中央高校基本科研业务费专项资金(09YKPY76)
- 作品数：7 被引量：37H指数：5
- 相关作者：吴长有李丽乔丹劳穗华李琴更多>>
- 相关机构：中山大学广州市胸科医院暨南大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CD4^＋T细胞亚群在结核性胸膜炎中作用的研究进展被引量：5
- 2010年
- 结核病仍然是死亡率最高的传染性疾病之一,结核性胸膜炎是肺外结核的常见疾病,在发展中国家,结核感染是导致胸腔积液的最常见原因.同时,由于当前病原诊断方法灵敏度及特异性尚低,对结核性胸膜炎能否及时诊断仍是困扰临床医生的棘手问题.
- 李丽吴长有
- 关键词：结核性胸膜炎CD4^+T细胞亚群传染性疾病常见疾病肺外结核胸腔积液
- 结核胸液中ESAT-6多肽特异性多功能CD4^+ T细胞数量及功能分析被引量：16
- 2011年
- 目的:检测ESAT-6多肽刺激后,结核性胸膜炎患者胸液细胞中CD4+ T细胞细胞因子产生及多功能CD4+ T细胞频率,了解ESAT-6特异性CD4+ T细胞在结核局部细胞免疫应答中的作用。方法:分离结核性胸膜炎患者胸液细胞(PFCs),ESAT-6混合多肽刺激后检测CD4+ T细胞细胞因子分泌、细胞亚群、多功能性CD4+T细胞频率及细胞因子平均荧光强度。结果:BCG、ESAT-6混合多肽和ESAT-6重组蛋白刺激PFCs后,主要是CD4+T细胞分泌Th1细胞因子(IFN-γ、IL-2和TNF-α),而CD8+ T细胞几乎不产生细胞因子。进一步分析ESAT-6混合多肽刺激PFCs后Th1细胞的亚群组成,依据细胞因子分泌的类型及数量,该特异性Th1细胞可以分为7个不同亚群,且各亚群所占比例不同,其中多功能性T细胞亚群(同时分泌IFN-γ、IL-2和TNF-α)比例较高。细胞因子荧光强度分析表明,依据细胞因子分泌类型的增加,单个细胞水平上不同Th1亚群中各细胞因子表达的量也逐渐增加,即3+>2+>1+细胞。结论:ESAT-6混合多肽刺激结核性胸膜炎患者胸液细胞后,主要诱导CD4+ T细胞分泌细胞因子,且Th1亚群中包含多功能性CD4+ T细胞,该细胞在单细胞水平上分泌细胞因子的类型和数量也显著高于其他亚群,可能在结核局部感染中发挥关键保护性作用。
- 李丽乔丹李琴张贤兰劳穗华吴长有
- 关键词：CD4+T细胞
- 经卡介苗刺激后结核性胸腔积液中记忆性γδT细胞的细胞因子水平及其受体表达被引量：5
- 2010年
- 目的 观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法 分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分泌、细胞亚群、细胞表型及细胞受体表达特征,并提取mRNA,利用3种Vγ和8种Vδ引物,经逆转录PCR扩增cDNA,将PCR产物进行基因扫描分析γδ T细胞各亚家族克隆性.结果 卡介苗刺激胸腔积液细胞后,CD4＋和γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率分别为0.38%和5.35%,且γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率远高于CD4＋ T细胞,分泌γ-干扰素的γδ T细胞主要表达白细胞共同抗原（CD45RO）,其阳性率为73.5%.此外,δ2细胞也分泌γ-干扰素（11.1%）和肿瘤坏死因子-α（25.5%）.与未刺激者相比,卡介苗选择性扩增δ2细胞,由多克隆或双克隆转变为寡克隆.结论 卡介苗刺激结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞能诱导记忆性γδT细胞分泌细胞因子,卡介苗体外扩增γδT细胞后,基因扫描显示Vδ2出现寡克隆性.
- 李丽乔丹劳穗华陈少华李扬秋吴长有
- 关键词：细胞因子类卡介苗
- 广州市0～14岁儿童卡介苗特异性Th1细胞免疫水平分析被引量：2
- 2011年
- 目的分析广州市0～14岁儿童卡介苗特异性Th1细胞免疫水平。方法随机抽取288例广州市妇女儿童医疗中心儿童院区健康体检的0～14岁儿童静脉抗凝血,经BCG刺激后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Th1细胞因子(IFN-γ,TNF-α和IL-2)的水平,并用流式细胞术(FACS)检测IFN-γ和TNF-α的细胞来源。结果 BCG刺激可显著诱导儿童外周血细胞产生IFN-γ(median=726.37 pg/ml),TNF-α(median=934.98 pg/ml)和IL-2(median=48.25 pg/ml)。与不刺激组相比,差别具有统计学意义(n=288,P<0.001)。此外,IFN-γ的产生水平与年龄呈一定的正相关(r2=0.4069,P<0.05)。流式分析结果表明,BCG刺激可诱导CD4+T细胞和非CD4CD8细胞分泌IFN-γ或TNF-α,而不诱导CD8+T细胞产生细胞因子。经BCG刺激后,分别有35.71%和39.29%的儿童CD4+T细胞能够产生IFN-γ和TNF-α。结论广州市0～14岁儿童外周血细胞经BCG刺激后,主要是由CD4+T细胞和非CD4CD8细胞产生Th1细胞因子,但是CD4+T细胞能够产生Th1细胞因子的儿童比例较低,这可能是卡介苗接种免疫效果并不理想的原因之一。
- 乔丹陈慎吴长有王慧李丽
- 关键词：卡介苗酶联免疫吸附试验流式细胞术
- 卡介苗刺激后CD8^+T细胞活化、增殖及其调节被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨卡介苗(BCG)刺激后,结核菌素试验阳性(PPD+)正常人外周血单个核细胞(PBMCs)中CD8+T细胞的活化、增殖、细胞因子产生及调节性T细胞(Treg)对其调节作用。方法:体外用BCG刺激PPD+正常人PBMCs,检测CD8+T细胞的细胞因子产生、活化和增殖。纯化后获得调节性T细胞(Treg)和CD25-细胞,检测Treg对CD8+T细胞增殖的调节作用。结果:BCG诱导CD8+T细胞表达CD69和CD25等活化分子。在低剂量IL-2存在的条件下,BCG诱导CD8+T细胞发生增殖,且增殖的CD8+T细胞大部分表达Granzyme-B。体外BCG短期刺激PBMCs后,CD8+T细胞几乎不产生IFN-γ、IL-2和TNF-α。此外,调节性T细胞抑制CD8+T细胞增殖。结论:BCG诱导CD8+T细胞活化、增殖和表达颗粒酶,Treg抑制CD8+T细胞增殖。
- 李丽乔丹李琴吴长有
- 关键词：BCGTH1细胞因子增殖
- 多色流式细胞术检测人外周血BCG特异性效应型记忆γδT细胞的表型特征被引量：8
- 2011年
- 目的检测卡介苗(BCG)刺激后,PPD+正常人外周血中分泌IFN-γ的TCRγδ亚群及其表型特征。方法分离PPD+正常人外周血单个核细胞(PBMCs),用多色流式细胞术检测TCRγδ亚群;BCG刺激PBMCs后检测γδT细胞IFN-γ分泌水平,并分析BCG特异性γδT细胞表型特征。结果依据PBMCs中TCRγδ和δ2的表达,可将γδT细胞分为3个亚群,即δ2high、δ2low和TCRγδ中非δ2T细胞(non-δ2-γδT)细胞。其中,δ2high和δ2lowT细胞几乎全部(>98%)为CD45RO+,而non-δ2-γδT细胞中只有少部分表达CD45RO,其余大部分不表达CD45RO。δ2high和δ2lowT细胞表型类似,主要为CD45RO+CD62L-CD27-,而non-δ2CD45RO+细胞主要为CD62L-CD27+,non-δ2CD45RO-细胞几乎全部为CD62L-CD27-。BCG刺激PBMCs后,可诱导γδT细胞分泌IFN-γ,且主要为δ2high和δ2low细胞,而non-δ2-γδT几乎不产生IFN-γ。进一步分析BCG特异性γδT细胞的表型特征,结果表明,δ2high-CD45RO+IFN-γ+和δ2lowCD45RO+IFN-γ+细胞主要为CD62L-CD27-和CD62L-CD27+,为效应型记忆细胞。结论 BCG刺激PPD+正常人外周血PBMCs后,主要诱导δ2T细胞分泌IFN-γ,且该细胞表现出CD45RO+CD62L-效应型记忆细胞特征,可能在预防结核早期感染中发挥重要作用。
- 李丽付笑迎吴长有
- 关键词：ΓΔT细胞免疫记忆
- 八色流式细胞术检测人外周血BCG特异性效应型记忆CD4^+ T细胞的表型特征被引量：3
- 2011年
- 目的:检测BCG刺激后,PPD+正常人外周血中细胞因子产生及其亚群。方法:分离PPD+正常人外周血单个核细胞(PBMC),BCG刺激后检测CD4+和CD8+ T细胞细胞因子分泌,并用八色流式细胞术分析BCG特异性T细胞亚群。结果:BCG刺激PBMC后,主要是CD4+T细胞分泌Th1细胞因子(IFN-γ、IL-2和TNF-α),而CD8+T细胞几乎不产生细胞因子。进一步分析分泌细胞因子的细胞亚群,主要是CD4+CD45RO+CD62L-CD27-和CD4+CD45RO+CD62L-CD27+分泌细胞因子。结论:BCG刺激PPD+正常人外周血PBMC后,主要诱导CD4+ T细胞分泌细胞因子,且该细胞表现出CD4+CD45RO+CD62L-效应型记忆细胞特征,可能在预防结核感染中发挥重要作用。
- 李丽付笑迎吴长有
- 关键词：CD4+T细胞免疫记忆
