浙江省医药卫生科学研究基金(2003A013)
- 作品数：10 被引量：121H指数：7
- 相关作者：严力行洪小珍许先国朱发明马开荣更多>>
- 相关机构：浙江省血液中心浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- α1,3半乳糖基转移酶基因721C>T突变导致B_w亚型被引量：21
- 2005年
- 目的 研究红细胞ABO血型系统Bw亚型的分子基础。方法 通过标准血型血清学方法明确鉴定2个家庭3例Bw亚型,PCR扩增Bw 亚型ABO糖基转移酶基因的增强子、启动子和第1～7外显子及侧翼内含子序列,PCR产物经割胶纯化后直接测序。同时将第6和7外显子克隆到pc DNA3.1(- )质粒,转化DH5α后进行序列分析。采用序列特异性引物-聚合酶链反应方法证实测序所发现的突变。结果 直接测序发现3例Bw亚型的基因型为B/ O杂合,其中糖基转移酶基因的第2 6 1位G杂合缺失,第72 1位C/ T杂合。克隆证实一条染色体上为正常的O等位基因,另一条染色体上B等位基因(α1,3半乳糖基转移酶基因)存在第72 1位C>T突变,导致多肽链Arg2 4 1Trp替换。序列特异性引物-聚合酶链反应检测14 0份随机样本未发现此突变。结论 α1,3半乳糖基转移酶基因第7外显子72 1C>T突变可能是Bw亚型分子遗传基础之一。
- 朱发明许先国洪小珍严力行
- 关键词：突变序列特异性引物聚合酶链反应方法PCDNA3直接测序DH5Α
- 中国人群中α_(1,2)岩藻糖基转移酶基因C35T变异的频率研究被引量：17
- 2005年
- 目的研究中国人群中α1,2岩藻糖基转移酶(alpha-1,2-fucosyltransferase,FUT1)基因FUT1C35T变异的等位基因频率。方法聚合酶链反应扩增包括C35T变异区域的FUT1基因DNA片段,扩增产物用HaeⅢ进行酶切,建立鉴定FUT1基因h4等位基因的PCR-限制性片段长度多态性方法。应用该方法对158名随机汉族人群样本进行检测。结果158名随机样本中,35T/T纯合子8名,35C/T杂合子67名,35C/C纯合子83名,符合Hardy-Weinberg遗传平衡。所有样本的ABO血型鉴定均正常,而非H缺陷。结论FUT1基因C35T不是引起类孟买型的基因突变,而是一种常见的基因多态性。
- 许先国洪小珍吴俊杰马开荣傅启华严力行
- 一例由α_(1,2)岩藻糖基转移酶基因两碱基缺失引起的类孟买型血型被引量：19
- 2004年
- 目的 研究类孟买型血型的分子基础。方法 采用血清学方法鉴定个体的红细胞表型 ,用聚合酶链反应 ( polymerase chain reaction,PCR)扩增类孟买型表型个体的 ABO基因第 6、7外显子、α1 ,2 岩藻糖基转移酶基因编码区序列和 Se基因编码区序列 ,PCR产物经割胶纯化后直接进行测序分析。结果 类孟买型的α1 ,2 岩藻糖基转移酶基因核苷酸第 5 4 7～ 5 5 2位中的两碱基 AG缺失 ( CAGAGAG→ CAGAG) ,导致阅读框架发生移码 ,提前形成终止密码。先证者父母为杂合缺失携带者。结论 α1 ,2
- 朱发明许先国洪小珍严力行
- 关键词：聚合酶链反应
- 基因扫描技术在ABO血型基因型鉴定中的应用被引量：1
- 2005年
- 目的建立基因扫描(GeneScan)技术鉴定ABO血型基因型的方法。方法根据O1基因在261位G缺失而非O1基因无缺失,B基因第803位核苷酸与A基因不同的特点,设计4对引物,分别在上游引物5′端标记荧光基团,PCR-SSP扩增后,用基因扫描技术鉴定ABO血型基因型。结果129例样本用GeneScan技术鉴定的ABO血型结果与血清学结果完全符合,A、B、O基因频率分别为0·198、0·159、0·643。其中AA基因型8例(6·2%),AO基因型29例(22·5%),AB基因型6例(4·7%),BB基因型6例(4·7%),BO基因型23例(17·8%),OO基因型57例(44·2%)。结论GeneScan技术鉴定ABO血型基因型具有可行性,提供了一种可选择的方法。
- 何吉朱发明刘晋辉秦斐陈舒傅启华严力行
- 关键词：基因扫描ABO血型基因分型
- α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶等位基因467C>T和539G>C变异导致A_2亚型被引量：18
- 2006年
- 为了研究中国汉族人群ABO血型系统中A2亚型的分子遗传背景,发现并鉴定新的ABO等位基因,采用血型血清学方法鉴定5例ABO血型疑难样本,PCR扩增ABO基因转录调控序列和全编码序列,PCR产物经割胶纯化后直接测序,并对含有变异位点的扩增片段进行单倍体序列分析。结果表明5例疑难样本分别鉴定为A2或A2B亚型;进一步研究发现,1例A2B和1例A2样本分别含有A201和A205等位基因,另3例A2B样本中发现一个新的A2等位基因。该等位基因与A101相比,差异在外显子7的467C>T和539G>C变异,导致多肽链P156L和R180P的替换。结论首次发现467C>T和539G>C组合的A2等位基因,中国汉族人群中A2亚型具有遗传多态性。
- 许先国洪小珍吴俊杰马开荣傅启华严力行
- 关键词：A2亚型ABO血型系统
- 血清学和分子生物学鉴定罕见p血型被引量：7
- 2004年
- 目的 鉴定 p血型。 方法 用 p表型细胞和抗 PP1 PK(-Tja)血清进行鉴定 ,并进行测序分析。结果和结论 先证者血型为 p ,血清中有罕见的抗 PP1 PK。
- 洪小珍许先国朱发明严力行
- 罕见类孟买型AB_m^h的鉴定被引量：10
- 2005年
- 目的 鉴定类孟买型ABhm。方法 检测先证者ABO、H血型,红细胞进行吸收放散试验,测定唾液中的血 型物质,测序分析并进行家系调查。结果 先证者血型为罕见的类孟买型ABhm,血清中有抗- H,家系调查提示其遗 传方式为常染色体隐形遗传。结论 鉴定出罕见的类孟买型ABhm,血清中含有抗- H。
- 洪小珍许先国朱发明严力行
- 关键词：类孟买型抗-H
- 从孕妇血浆中提取胎儿DNA鉴定胎儿RhCcEe血型被引量：11
- 2005年
- 目的探讨利用孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创伤性产前诊断胎儿RhCcEe血型的方法。方法采用QIAampDNAKit抽提孕妇血浆DNA,利用SRY基因确认胎儿DNA的存在,通过PCR方法扩增30例孕妇血浆中胎儿DNA以检测胎儿RhCcEe基因,并对产前孕妇外周血和产后婴儿外周血进行RhCcEe血清学表型分析,回顾性评价胎儿基因分型结果的准确性。结果30例样本中,13例母子表型完全相同,17例存在区别。当母亲表型为RhCC、cc、EE、ee纯合子时,均成功扩增出母亲所缺少的c、C、e、E基因。结论本研究建立的非创伤性产前诊断胎儿RhCcEe基因型的方法是可行的,当母亲为纯合子时,血浆中胎儿RhCcEe基因分型具有临床意义,可用于新生儿溶血病的预防和诊断。
- 何吉朱发明洪小珍刘晋辉陈舒秦斐严力行
- 关键词：孕妇血浆DNA鉴定血型非创伤性产前诊断游离胎儿DNA
- PCR-SSP方法检测Scianna血型基因型被引量：4
- 2005年
- 目的 建立Scianna血型基因型检测方法,了解人群Scianna血型基因型的分布情况。方法 对240份浙 江汉族人及100份新疆塔吉克族人全血标本采用盐析法抽提DNA,PCR SSP做Scianna血型基因型分型方法。结果 在检测的浙江汉族和新疆塔吉克族人体,Scianna血型分型均为Sc:1, 2基因型,Sc1等位基因频率为100%,未 检测到Sc2等位基因。结论 PCR SSP分型方法用于血型基因型检测简单可行。
- 朱发明姜侃严力行
- 关键词：汉族塔吉克族
- α1,3半乳糖基转移酶新等位基因278C>T的鉴定被引量：30
- 2006年
- 目的研究中国汉族人群ABO血型系统中Bw变异型的分子遗传背景,发现并鉴定一个新的ABO等位基因。方法血型血清学方法鉴定1例ABO血型疑难样本,应用聚合酶链反应、逆转录-聚合酶链反应和DNA序列分析等方法对先证者ABO基因转录调控序列和全编码序列进行突变筛选和检测。结果血清学和家系调查鉴定该样本为Bw表型,对gDNA和cDNA研究发现该样本存在第6外显子278C/T杂合,单倍体分析发现一种新的Bw等位基因,该等位基因与B101相比,差异仅在第6外显子的278C>T错义突变,导致多肽链P93L替换,该突变点位于以前报道的Bw等位基因功能域之外。结论在中国人群中发现一种新的导致Bw变异型的ABO等位基因。
- 许先国洪小珍刘瑛吴俊杰马开荣朱发明严力行
- 关键词：基因突变ABO血型系统
