山东省自然科学基金(Y2005C47)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：泰山医学院济宁医学院山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Apelin系统的生物学特性及其作用机制被引量：1
- 2008年
- 血管紧张素受体AT-1相关的受体蛋白(APJ)是G蛋白耦联受体(GPCRs)成员之一。APJ及其内源性配体Apelin(APJ endogenous ligand)在中枢和外周广泛分布,在心血管系统、内分泌系统及免疫系统等都有重要的的生物学效应。Apelin系统已经成为新药研制非常有意义的靶点。
- 张敬美白波
- 关键词：G蛋白耦联受体APELIN
- pRluc-hKOR-pcDNA3.1真核重组质粒的构建及在HEK293细胞中的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:构建与海肾荧光素酶(renilla luciferase,Rluc)融合的人κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)的真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人KOR与其它受体间的相互作用。方法:以质粒pcD-NA3.1-hKOR为模板,PCR方法扩增人KOR。扩增的人KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这2种酶双酶切质粒pRluc-pcDNA3.1。然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察。结果:扩增出了1条约1.2kb的片段,与预期的人KOR大小相符,质粒酶切结果显示重组质粒pRluc-hKOR-pcDNA3.1被切成2条片段,其中1条为pRluc-pcDNA3.1载体大小,另1条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上。结论:构建成功了pRluc-hKOR-pcDNA3.1重组真核表达载体,此表达载体可用于检测人KOR与其它受体之间的相互作用。
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青路海
- 关键词：HEK293细胞
- pRluc-KOR真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
- 2009年
- 目的:构建与海肾萤光素酶(Rluc)融合的κ型阿片受体(KOR)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法(BRET)检测apelin受体和KOR之间的相互作用.方法:以质粒pcDNA3.1-KOR为模板,PCR方法扩增KOR.扩增的KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pRluc.将这两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10.挑取菌落培养,提取质粒,行酶切鉴定及测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察.结果:扩增出了1条1143 bp的片段,与预期的KOR大小相符,质粒酶切结果显示pRluc-KOR被切成2条片段,其中一条为pRluc载体大小,另一条为目的片段大小.经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源.共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上.结论:构建成功了pRluc-KOR重组表达载体,此表达载体可用于检测KOR与apelin受体或与其他受体之间的相互作用.
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青于鹏丽
- 关键词：真核表达载体
- Apelin/APJ系统研究进展被引量：5
- 2009年
- Apelin肽家族是由单个基因编码并能够激活7次跨膜G蛋白偶联受体APJ的一组内源性活性肽.Apelin/APJ系统在心血管调节中具有降低血压、强的心脏收缩作用;在中枢神经系统中具有调节垂体激素释放、调节摄食、摄水、体液平衡等作用;作为脂肪细胞分泌的一个新的脂肪因子(adipo-kine),可调节胰岛素的分泌;而且,最新的研究表明,apelin能够促进血管的生成.Apelin/APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点.这篇综述的目的是总结apelin/APJ系统的特点及功能,为进一步研究该系统提供理论依据和线索,为开发新的治疗性的药物提供有吸引力的靶点.
- 李雅林白波陈京刘有旺
- 关键词：APELIN脂肪因子血管生成心血管系统中枢神经系统
- 大鼠尾核内Apelin的痛觉调制作用及其机制的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的探究Apelin在尾核内对大鼠的痛觉调制作用及其可能的作用机制。方法采用辐射热作为伤害性刺激，以安静状态下大鼠的甩尾潜伏期（TFL）为测痛指标，尾核内注射Apelin、吗啡、纳洛酮等，观察给药90min内Apelin的痛觉调制作用及其对吗啡中枢镇痛作用的影响。检测给药40min后大鼠尾核组织和血浆中cAMP与cGMP水平，探究Apelin在痛觉调制过程中可能的作用机制。结果Apelin有显著的痛敏作用，在10^-4mol／L时作用最显著，给药10min后大鼠痛阈下降[（-9．22±1．26）％]，40min后痛阈下降至最低[（-16．95±1．46）％]，分别与生理盐水组[（-0．32±1．2）％、（0．17±0．80）％]比较有统计学意义（P〈0．01）；大鼠尾核内微量注射吗啡后再注射Apelin，结果表明Apelin能抑制吗啡的中枢镇痛作用（P〈0．01）；大鼠尾核内注射Apelin后，尾核cAMP含量为（14．08±2．25）nmol／g，血浆cAMP含量为（19．94±4．43）nmol／L，分别与生理盐水组[（133．05±20．41）nmol／g、（38．66±6．73）nmol／L]比较，有非常显著的统计学意义（P〈0．01）。结论Apelin有中枢痛敏作用，这种痛敏作用可能与阿片系统有某种内在联系并通过细胞内第二信使cAMP发挥效应。
- 张敬美白波张秋玲李金国刘海青陈鹏路海
- 关键词：APELIN尾核痛觉过敏环磷酸腺苷
