国家自然科学基金(30300099)
- 作品数：60 被引量：122H指数：7
- 相关作者：沈爱国程纯刘海鸥陈梦玲严美娟更多>>
- 相关机构：南通大学南通医学院复旦大学上海医学院更多>>
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- Thr187磷酸化p27^kip1、Skp2在肝细胞癌中的表达及其意义被引量：2
- 2007年
- 本研究检测了Thr187磷酸化p27（P—p27Thr187）、Skp2及p27在HCC中的表达情况并结合临床资料进行分析，从p27分子磷酸化失活的新角度进一步研究HCC发病的分子机制，探讨其中的临床病理意义。
- 王酉陈莉陆牡丹李鹏崔小鹏秦军沈爱国
- 关键词：肝细胞癌增殖细胞核抗原临床病理意义
- Src抑制的蛋白激酶C的底物在脑组织中的表达
- 2010年
- 目的:探讨大鼠发育过程中,SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C的底物)在脑组织中的表达变化及意义。方法:通过Western blot,免疫组织化学法检测SSeCKS在脑组织中表达的时空变化及细胞定位。结果:SSeCKS在大鼠脑发育过程中存在明显的表达变化,在胎鼠和生后早期的SD大鼠中表达水平较高,尤以生后1周明显,成年以后显著降低,4周时最低。脑分区检测显示端脑、海马和间脑符合全脑检测结果。DAB显色示SSeCKS在脑组织中呈点状散在分布,免疫荧光双标记示SSeCKS与星形胶质细胞有部分共定位,与神经元无明显共定位。结论:SSeCKS在大鼠脑发育过程中存在时空变化,并且主要定位于星形胶质细胞。提示SSeCKS可能通过参与细胞骨架的调节和信号通路的活化影响大鼠胚胎发育过程中星形胶质细胞指导的神经元的迁移和轴突的生长。
- 秦婧沈爱国陈莉
- 关键词：星形胶质细胞免疫组织化学法
- 地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶RNA探针的制备和应用被引量：2
- 2003年
- 为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- 的 DNA片断 ,将其克隆到 p GEM-T载体 ;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度 ;最后应用该探针 ,通过原位杂交的方法 ,分析 β-1,4-Gal T- m RNA在小鼠坐骨神经的表达。结果 :构建了β-1,4-Gal T- /p GEM-T质粒 ,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ,应用该探针发现 β-1,4-Gal T- 在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达。以上结果表明 ,制备的地高辛标记的正、反义 β-1,4-Gal T- RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-Gal T- m RNA在组织中的表达。本研究为进一步分析β-1,4-Gal T- 在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础。
- 沈爱国龚蕾蕾丁斐严美娟王汉洲顾建新
- 关键词：地高辛标记小鼠RNA探针
- N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化被引量：1
- 2004年
- 为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在。以扩增的 c DNA片断标记探针 ,Northern blot分析β-1,4-Gal T- 、 、 m RNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的表达变化。结果表明 :通过 RT-PCR方法 ,检测到 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在 ;采用 Northern blot方法 ,发现β-1,4-Gal T- 、 、 在正常大鼠坐骨神经中有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化 ,但三种同功酶的表达变化各不相同。结论 :本实验发现 β-1,4-Gal T- 、 、 在坐骨神经有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示与
- 沈爱国严美娟龚蕾蕾关晓颖程纯顾建新
- 关键词：坐骨神经RT-PCRΒ-1,4-半乳糖基转移酶
- p27^(kipl)和Ki-67蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义被引量：9
- 2004年
- 目的 探讨 p2 7kipl和 Ki- 6 7蛋白在非霍奇金淋巴瘤 (non- Hodgkin's lymphoma,NHL)中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化方法检测 10 0例 NHL 及 2 0例反应性增生淋巴结中 p2 7kipl和 Ki- 6 7蛋白的表达情况 ,结合临床及病理资料进行统计分析。结果 p2 7kipl蛋白在反应性增生淋巴结 (不包括生发中心 )中的阳性率明显高于 NHL,随着肿瘤侵袭性的增加 ,p2 7kipl表达水平下降。 Ki- 6 7蛋白在反应性增生的淋巴结 (不包括生发中心 )中的阳性率明显低于 NHL,其表达水平随着肿瘤的侵袭性增加而上升。NHL 中 p2 7kipl蛋白的阳性率与 Ki- 6 7表达水平呈负相关。结论 p2 7kipl与 NHL 的发生发展有关 ,联合检测 p2 7kipl及 Ki- 6 7蛋白水平可为 NHL
- 程纯张冬梅沈爱国何松邵晓轶刘海鸥
- 关键词：非霍奇金P27^KIPLKI-67细胞周期蛋白类
- Promoting lumbar spinal fusion by adenovirus-mediated bone morphogenetic protein-4 gene therapy被引量：2
- 2007年
- 赵剑赵敦炎沈爱国刘璠张烽孙煜吴红富陆春峰施红光
- 关键词：腺病毒基因治疗
- 突触后密度蛋白-93在大鼠脊髓损伤后的表达变化
- 2007年
- 目的探讨突触后密度蛋白-93(PSD-93)在脊髓损伤(SCI)后的表达变化以及定位情况。方法使用改良Allen法制备大鼠急性脊髓损伤模型,致大鼠脊髓(T9、T10)重度撞击伤。采用实时定量PCR(Real-time PCR)和Western blotting测定损伤后各时间段PSD-93 mRNA及其蛋白水平在脊髓中的表达变化。采用免疫荧光双标方法检测PSD-93在正常脊髓中的分布以及损伤后的定位改变。结果PSD-93 mRNA水平在SCI后呈现逐渐下降的趋势,在3d降到最低水平;蛋白水平则在SCI后显著上调,于1d达高峰。免疫荧光双标显示,PSD-93在SCI后除与神经型一氧化氮合酶(nNOS)存在着共定位之外,还高表达于损伤局部活化的小胶质细胞和星形胶质细胞。结论脊髓损伤后PSD-93在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,并且与nNOS、活化的胶质细胞存在共定位,提示PSD-93参与了脊髓继发性损伤过程。
- 高尚锋程纯陈梦玲赵剑李欣牛淑琼严斌沈爱国
- 关键词：脊髓损伤神经型一氧化氮合酶实时定量PCR免疫印迹法免疫荧光
- 肝细胞癌组织中Skp2的表达及与p27^(kip1)、PCNA蛋白表达的关系被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨Skp2的表达在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用,及其与p27kip1(p27)和PCNA的关系。方法:收集76例HCC及癌旁组织,l0例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,l0例HCC及癌旁肝新鲜组织,采用免疫组织化学方法及免疫印迹技术检测Skp2、p27及PCNA蛋白在这些组织中的表达。结果:免疫印迹结果显示:Skp2在HCC组织中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。免疫组织化学结果显示HCC中Skp2的阳性率(24.08%)显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.001)。Skp2的表达与肝癌组织分化程度,血清AFP值及转移有关(P<0.05)。p27在正常肝组织和癌旁组织中的表达明显高于HCC组织(P<0.001)。HCC组织中PCNA蛋白的表达明显高于癌旁和正常组织(P<0.01)。HCC组织中Skp2的表达与p27呈负相关(P<0.001);与PCNA呈正相关(P<0.01)。结论:Skp2在HCC组织中表达是上调的,可能是通过作用于细胞周期调控蛋白p27,加速了对p27泛素化依赖的蛋白降解,使其表达及代谢发生异常。导致细胞周期失控并促进细胞异常增殖,从而参与了HCC的发生和发展。
- 程阳王酉陈莉陆牡丹秦军崔小鹏李鹏刘胜利
- 关键词：肝细胞癌免疫印迹法SKP2P27
- 内毒素致伤小鼠肺组织SSeCKS表达变化的研究被引量：7
- 2006年
- 目的观察内毒素脂多糖(LPS)致伤小鼠肺组织中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)的表达变化和细胞定位。方法腹腔注射LPS制备小鼠内毒素肺损伤模型,依据注射时相和剂量不同随机分组。用RealtimePCR法和Westernblot法检测各组肺组织SSeCKS的mRNA和蛋白质水平表达情况,间接免疫荧光双标法检测SSeCKS在肺组织中的细胞定位。结果SSeCKS表达水平与LPS用量呈现剂量和时间依赖关系:1、5、10和15mgkg组SSeCKSmRNA水平皆显著高于对照组(P<0.05),且随注射剂量增高SSeCKSmRNA表达量亦逐渐增高;不同时相LPS(5mgkg)注射后肺组织中SSeCKSmRNA水平表达呈动态变化过程,1h开始增高,3h达到表达高峰,12h降至正常水平;SSeCKS蛋白水平表达变化与mRNA水平变化相一致。SSeCKS在肺组织中定位于肺泡间隔毛细血管内皮细胞。结论SSeCKS是炎症反应蛋白,其表达量与炎症的严重程度相关。内毒素可诱导肺泡间隔毛细血管内皮细胞SSeCKS表达上调。
- 沈爱国刘海鸥陈梦玲高永静程纯
- 关键词：LPSSSECKS血管内皮细胞
- SSeCKS在炎症活化星形胶质细胞中作用的初步研究
- 目的通过分析腹腔注射LPS后SSeCKS在脑组织的表达、定位情况,并探讨该分子在炎症活化星形胶质细胞过程中的作用与相关机制,为中枢神经系统炎症的治疗提供了新的思路。方法建立LPS致伤大鼠炎症模型。检测脑组织中SSeCKS...
- 孙琳琳程纯沈爱国
- 关键词：SSECKS蛋白激酶C星形胶质细胞炎症
