国家自然科学基金(81173619)
- 作品数：8 被引量：76H指数：6
- 相关作者：张荣华杨丽朱晓峰王攀攀汪甜更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院南京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省教育厅育苗工程项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 淫羊藿水提液通过Wnt/β-Catenin信号通路发挥抗骨质疏松的作用研究
- 目的:观察淫羊藿水提液(HEF)对去卵巢SD雌性大鼠的治疗作用,研究Wnt信号通路在HEF治疗骨质疏松(OP)中的作用机制。方法:大鼠随机分为Sham组(n=14)和OVX组(n=70),OVX组采用双侧去卵巢法复制OP...
- 王朝鹏杨丽朱晓峰王攀攀方霁熊颖全刘恒瑞张荣华
- 关键词：骨质疏松症WNT/Β-CATENIN信号通路
- 文献传递
- 梓醇促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖过程中Wnt信号通路的变化被引量：8
- 2014年
- 目的:观察梓醇促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖过程中Wnt信号通路的变化。方法:(1)采用机械分离及差速贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,将细胞分为空白对照组与梓醇(1.0 mg/L)处理组,流式细胞术检测各组细胞细胞周期分布情况,计算其增殖指数。(2)实时荧光定量PCR法检测各组细胞中Wnt3a、Wnt5a、Wnt11及β-catenin mRNA的表达水平;Western blotting技术检测各组细胞β-catenin蛋白的表达变化。结果:(1)空白对照组与梓醇处理组BMSCs增殖指数分别为8.90%±0.46%和17.93%±1.68%(P<0.01)。(2)与空白对照组相比,梓醇处理组Wnt5a、Wnt11、β-catenin mRNA及β-catenin蛋白表达均明显提高,但Wnt3a mRNA表达无显著变化。结论:梓醇在促进BMSCs增殖过程中可同时激活经典与非经典Wnt信号通路。
- 傅淑平杨丽洪浩偶晨张荣华
- 关键词：梓醇骨髓间充质干细胞细胞增殖WNT信号通路
- 柚皮苷在促大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化过程中对MAPK信号通路的影响被引量：23
- 2012年
- 目的:研究中药单体柚皮苷(NG)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化过程中MAPK信号通路的影响。方法:观察在正常、加入p38、ERK和JNK通路抑制剂SB203580、PD98059、SP600125及3种抑制剂全部加入的情况下,各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、I型胶原(Col I)等骨向分化指标的差异。用Western blotting技术检测各组p38、ERK1/2和JNK蛋白的磷酸化水平,用荧光定量PCR技术检测细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形成蛋白2(BMP-2)和核心结合因子α1(Cbfα1)mRNA的表达。结果:(1)10-7mol/L为本实验中NG的最佳促骨向分化浓度。(2)NG最佳浓度组的ALP和BGP含量比其它各组都高(P<0.05),Col I含量无明显差异(P>0.05);与NG组相比,加入不同抑制剂组的ALP、BGP和ColⅠ表达量出现不同程度的降低。(3)与空白组相比,NG组JNK蛋白的磷酸化水平升高(P<0.05),p38蛋白的磷酸化水平降低(P<0.01),ERK1/2蛋白的磷酸化水平无明显差异(P>0.05)。与NG组相比,加入不同抑制剂组的p38、ERK1/2和JNK蛋白的磷酸化水平有升高也有降低。(4)NG组上调BMP-2的表达(P<0.05),下调Cbfα1的表达(P<0.05),而对TGF-β1的表达无明显影响(P>0.05)。与NG组相比,加入不同抑制剂组的TGF-β1、BMP-2和Cbfα1 mRNA表达量出现不同程度的降低。结论:NG主要通过激活MAPK信号通路中ERK通路、JNK通路以及上调BMP-2的表达,促进MSCs的骨向分化。NG上调BMP-2的表达受MAPK通路中p38通路的影响较大。
- 汪甜杨丽张荣华
- 关键词：柚皮苷骨髓间充质干细胞骨向分化MAPK信号通路
- 骨碎补水提液对大鼠MSCs骨向分化的影响及机制研究被引量：15
- 2013年
- 目的:通过观察骨碎补水提液对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化能力及转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达的影响,阐释其可能的诱导机制。方法:运用全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠MSCs;运用MTT法检测不同浓度的骨碎补水提液对SD大鼠MSCs增殖活力的影响;以ALP活性及ALP染色阳性率确定骨碎补水提液最佳促MSCs骨向分化浓度,并以该浓度对MSCs骨向分化进行干预,按是否添加经典成骨诱导液将实验分为:空白对照组、经典成骨诱导液组、骨碎补水提液组、骨碎补水提液+经典成骨诱导液组,通过检测碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨钙素(BGP)和钙化结节的表达,评价各组骨向分化能力;通过检测转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)的表达,探讨药物促MSCs骨向分化的作用机制。结果:骨碎补水提液最佳促MSCs增殖浓度为5μg/mL;最佳促MSCs骨向分化浓度为50μg/mL;经典成骨诱导液、骨碎补水提液及联合用药均能促进MSCs骨向分化及TGF-β1和BMP-2的表达。结论:补肾中药骨碎补能有效的促进MSCs增殖和骨向分化。在MSCs骨向分化过程中,上调TGF-β1、BMP-2的表达量可能是诱导各组促进MSCs骨向分化的作用机制之一。
- 杨丽朱晓峰王攀攀张荣华
- 关键词：骨向分化转化生长因子Β1骨形态发生蛋白2
- 骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松大鼠骨内谷氨酸信号Glu、mGluR5以及EAAT_1的影响被引量：10
- 2014年
- 目的探讨骨碎补总黄酮(Total Flavonoids of Rhizoma Drynariae,TFRD)对去卵巢骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠骨内谷氨酸信号的影响,以明确其通过参与大鼠骨内谷氨酸信号通路介导骨重建的可能机制。方法 45只3月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=15)和去卵巢组(OVX,n=30)。采取双侧卵巢切除术复制OP大鼠模型,14周后行双能X线测定骨密度,模型复制成功,将OVX组随机分为模白组(OVX,n=15)和给药组(OVX+TFRD,n=15)。药物干预12周后处死动物,免疫组化法观察左股骨骨骺端谷氨酸(Glutamate,Glu)、代谢型Glu受体-5(metabotropic glutamate receptor5,mGluR5)及L-谷氨酸/L-门冬氨酸转运体(Glutamate/Aspartate transporter,EAAT1)表达。结果 Glu和mGluR5主要分布于骨髓区细胞和紧贴骨髓腔壁的成骨细胞(osteoblasts,OB);Glu的阳性标记在Sham、OVX和OVX+TFRD组的表达差异均无统计学意义;OVX+TFRD组代谢型受体mGluR5的阳性表达显著高于Sham组(P=0.009),而Sham组与OVX组之间的差异无统计学意义;转运子EAAT1除了大量分布于骨髓区细胞以外,还有少量表达于骨陷窝中的骨细胞,其阳性表达在Sham、OVX和OVX+TFRD组的差异均无统计学意义。结论在骨内Glu信号通路中,TFRD可显著提高代谢型受体mGluR5的表达,但尚不能认为其对Glu和转运子EAAT1有影响。
- 方霁杨丽沈家珍梁恒张荣华
- 关键词：骨碎补总黄酮
- rhTGF-β_1对SD大鼠MSCs骨向分化的影响及机制研究被引量：8
- 2014年
- 目的:通过观察重组人转化生长因子β1(rhTGF-β1)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向分化能力的影响,以及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad4及核心结合因子α1(Cbfa1)的作用,阐释其对MSCs骨向分化影响以及可能的作用机制。方法:用全骨髓贴壁法分离、纯化SD大鼠MSCs;用MTT法检测0、5、10、20、40、80和100μg/L rhTGF-β1对MSCs增殖活性的影响;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定rhTGF-β1的最佳促MSCs骨向分化浓度,并以该浓度对MSCs骨向分化进行干预。按是否添加经典成骨诱导液将实验分为:正常组、经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组。通过检测ALP、I型胶原、骨钙素表达和钙化结节的数目,评价各组骨向分化能力;通过检测BMP-2、Smad4和Cbfa1 mRNA的表达,评价各组促MSCs骨向分化的可能作用机制。结果:rhTGF-β1最佳促MSCs增殖浓度为10μg/L,最佳促MSCs骨向分化浓度为5μg/L。经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组均能促进MSCs骨向分化,刺激BMP-2分泌,并上调Smad4和Cbfa1 mRNA的表达,且rhTGF-β1对MSCs成骨分化的早期、中期效果好,而rhTGF-β1+经典组对MSCs成骨分化的晚期效果更为明显。结论:经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组均有促MSCs骨向分化的作用,其机制可能是促进BMP-2的分泌,通过TGF-β超家族/Smads信号通路调控骨向分化。
- 尹素娟张荣华朱晓峰王攀攀杨丽
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨分化转化生长因子
- rhBMP-2对SD大鼠MSCs骨向分化的影响及机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的:通过观察重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、骨向分化能力的影响,以及对内源性因子TGF-β1、Smad4和下游细胞因子Cbfα1的作用,阐释其对MSCs骨向分化影响可能的作用机制.方法:运用全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠MSCs;运用MTT法检测质量浓度分别为0、5、10、20、40、80、100ng/mL rhBMP-2对SD大鼠MSCs增殖活性的影响;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定rhBMP-2的最佳促MSCs骨向分化浓度,并以该浓度对MSCs骨向分化进行干预.按是否添加经典成骨诱导液将实验分为:空白组,经典组,rhBMP-2组,rhBMP-2+经典组.通过检测ALP、I型胶原(Col I)、骨钙素(BGP)和钙化结节的表达,以评价各组骨向分化能力;通过检测TGF-β1、Smad4、Cbfα1 mRNA的表达,以评价各组促MSCs骨向分化的作用机制.结果:rhBMP-2的最佳促MSCs增殖质量浓度为80 ng/mL,最佳促MSCs骨向分化质量浓度为40 ng/mL.经典组和rhBMP-2诱导各组均能促进MSCs骨向分化,刺激TGF-β1分泌,并上调Smad4、Cbfα1 mRNA的基因表达,而TGF-β1在早期分泌量最高,提示其可能在MSCs早期骨向分化过程起重要作用.结论:rhBMP-2诱导各组均有促MSCs骨向分化的作用,可能是通过促进TGF-β1的分泌,启动TGF-β超家族/Smads信号通路调控MSCs的骨向分化.
- 高寒张荣华朱晓峰王攀攀杨丽
- 关键词：成骨分化RHBMP-2SMAD4
- 淫羊藿苷对去势大鼠Runx2基因的影响
- 目的 研究淫羊藿苷对去势大鼠Run2基因表达的影响,淫羊藿苷的临床应用提供进一步临床依据.方法 将6月龄的30只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组(SHAM组,10只),去势造模组(OVX组,10只),淫羊藿苷组(I...
- 尹素娟高寒杨丽张荣华
- 关键词：骨质疏松RUNX2淫羊藿苷去势
- 从治未病悟糖尿病性骨质疏松症的防治被引量：5
- 2014年
- 目的运用"治未病"理论指导以求降低糖尿病患者骨质疏松症的发病率。方法通过对"治未病"的内涵、"糖尿病性骨质疏松症"的认识及"治未病"在"糖尿病性骨质疏松症"中的运用三方面进行探讨。结果中医"治未病"思想指导"糖尿病性骨质疏松症"防治,是具有超前性和科学性的。结论若能将中医"治未病"理念恰当运用于糖尿病患者的骨质疏松症防治,会起到不发病或延缓发病的作用。
- 黄帅立林志鑫刘政张荣华
- 关键词：治未病糖尿病骨质疏松症
- 淫羊藿水提取物对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的影响及其机制被引量：10
- 2013年
- 目的观察淫羊藿水提取物对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化能力及转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达的影响,阐释其防治骨质疏松症的作用机制。方法全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠MSCs;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定淫羊藿水提取物促MSCs骨向分化的最佳质量浓度,并以该质量浓度进行MSCs骨向分化实验。按是否添加经典成骨诱导液将大鼠分为对照组、成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物(500μg/mL)组、淫羊藿水提取物(500μg/mL)+成骨诱导剂组,每3～4 d各组更换含相应物质培养液1次,连续干预14 d。通过检测各组ALP、I型胶原(Col I)、骨钙素(BGP)和钙化结节等骨向分化指标的变化,以评价淫羊藿水提取物对MSCs骨向分化能力的影响;通过检测TGF-β1、BMP-2的表达,研究淫羊藿水提取物促MSCs骨向分化的作用机制。结果淫羊藿水提取物最佳促MSCs骨向分化的质量浓度为500μg/mL;成骨诱导剂组、淫羊藿水提取物组及淫羊藿水提取物+成骨诱导剂组均能促进MSCs骨向分化及上调TGF-β1和BMP-2的表达。结论淫羊藿促进MSCs骨向分化,上调TGF-β1、BMP-2的表达可能是其作用机制之一。
- 杨丽朱晓峰王攀攀黄丰张荣华
- 关键词：骨向分化转化生长因子Β1骨形态发生蛋白2
