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福建省教育厅资助项目(JA08096)
作品数:
2
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陈燕凌
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幽门螺杆菌通过Bcl-2/Bax机制诱导HepG2细胞凋亡的研究
2012年
探讨幽门螺杆菌(H.pylori)对肝细胞HepG2细胞凋亡的影响及其机制。方法:应用HepG2细胞为实验模型.用MTT、荧光染色技术、透射电子显微镜、AO/EB染色、流式细胞仪定性和定量地检测HepG2细胞凋亡情况;WestemBlotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:不同浓度H.pylori处理组(4.0x105、4.0×106、4.0×107和4.0×108CFU/mL)的24h细胞生长抑制率分别为(2.64±0.34)%、(16.35±4.24)%、(27.15±3.19)%和(33.35±2136)%(P〈0.05),抑制率随作用时间的延长而增加(P〈0.05)。HepG2细胞与4×107/mL浓度的NCTCll637共培养24h后,在透射电镜下可见部分细胞呈不同时期的凋亡形态。不同浓度H.pylori的凋亡率分别为(2.50±0.45)%、(6.00±0.35)%、(11.10±0.45)%和(14.65±0.27)%,当H.pylori的浓度≥4.0x10‘CFU/mL,HepG2细胞凋亡率与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。H.pylori作用HepG2细胞后,HepG2细胞的Bcl一2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达则与Bcl一2蛋白表达情况相反。结论:H.pylori通过Bcl一2/Bax机制诱导HepG2细胞凋亡。
陈辉星
陈燕凌
幽门螺杆菌对胆管癌细胞增殖与凋亡及细胞核转录因子NF-KB表达的影响
被引量:2
2009年
目的探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖、凋亡及细胞周期分布的影响,利用免疫细胞化学和凝胶电泳迁移率变动实验(EMSA)分析细胞核转录因子NF-KB在Hp作用前后的表达活化情况;使用特异性NF-KB阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)阻断NF-KB的活化,利用细胞免疫化学技术和RT-PCR半定量技术分析比较抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL在转录因子NF-KB失活前后的表达情况。结果在MOI值(细菌与细胞浓度比)为0.5∶1的状态下,Hp对QBC939细胞有促增殖作用,第1、3d的增殖率分别为(15.24±4.2)%和(34.18±2.6)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。在该MOI值时无诱导细胞凋亡作用,但可推动细胞周期的进展;在此过程中伴有细胞NF-KB活化和抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL表达上调;PDTC阻断实验证明抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL的表达受到NF-KB活性的调控。结论幽门螺杆菌—核转录因子NF-KB抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL传导通路的活化在胆管癌细胞的增殖、凋亡及恶性转化中可能具有重要作用。
吴雨田
陈燕凌
余菲菲
唐南洪
王小茜
李秀金
关键词:
幽门螺杆菌
胆管癌细胞
细胞增殖
核转录因子NF-KB
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