国家自然科学基金(30472273)
- 作品数：6 被引量：95H指数：4
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- 相关机构：广州中医药大学第一附属医院广州中医药大学更多>>
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- 黄芪甲苷体外诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究被引量：49
- 2007年
- 【目的】观察黄芪甲苷体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为心肌样细胞的作用。【方法】采用密度梯度离心和贴壁培养法分离大鼠MSCs,反复传代及纯化后,取第3代MSCs,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34和CD44;取第8代MSCs进行分组诱导:黄芪甲苷组(终浓度为250 mg/L)、5-氮胞苷(5-aza,终浓度为10μmol/L)、黄芪甲苷加5-aza组(终浓度分别为250 mg/L与10μmol/L),并设空白对照组,诱导后继续培养4周;计算心肌样细胞诱导率,采用免疫组化法鉴定诱导后MSCs中结蛋白(Desmin)和心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法鉴定诱导后MSCs中心肌特异性蛋白α-心肌肌球蛋白重链(-αMHC)和β-心肌肌球蛋白重链(-βMHC)信使核糖核酸(mRNA)的表达。【结果】原代培养的MSCs首先形成集落,传代细胞体积变大,诱导后细胞呈梭形,并出现肌管;MSCs表面抗原CD44表达阳性,而骨髓造血干细胞表面抗原CD34表达阴性,表明本实验方法所得细胞为均一的MSCs细胞群;各组在不同时间的心肌样细胞诱导率无明显差异;免疫组化结果显示诱导后MSCs表达心肌特异性蛋白Desmin和cTnI;RT-PCR结果显示诱导后MSCs表达成熟的心肌特异性蛋白-αMHC和-βMHC。【结论】黄芪甲苷可在体外诱导大鼠MSCs定向分化为心肌样细胞,但诱导率仍有待提高。
- 冼绍祥杨忠奇汪朝晖李南夷赵立诚
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 三七总皂苷对骨髓间充质干细胞增殖和向心肌样细胞分化的影响被引量：33
- 2007年
- 【目的】观察三七总皂苷(PNS)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和体外诱导其分化为心肌样细胞的作用。【方法】采用骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标志;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察PNS对MSCs增殖的影响;采用第8代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化;采用相差显微镜、免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果鉴定心肌细胞。【结果】大鼠MSCs细胞表面抗原CD44阳性,CD34阴性;经PNS作用后MSCs增长速度比空白对照组明显加快,体外诱导后细胞形态发生变化,其细胞免疫组化鉴定呈结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白(cTnI)阳性;RT-PCR结果显示诱导后细胞转录肌球蛋白重链mRNA水平增加。【结论】PNS能促进大鼠MSCs体外增殖并可诱导MSCs分化为心肌样细胞,这为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。
- 李志泉冼绍祥汪朝晖杨忠奇
- 三七总皂苷对骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的作用被引量：32
- 2006年
- 目的探讨三七总皂苷(PNS)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分化为心肌样细胞。方法采用骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,用流式细胞仪检测细胞表面标志,用第8代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化,采用相差显微镜、免疫组化及RT-PCR鉴定心肌细胞。结果大鼠MSCs细胞表面抗原CD44阳性,CD34阴性;经PNS体外诱导后细胞形态发生变化,其细胞免疫组化呈结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白(cTnI)阳性;RT-PCR显示诱导后细胞转录肌球蛋白重链mRNA水平增加。结论大鼠MSCs体外在PNS诱导下可分化为心肌样细胞,为应用MSCs治疗心肌损伤提供了动物实验方法。
- 杨忠奇冼绍祥汪朝晖李南夷赵立诚
- 关键词：三七总皂苷骨髓间充质干细胞分化心肌样细胞
- 骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展及中药干预的前景展望被引量：3
- 2006年
- 综述了骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的生物学特征,体外培养诱导MSCs分化成为心肌细胞,体内心肌微环境诱导MSCs生成心肌细胞及中药在MSCs诱导分化上的突破等研究概况。认为中药在MSCs诱导分化上的突破是国内外学者为修复坏死的心肌组织而进行对MSCs诱导分化为心肌细胞的有益尝试。以抗肿瘤药物5-氮胞苷作为诱导剂对MSCs进行诱导,诱导分化率不高,且有一定的局限性;根据中医药在防治心脑血管疾病方面取得较好的疗效,及不少研究表明中药或其有效成分能有效地诱导MSCs分化为神经元细胞,并且其诱导率比传统西医学方法高,展望中药有可能诱导MSCs分化为心肌细胞。采用中药有效成分作为诱导剂对MSCs进行诱导分化,这不仅为应用中医药治疗心肌梗塞提供新的理论依据,而且有可能与细胞移植的方法相结合治疗某些心血管疾病,可作为现代治疗方法的补充手段,为临床研究带来广阔的应用前景。
- 冼绍祥汪朝晖杨忠奇李南夷赵立诚
- 关键词：骨髓祖代细胞心肌细胞
- 肾阳虚型心力衰竭肾脏髓质水通道蛋白的表达的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的:观察肾阳虚心力衰竭病证结合动物模型肾脏髓质水通道蛋白(AQP-2)的表达。方法:雄性SD大鼠130只,随机分为2大组,分别进行假手术和冠状动脉结扎术,假手术后组存活的大鼠随机分为证型模型组(A组)和对照组(B组);冠状动脉结扎术后存活大鼠随机分为疾病模型组(C组)和疾病证型模型组(D组)。分别应用结扎左冠状动脉,造成心肌梗死心衰模型,羟基脲灌胃建立肾阳虚证模型。观察大鼠的呼吸、体重、体重增加指数、力竭性游泳实验、体温、心功能,应用RT-PCR技术观察大鼠肾虚心力衰竭模型的AQP-2表达。结果:各组动物在造模以及药物干预试验结束后,C组和D组在呼吸、心率、体重增加量、±dp/dtmax方面均明显上升,力竭游泳时间下降,AQP-2水平明显上升;D组更为明显。结论:进行肾阳虚型心力衰竭病证结合动物模型肾脏髓质水通道蛋白的表达研究,可为进一步研究中医药方法在防治慢性心衰中作用机理提供良好的实验基础。
- 冼绍祥欧明
- 关键词：肾阳虚型心力衰竭水通道蛋白
- 同种异体骨髓间充质干细胞移植对心梗大鼠心脏结构与功能的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死大鼠心脏结构及功能的影响。方法取SD大鼠30只,随机分成3组,即正常组、模型组和干细胞组,每组10只。正常组不予处理,模型组结扎大鼠左冠状动脉制成急性心肌梗死模型,干细胞组在结扎冠状动脉后向心肌内注射干细胞,4周后检测大鼠心功能及心脏组织病理变化。结果模型组大鼠心脏左室舒张末容积、左室收缩末容积、舒张末期容积较正常组及干细胞移植组均明显增高,差异具有显著性(P<0.05);模型组大鼠心脏左室射血分数、左室短轴缩短率、心输出量较正常组及干细胞移植组明显降低,差异具有显著性(P<0.05)。病理结果显示,模型组见肌纤维溶解甚至消失,可见纤维组织增生瘢痕形成。干细胞组可见心肌纤维排列较正常心肌纤维排列混乱,也有少量纤维组织增生和瘢痕形成。结论同种异体骨髓间充质干细胞移植能够改善急性心肌梗死模型大鼠心脏的结构与功能。
- 冼绍祥喻锦扬陈洁杨忠奇汪朝晖
- 关键词：心脏结构细胞移植
