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上海市科委重大科技攻关项目(024319101)
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刘丽荣
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刘丽荣
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2006
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利用同源重组对酵母人工染色体左右臂进行多基因修饰
2006年
构建携带哺乳动物细胞筛选基因和酵母人工染色体(YAC)同源序列的载体,利用酵母中能够发生高频率同源重组的特点对YAC分别进行左、右臂修饰,依次将NEO、EGFP及PURO基因定点整合到YAC左右臂上。用营养缺陷筛选的方法排除酵母发生突变或随机整合等情况后,用PCR及Southern杂交方法证实各筛选基因定点整合于YAC两臂上,从而获得携带3个哺乳动物细胞筛选基因的YAC克隆。并且由此建立了通过同源重组将哺乳动物标记基因定点引入YAC左右臂的多基因修饰平台。
刘丽荣
卢步峰
吕子卿
卢波
张小蕾
郭礼和
关键词:
同源重组
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