国家自然科学基金(81370152)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞对血小板源性生长因子的反应性及其意义被引量：1
- 2014年
- 目的分离培养并鉴定大鼠不同分支级别肺动脉平滑肌细胞（PASMC），观察其对血小板源性生长因子（PDGF）反应性的差异，探讨相同刺激因素下，不同级别肺血管病理改变不同的细胞学机制。方法分离SD大鼠肺动脉并按解剖学分支分为3组：大动脉组，包括肺动脉干及肺内一级主干；中动脉组，指肺内主干二、三级分支；小动脉组，包括肺内动脉四级及以上分支。分离培养不同分支PASMC并用平滑肌细胞抗体进行免疫荧光染色鉴定。给予PDGF刺激，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性；Western blot方法测定增殖细胞核抗原表达水平变化以反映细胞增殖能力；伤口愈合实验检测细胞迁移能力的变化。结果不同分支PASMC在光学显微镜下观察无明显差别；免疫荧光染色结果显示，三种常用的平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、钙结合蛋白（S100A4）和平滑肌调宁蛋白（calponin）抗体染色均呈阳性，各组间荧光强度无明显差异。正常培养条件下3组细胞增殖率分别为（137．0±12．1）％、（166．1±23．6）％、（156．8±2．5）％，Western blot检测PCNA表达灰度值分别为（0．41±0．10）、（0．55±0．18）和（0．48±0．28），迁移到空白区域的细胞个数分别为（49±14）、（68±13）和（71±7），组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。给予10ug/L PDGF干预48h后，中、小动脉组PASMC的增殖率分别为（215．7±17．8）％、（195．2±6．6）％，均高于大动脉组[（167．0±14．4）％，均P〈0．01]，干预后3组细胞内PCNA蛋白表达灰度值分别为（0．93±0．11）、（1．21±0．14）和（0．62±0．03），迁移到空白区域的细胞个数分别为（194±46）、（171±16）和（68±21），中、小肺动脉组与大动脉组相比差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论尽管不同分支PASMC通常无明显差异，但
- 国桓杨汀王望刘杰孙然王军王辰
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子增殖迁移
- 格列本脲抑制NLRP3炎性小体活化对肺动脉平滑肌细胞增殖与迁移的影响被引量：5
- 2017年
- 目的探讨格列本脲是否通过抑制NLRP3炎性小体活化缓解肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖与迁移。方法传代培养人PASMCs并分为4组：对照组、格列本脲组、血小板源性生长因子（PDGF）组和PDGF＋格列本脲组，实验组分别给予格列本脲干预和PDGF诱导PASMCs增殖和迁移。采用Western blot法检测各组细胞中NLRP3炎性小体的活化状况，噻唑蓝法检测细胞增殖率，Transwell法检测细胞迁移能力。结果PDGF组与对照组相比NLRP3表达升高至（1.38±0.09，t＝3.998, P〈0.001）；半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）表达增加到（1.32±0.10，t＝3.268, P〈0.01）；IL-1β表达上调为（1.43±0.19，t＝2.096, P〈0.05）。与对照组相比，格列本脲不影响NLRP3、caspase-1和IL-1β表达；PDGF＋格列本脲组与PDGF组相比NLRP3的表达降低（20.5±7.6）% （t＝2.862, P〈0.01），caspase-1表达减少（32.9±3.4）% （t＝4.154, P〈0.001），IL-1β表达下调（24.7±5.3）% （t＝2.335, P〈0.05）。与对照组相比，PDGF组PASMCs增殖升高至（1.74±0.23，t＝4.717, P〈0.001），迁移增加到（3.12±0.8，t＝5.249, P〈0.001）。与对照组相比，格列本脲不影响PASMCs的增殖与迁移；但可明显抑制PDGF诱导的PASMCs的增殖（50.5±4.3）% （t＝4.462, P〈0.001）和迁移（42.77±2.84）% （t＝3.716, P〈0.001）。结论格列本脲可通过抑制NLRP3炎性小体的活化缓解PDGF诱导的PASMCs增殖与迁移。
- 刘亚飞王望柳婷张炜刘杰王军
- 关键词：格列本脲血小板源性生长因子肌细胞平滑肌NLRP3
