国家自然科学基金(30870056)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 酿酒酵母抗氧化相关基因突变体对黄曲霉毒素B_1的清除作用被引量：6
- 2012年
- 黄曲霉毒素(AF)是粮食作物和饲料原料中容易污染的一种强毒性和强致癌性物质,酿酒酵母具有毒素清除功能。利用HPLC分析了酿酒酵母野生菌BY4742及三株关键的抗氧化相关基因缺失菌zwf1Δ、sod2Δ、glr1Δ对黄曲霉毒素B1的清除能力。结果表明,在PBS缓冲液中存活和死亡的细胞对AFB1的清除率分别为74%～76%和71%～73%,说明酵母细胞对AFB1的清除以生物吸附作用为主。在培养基中,3种突变菌活细胞对AFB1的清除率发生不同程度的降低,其中glr1Δ的AFB1清除能力下降最明显,其次是sod2Δ,而zwf1Δ下降最少,说明这些关键的抗氧化基因的缺失会影响细胞在生长状态下对AFB1的清除作用。
- 史锋黄宇啸李永富
- 关键词：黄曲霉毒素酿酒酵母生物脱毒
- 酿酒酵母POS5基因过表达对L-异亮氨酸合成的促进作用
- 2014年
- L-异亮氨酸是人体必需氨基酸之一,具有很大的商业价值。在谷氨酸棒杆菌中,合成一分子L-异亮氨酸需要消耗四分子NADPH。因此,提高胞内NADPH浓度是提高L-异亮氨酸产量的重要手段之一。在乳糖发酵短杆菌JHI3-156中过量表达酿酒酵母的NADH激酶编码基因POS5△MTS,发酵48 h表达菌株JHI3-156/pDXW-10-POS5△MTS的胞内NADP^+浓度增加了27μmol/L(17%),NADPH浓度增加了36μmol/L(96%);发酵72 h后L-异亮氨酸产量是(3.02±0.52)g/L,比对照菌(1.96±0.04)g/L提高了54%。本研究表明,过表达POS5△MTS基因能提高NADPH的供应,促进了L-异亮氨酸的生物合成。
- 李坤还晓静史锋王小元
- 关键词：L-异亮氨酸
- 谷氨酸棒杆菌NAD激酶的过表达对L-异亮氨酸合成的促进作用被引量：6
- 2012年
- NAD激酶催化辅酶Ⅰ[NAD(H)]发生磷酸化,转变成辅酶Ⅱ[NADP(H)],而还原态辅酶Ⅱ(NADPH)是L-异亮氨酸合成的必要辅因子。为了提高NADPH的供应,首先克隆了谷氨酸棒杆菌NAD激酶基因ppnK,并利用大肠杆菌-棒状杆菌诱导型穿梭表达载体pDXW-8和组成型穿梭表达载体pDXW-9在L-异亮氨酸合成菌——乳糖发酵短杆菌JHI3-156中进行表达。摇瓶发酵后,ppnK诱导表达菌JHI3-156/pDXW-8-ppnK的NAD激酶酶活(4.33±0.74 U/g)比pDXW-8空载菌提高了83.5%,辅酶Ⅱ与辅酶Ⅰ的比例提高了63.8%,L-异亮氨酸产量(3.86±0.12 g/L)提高了82.9%;ppnK组成表达菌JHI3-156/pDXW-9-ppnK的NAD激酶酶活(7.67±0.65 U/g)比pDXW-9空载菌提高了2.20倍,辅酶Ⅱ与辅酶Ⅰ的比例提高了1.34倍,NADPH含量提高了21.7%,L-异亮氨酸产量(2.99±0.18 g/L)提高了41.7%。这说明NAD激酶有助于辅酶Ⅱ的供应和L-异亮氨酸的生物合成,这对于其他氨基酸的生产也有一定的参考依据。
- 还晓静李坤史锋王小元
- 关键词：L-异亮氨酸NAD激酶组成型表达乳糖发酵短杆菌
- 酿酒酵母线粒体NADH激酶功能相关表型研究被引量：1
- 2010年
- NADH激酶是辅酶NADP(H)从头合成的关键途径。酿酒酵母中由POS5基因编码的线粒体NADH激酶是线粒体NADPH供应的重要来源之一。由IDP1基因编码的一种关键的NADP+依赖性脱氢酶也能够供应线粒体NADPH。通过对POS5单缺失体、IDP1单缺失体、POS5IDP1双缺失体关键的表型研究,包括它们的生长性能、温度敏感性、对非发酵性碳源的利用能力、线粒体及细胞质内代表性氨基酸的合成性能,初步解析酿酒酵母线粒体中NADPH的主要供应方式及NADH激酶在线粒体中的功能。
- 李志君史锋廖祥儒
- 关键词：NADPH表型酿酒酵母
