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大麦β-1,3-葡聚糖酶基因启动子P_(GⅢ)的激发子诱导元件分析被引量：2: 2007年; 利用PLACE数据库,对大麦β-1,3-葡聚糖酶同功酶基因PGⅢ启动子的可能顺式作用元件进行分析,并设计特异性引物。通过5′-缺失法获得了不同大小的启动子片段,分别与报告基因gus(β-葡聚糖酸醛苷酶基因)耦联,构建植物表达载体,通过农杆菌介导法转化水稻胚性愈伤组织。GUS组织化学染色结果表明,稻瘟菌来源的激发子可以诱导PGⅢ启动子不同缺失体驱动的gus表达。荧光法结果表明,缺失体P1(-1 107 bp)具有最高的激发子诱导活性,而缺失体P4(-359 bp)驱动的gus表达量迅速降低,缺失体P5的诱导活性最低。这表明转录起始位点上游-1 107 bp序列是保持启动子最高活性所必需的,而-572--359 bp的序列是保持激发子诱导活性所必需的。GCC框和GTAC序列可能是激发子诱导表达的顺式作用元件。; 李云锋曹燕纪春艳王振中; 关键词：启动子激发子 GUS活性

稻瘟菌诱导的水稻叶片的蛋白质差异表达分析: ＜正＞稻瘟病是最主要的水稻病害之一,由于稻瘟菌（Magnaporthe grisea）遗传背景复杂,生理小种易于变异,其防治一直是研究的重点和难点。近年来受到广泛关注的蛋白质组学研究,为从蛋白质水平揭示病原菌与植物相互作...; 胡川聂燕芳李云锋王振中; 文献传递

外源茉莉酸甲酯诱导的水稻叶片蛋白质差异表达分析: 茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)广泛存在于植物中,被认为是高等植物体内的内源生长调节物质,具有广泛的生理作用。其中,MeJA作为内源信号分子,可以参与植物对病原菌及其他逆境胁迫做出应答并进行信号传...; 张智慧聂燕芳何磊高元媛李云锋王振中; 文献传递

水稻叶片质膜的纯化及质膜蛋白质双向电泳分析被引量：2: 2012年; 采用双水相分配法和离心法对水稻叶片的细胞质膜进行了纯化.选用聚合物Dextran T 500/PEG 3350质量分数分别为6.1%、6.2%、6.3%、6.4%、6.5%的双水相体系,对3次分配后的细胞质膜纯化效果进行了研究,并进行了细胞质膜标志酶H+-ATPase的活性测定、柠檬酸铅-醋酸铀双染色及电镜检测.结果表明:聚合物质量分数为6.3%的双水相体系可以获得高纯度的质膜微囊,且随分配次数的增加,可以有效减少其他内膜的污染,其质膜标志酶VO34--ATPase的相对活性高达93.5%.粗质膜经过3次两相分配后的蛋白质产率为2.73%.非离子型去垢剂Brij 58对质膜H+-ATPase的活性变化影响结果表明,纯化的质膜微囊封闭性较好,主要为正向型质膜微囊.质膜蛋白质经增溶缓冲液溶解及1-D SDS-PAGE的结果表明,纯化后的质膜有效减少了特定蛋白质条带的丰度,使蛋白质条带的分布更为均匀.双向电泳结果表明,纯化后的质膜双向电脉图谱具有低背景、高分辨率和重复性的优点,为进一步的水稻质膜蛋白质组研究提供了可靠的试验材料.; 何磊聂燕芳高元媛曹燕李云锋王振中; 关键词：水稻质膜双向电泳

适合于双向电泳的水稻叶片总蛋白提取方法的研究: 蛋白质组学作为后基因组时代的主要研究方向之一,为深入研究稻瘟菌与水稻的相互作用提供了良好的技术平台。作为蛋白质组学研究的核心技术之一,双向电泳技术能高效地分离展示样品中的蛋白质组。其中,样品制备是影响双向电泳效果的关键性...; 胡川张智慧王振中李云锋; 关键词：水稻双向电泳; 文献传递

转基因水稻中β-1,3-葡聚糖酶基因启动子缺失体P3的激发子诱导活性被引量：1: 2009年; 选择合适的启动子是植物抗病基因工程的关键性因素,病原菌诱导型启动子的获得将为植物提供更多的启动子选择。将大麦β-1,3-葡聚糖酶同工酶GⅢ基因启动子的缺失体片段P3与报告基因gus(β-葡聚糖酸醛苷酶基因)偶联,构建植物表达载体,通过农杆菌介导法转化水稻。PCR结果表明,所获得的10株潮霉素抗性水稻植株均呈PCR阳性;DNA印迹法结果显示,9株含P3/gus的融合基因已整合到水稻基因组DNA中。GUS组织化学染色及荧光法结果显示,P3缺失体驱动的gus在激发子诱导后,获得了高水平表达。T1代种子的GUS组织化学染色结果也表明,激发子可以诱导高水平的P3活性。; 李云锋胡川曹燕张智慧王振中; 关键词：水稻激发子诱导活性

适合于双向电泳分析的水稻叶片质膜的纯化与纯度鉴定: 在植物与病原菌互作中,植物能否识别病原菌(或病原菌的侵袭信号),并做出有效的防御反应,是植物获得抗性的前期基础。细胞质膜(plasma membrane,PM)作为植物细胞与外界进行物质、能量和信息交流的门户,在植物和病...; 何磊高元媛李云锋王振中; 文献传递

籼稻品系C101LAC和CO39成熟胚培养再生体系的建立: 籼稻品系 C101LAC 和 C039是开展稻瘟菌与水稻相互作用研究的常用水稻品系。关于水稻组织培养和遗传转化研究的报道很多,但针对籼稻品系 C101LAC 和 C039成熟胚再生体系的研究尚无报道。本研究以籼稻品系 C...; 胡川张智慧黄婉铃黄穗萍王振中李云锋; 关键词：水稻成熟胚激素配比; 文献传递

外源水杨酸诱导的水稻叶片的蛋白质差异表达分析: ＜正＞水杨酸（salisyic acid,SA）作为一种外源信号分子,可以诱导植物对病原菌的广谱抗性。目前研究表明,SA诱导的植物抗病性主要通过诱导植物的膜脂过氧化,产生HR反应;并通过诱导植物PR蛋白基因的表达,进一步...; 张智慧聂燕芳何磊高元媛李云锋王振中; 文献传递

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国家自然科学基金(30600399)