出发点,探究了莲草直胸跳甲取食喜旱莲子草、莲子草、莙荙、甜菜后体内消化酶活性的变化,同时对比了4种植物的营养物质、次生代谢物质及含水量。结果表明,饥饿时蛋白酶和淀粉酶活力均有提升,取食莲子草以及莙荙对莲草直胸跳甲成虫的蛋白酶活力影响较大;取食甜菜可以提高淀粉酶活力;取食甜菜和莙荙时,纤维素酶活力提升;不同植物中可溶性糖含量最高的是甜菜;含水量、可溶性蛋白以及单宁含量最高的是莙荙,与喜旱莲子草均存在显著差异。相对于寄主植物喜旱莲子草,莲草直胸跳甲在取食非寄主植物时,消化酶活力变化明显,表明莲草直胸跳甲对非靶标植物不太适应。
- 王彪龙柴艳萍韩慧刘浦高玲玲郭艳琼
- 关键词：莲草直胸跳甲喜旱莲子草消化酶活力
- 虫口密度对莲草直胸跳甲生殖力和存活能力的影响被引量：3
- 2014年
- 莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila是全球恶性杂草喜旱莲子草Alternanthera philoxeroides的专食性天敌。以莲草直胸跳甲成虫为研究对象,探究其在不同密度下的死亡率及生殖情况。在限定体积的饲养瓶中(250cm3),放置不同密度的成虫,结果表明成虫初期死亡率以雌雄比为4∶4时最低,单雌平均产卵量随密度的增高而下降,而卵的孵化率在雌雄比2∶2、4∶4、8∶8时高于在1∶1和16∶16时的孵化率。在限定的空间和食物资源条件下,虫口密度对莲草直胸跳甲死亡率与生殖力有一定影响,经试验证明每头成虫所需最适空间约为31.25cm3。
- 冀佳悦赵龙龙贾少华刘杨林王森赵捷郭艳琼马瑞燕
- 关键词：莲草直胸跳甲虫口密度死亡率生殖力
- 亚致死剂量毒死蜱对飞蝗细胞色素P450酶活性及基因表达的影响被引量：6
- 2014年
- 【目的】研究有机磷杀虫剂毒死蜱对飞蝗体内细胞色素P450的影响。【方法】采用酶活力测定法和实时定量PCR技术分别研究了毒死蜱3种亚致死剂量(LD_(10)、LD_(30)和LD_(50))处理飞蝗3龄幼虫24 h后,体内细胞色素P450酶活性及CYP409A1和CYP408B1基因表达量的变化。【结果】不同亚致死剂量毒死蜱处理引起细胞色素P450活性显著性降低,分别为对照组的0.68、0.50和0.62倍。同时通过mRNA水平表达的差异比较显示,飞蝗的两个P450基因CYP409A1和CYP408B1的表达受到抑制,均出现表达量减少的现象。【结论】某些细胞色素P450基因表达受不同亚致死剂量毒死蜱的抑制而使酶的量被降低,从而造成飞蝗整体细胞色素P450酶活性的下降。
- 郭艳琼张建珍郭亚平马恩波
- 关键词：亚致死剂量毒死蜱飞蝗细胞色素P450
