广州市科技计划项目(2005Z3-E5151)
- 作品数：3 被引量：23H指数：3
- 相关作者：吴忠道鲜墨张莉滟吕志跃张双民更多>>
- 相关机构：中山大学华中科技大学广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺炎链球菌自溶酶蛋白抗原表位的预测、克隆及重组表达被引量：3
- 2007年
- 目的用生物信息学的方法预测肺炎链球菌自溶酶蛋白(LytA)可能的抗原表位,合成带有linker(Gly4 Ser1)3序列的融合基因片断(l1l2),并在原核系统表达。方法利用多种生物信息学软件,在二级结构预测抗原表位分值的基础上结合单参数分析结果,预测并设计LytA可能的重组抗原表位(L1L2)。扩增该表位基因l1l2,利用分子克隆技术构建重组质粒。经测序鉴定后,转入宿主菌JM109中原核表达L1L2多肽片断与载体标签蛋白还原性谷胱苷肽(GST)的融合蛋白GST-L1L2。结果预测表明序列2～28(EINVSKLRTDLPQVGVQPYRQVHAHST)、序列98～112(FMTDYRLYIELLRNL)分别为可能的B细胞和T细胞抗原表位。用PCR技术合成了l1l2片段,构建重组质粒pGEX-4T-1-l1l2,成功转化大肠杆菌JM109。结论经测序验证成功构建了重组质粒pGEX-L1L2,并转化大肠杆菌JM109,SDS-PAGE分析显示该重组质粒在原核系统中得到了表达,为后继多肽疫苗研究奠定了基础。
- 鲜墨张莉滟童荔甘慧泉吕志跃何思杰郑焕钦吴忠道
- 关键词：肺炎链球菌表位预测
- 广州地区患儿流感嗜血杆菌分离株荚膜基因分型的研究被引量：5
- 2007年
- 目的用PCR方法进行流感嗜血杆菌荚膜编码基因分型,调查儿童急性呼吸道感染患儿流感嗜血杆菌的感染情况。方法以流感嗜血杆菌荚膜编码基因(bexA)和荚膜分型编码基因(Hi-a、Hi-b)作为靶基因设计引物,用PCR方法扩增标准菌株为ATCC9006、ATCC49247、EQA0609的3个编码基因并测序,在此基础上对临床分离的43株流感嗜血杆菌进行荚膜基因分型研究。结果PCR结果显示标准菌株ATCC49247未扩增出bexA编码基因,ATCC9006扩增出bexA和Hi-a编码基因,EQA0609扩增出为bexA和Hi-b编码基因,并且PCR产物序列与GenBank公布的序列一致性高。临床分离菌株Hi未扩增出bexA、Hi-a及Hi-b编码基因。结论本实验研究表明广州地区儿童急性呼吸道感染患儿所分离的流感嗜血杆菌主要是不可分型的无荚膜菌株。
- 张莉滟张双民吕志跃吴忠道
- 关键词：流感嗜血杆菌PCR
- 肺炎链球菌感染的流行病学及毒力因子研究进展被引量：15
- 2006年
- 肺炎链球菌感染在不同人群中的分布受各种因素影响,其流行以及菌株血清型的分布也都有明显的差异性。造成肺炎链球菌致病的各种毒力因子在致病过程中尽管作用不同,但都参与了该过程。深入了解近年来肺炎链球菌感染的流行情况及肺炎链球菌相关毒力因子的研究进展,对预防和治疗肺炎链球菌感染,研制新一代疫苗有着实际意义。
- 鲜墨吴忠道
- 关键词：肺炎链球菌毒力因子
