国家自然科学基金(81241071)
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 相关作者：朱光发郭红娟吴春婷黄艳刘双更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核因子κB信号通路在肺癌中的作用被引量：1
- 2013年
- 核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）是调控多种基因表达的核转录因子,其活化失调不仅与各种炎症性疾病有关,而且在肺癌的发生、发展、转移及治疗中也发挥着重要的作用.近年来研究发现,NF-κB可能是抗癌药物治疗的靶点,为肺癌等恶性肿瘤的治疗提供了新思路.
- 郭红娟朱光发
- 关键词：核因子ΚBIΚB激酶肺癌
- NF-κBp65/IκBα在非小细胞肺癌组织中的表达被引量：3
- 2014年
- 目的从蛋白和RNA水平研究NF-κBp65、IκBα在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达特点,探讨其在肺癌发生中的作用。方法免疫组化、Western blot方法检测NSCLC和癌旁肺组织中NF-κBp65和IκBα蛋白的表达,实时定量-PCR方法检测NF-κBp65和IκBα基因表达。结果共检测NSCLC组织62例(腺癌33例,鳞癌29例),癌旁肺组织27例。免疫组化显示NSCLC组织中NF-κBp65阳性表达率分别为58.6%和60.9%,显著高于癌旁肺组织(P均<0.0001),而IκBα阳性表达率分别为12.3%和1.4%,显著低于癌旁肺组织(P均<0.0001)。Western blot进一步证实:NF-κBp65蛋白在NSCLC组织中表达升高,IκBα蛋白表达降低。实时定量-PCR结果显示,NSCLC组织中NF-κBp65基因表达分别是癌旁肺组织的2.73±0.33倍和2.58±0.27倍(P=0.0046),而IκBα基因表达分别是癌旁肺组织的0.63±0.086倍和0.87±0.075倍(P=0.0208)。结论 NF-κBp65高表达和IκBα低表达可能在NSCLC发生过程中发挥重要作用。
- 郭红娟朱光发吴春婷靳丽妍刘双
- 关键词：非小细胞肺癌NF-ΚBP65IΚBΑ
- 人核因子-κBp65 shRNA慢病毒载体构建及对肺癌细胞恶性生物学行为的影响被引量：3
- 2014年
- 背景与目的核因子-κB作为重要转录因子,与多种恶性肿瘤的发生发展有着密切联系,直接或间接抑制NF-κBp65的表达可逆转肿瘤细胞生物学行为。构建人核因子-κBp65基因shRNA重组质粒,感染A549细胞并筛选出稳定细胞株,对其迁移、粘附能力进行鉴定。方法设计并合成人核因子-κBp65的乱序对照序列(scramble)和干扰序列(shRNA)构建重组质粒,在5’端引入一个BamHI位点,3’端引入一个XhoI位点和EcoRI位点;感染A549细胞并由嘌呤霉素做稳转株的筛选;应用Western blot、qRT-PCR技术检测NF-κBp65的干扰效果及IκBα蛋白表达水平的变化;Transwell、MTT法分析其对A549细胞迁移、粘附能力的影响。结果成功构建重组质粒并筛选出A549/NF-κB p65scramble稳转株和A549/NF-κB p65 shRNA稳转株;A549/NF-κB p65 shRNA稳转细胞株与A549/NF-κB p65 scramble稳转细胞株及A549细胞相比NF-κBp65的mRNA、蛋白表达水平均下调;IκBα蛋白水平明显下调;细胞迁移能力及粘附能力均降低。结论本实验通过RNA干扰技术构建的重组慢病毒可有效抑制NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达水平;抑制NF-κBp65可明显降低A549细胞的迁移和粘附能力。
- 郭红娟朱光发吴春婷
- 关键词：核因子-ΚBP65IΚBΑ慢病毒载体
- 人核因子κBp65核定位信号缺失突变对A549细胞恶性表型的影响被引量：3
- 2015年
- 目的鉴定人核因子κB(NF-κB)p65核定位信号(NLS)缺失突变质粒即pc DNA3.1(+)-NF-κBp65ΔNLS(简称NF-κBp65ΔNLS)的表达功能,以及其对低表达NF-κBp65的A549细胞株即A549/NF-κBp65 shRNA细胞增殖、迁移和粘附能力的影响。方法培养人A549/NF-κBp65 shRNA细胞株,分为对照组、转染pc DNA3.1(+)组、转染NF-κBp65ΔNLS组。应用间接免疫荧光、实时荧光定量-PCR和Western blot技术检测NF-κBp65的细胞内定位及mRNA、蛋白表达水平的变化;应用MTT、Transwell和细胞粘附实验分析转染NF-κBp65ΔNLS质粒对A549/NF-κBp65 shRNA细胞增殖、迁移、粘附能力的影响。结果成功构建人NF-κBp65ΔNLS真核表达质粒。转染NF-κBp65ΔNLS质粒的A549/NF-κBp65 shRNA细胞与对照组及转染pc DNA3.1(+)组比较,NF-κBp65 mRNA表达水平明显上调(10.63±0.84比1.04±0.21和1.23±0.22,P<0.01),NF-κBp65蛋白表达水平明显升高(1.07±0.06比0.53±0.02和0.59±0.04,P<0.01),且NF-κBp65蛋白主要位于细胞浆内,在肿瘤坏死因子α刺激后NF-κBp65蛋白并未明显进入细胞核。与对照组及转染pc DNA3.1(+)组比较,转染NF-κBp65ΔNLS质粒的A549/NF-κBp65 shRNA细胞的增殖、迁移和粘附能力均有不同程度增强。结论通过基因突变技术构建无NLS的NF-κBp65真核表达质粒,可明显增强A549/NF-κBp65shRNA细胞株内NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达水平,并使NF-κBp65蛋白定位于细胞浆内;同时,细胞浆内过表达NF-κBp65ΔNLS蛋白可明显增强A549/NF-κBp65 shRNA细胞的增殖、迁移和粘附能力,提示滞留于细胞浆内的NF-κBp65仍可通过影响NF-κB信号通路相关蛋白参与调节肺癌细胞的生物学行为。
- 黄艳吴春婷郭红娟朱光发
- 关键词：P65核定位信号
- 肺癌并发心律失常临床特点及支气管镜检查安全性分析被引量：1
- 2023年
- 目的 分析肺癌并发心律失常的临床特征,探讨对此类患者行支气管镜检查的安全性。方法 选择2021年3月至2022年6月我院收治的经支气管镜检查确诊肺癌患者65例,将肺癌并发心律失常33例为观察组,肺癌无心律失常32例为对照组,比较两组患者的临床特征,分析并发心律失常对支气管镜检查安全性的影响。结果 观察组窦性心动过速18例,房性早搏13例,室性早搏10例,心房颤动6例,室上性心动过速1例,右束支传导阻滞4例。观察组患者中央型病变[19例(57.6%)vs. 10例(31.3%)]、临床分期Ⅲ和Ⅳ比例[31例(93.9%)vs. 23例(71.9%)]高于对照组(P<0.05)。患者行支气管镜诊疗过程中,心律失常为9例(13.8%),观察组发生6例(18.2%),对照组发生3例(9.4%),两组差异无统计学意义。中止支气管镜操作、撤出气管镜后,心律恢复至术前水平。两组患者低氧血症、气胸、出血的发生率比较,差异无统计学意义。结论 中央型肺癌和Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者易合并心律失常;经药物控制后,在镇静状态下行支气管镜诊疗具有良好安全性。
- 陶梅梅王新霞朱光发
- 关键词：支气管肺癌心律失常支气管镜
- 核因子κB信号通路为靶点进行非小细胞肺癌治疗的研究进展被引量：1
- 2014年
- 肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,占全球癌症死亡原因的首位.癌症的发生和发展取决于细胞生存和死亡信号之间的平衡.核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）作为主要的细胞生存信号,参与了肿瘤发生和发展等多个过程,并与癌细胞对放疗及化疗抵抗相关.以NF-κB信号通路为靶点进行非小细胞肺癌治疗是当今研究及讨论的热点,抑制NF-κB的活化可能为非小细胞肺癌的治疗提供一条新的途径.
- 黄艳朱光发
- 关键词：核因子ΚB信号通路非小细胞肺癌靶向治疗
