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福建省自然科学基金(C0710002)
作品数:
1
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陈刚
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2008
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GSK-3β特异siRNA腺病毒对脐静脉内皮细胞增殖的影响
被引量:1
2008年
目的以糖原合成酶激酶3p(GSK-3β)特异的RNA干扰(RNAi)腺病毒表达载体作为研究工具,初步探讨Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-eatenin)信号通路对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。方法利用体外同源重组技术构建GSK-3β特异的siRNA腺病毒表达载体,在HEK293A细胞中包装并扩增病毒、空斑实验法测定病毒滴度。GSK-3β特异的RNAi腺病毒感染HUVEC,Western印迹和免疫细胞化学法检测其对GSK-3β和13-catenin蛋白表达的影响,以四甲基偶氮唑盐(MTr)法检测细胞增殖。结果成功构建了GSK-3β特异的siRNA腺病毒表达载体,获得高滴度的腺病毒液。构建的重组腺病毒感染HUVEC显著抑制GSK-3B蛋白的表达,增加β-catenin的蛋白表达。重组腺病毒感染3、5、7d后,细胞增殖率明显增加(P〈0.05或P〈0.01)。结论构建的GSK-3β特异的siRNA腺病毒能有效抑制GSK-3β基因的表达,促进β-catenin的蛋白表达,上调Wnt/β-catenin信号通路对人脐静脉内皮细胞增殖有重要的影响。
陈刚
游婷婷
乔玉芳
沈小燕
林丽香
关键词:
糖原合成酶激酶3
Β-连环蛋白
人脐静脉内皮细胞
细胞增殖
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