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国家自然科学基金(30300066)

作品数:6 被引量:5H指数:2
相关作者:卢健蔡蓉戴冰冰李珂许伟榕更多>>
相关机构:上海第二医科大学上海交通大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇细胞
  • 2篇增强子
  • 2篇转录
  • 2篇转录调控
  • 2篇结合蛋白
  • 2篇白血
  • 2篇白血病
  • 1篇单核
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质酪氨酸...
  • 1篇电穿孔
  • 1篇电穿孔转染
  • 1篇增强子结合蛋...
  • 1篇致瘤性
  • 1篇酸酶
  • 1篇体内致瘤性
  • 1篇启动子
  • 1篇人红白血病
  • 1篇转录激活

机构

  • 3篇上海第二医科...
  • 2篇上海交通大学

作者

  • 5篇卢健
  • 3篇戴冰冰
  • 3篇蔡蓉
  • 2篇王红洁
  • 2篇蔡蓉
  • 2篇许伟榕
  • 2篇李珂
  • 1篇乔福峰
  • 1篇于丽莉
  • 1篇李珂
  • 1篇郑新民
  • 1篇仇全
  • 1篇梅文瀚
  • 1篇王家敏
  • 1篇李颖

传媒

  • 2篇中国生物化学...
  • 1篇上海第二医科...
  • 1篇癌症
  • 1篇Journa...
  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 1篇2007
  • 2篇2006
  • 3篇2005
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达
2005年
目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。
蔡蓉戴冰冰梅文瀚李珂卢健
关键词:U937细胞PI3KΓ基因增强子结合蛋白PCDNA3电穿孔转染
人CCAAT/增强子—结合蛋白ε研究进展被引量:2
2005年
人核内转录因子C/EBP ε属于CCAAT/增强子-结合蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein,C/EBP)家族成员,特异性表达于造血系统,对體系细胞增殖与分化具有重要作用,参与了一系列體系特异性基因的转录调控。本文就C/EBP ε基因的结构、调控机制以及产物的生物学功能进行综述。
蔡蓉卢健
关键词:转录调控
人SATB1基因5′上游序列的转录激活功能分析被引量:2
2005年
在对人SATB1基因进行生物信息学分析的基础上 ,采用PCR技术 ,扩增人基因组DNA中SATB1基因 5′上游序列的 - 2 95 5~ - 9片段 ,构建了 3个分别由SATB1基因 5′上游 - 2 95 5~ - 9,- 172 7~ - 9和 - 76 0~ - 9序列片段驱动的报告载体 -pGL3 SP2 94 6 luc ,pGL3 SP1718 luc和pGL3 SP75 1 luc ,分别瞬时转染JurkatT ,K5 6 2 ,U937和HeLa细胞 ,通过测定荧光素酶的表达活性 ,观察SATB1基因 5′上游序列片段 3个删除突变体在不同细胞内活性的差异 .结果显示 ,SATB1上游序列- 2 95 5 - 9在 4种细胞中的转录激活能力为U937>JurkatT >K5 6 2 ,在HeLa细胞中基本无激活 ,提示SATB1的转录激活可能具有一定的细胞类型特异性 .3种 5′删除突变体转录激活性由大至小顺序为 - 76 0 - 9>- 2 95 5 - 9>- 172 7 - 9,提示SATB1的核心启动子可能存在于其 5′上游序列的- 76 0至 - 9bp区域中 .
李颖戴冰冰蔡蓉仇全于丽莉卢健
关键词:启动子转录调控
增强C/EBPε表达对人粒-单核性白血病细胞U-937分化的作用(英文)被引量:1
2006年
背景与目的:CCAAT-增强子结合蛋白(CCAAT-enhancerbindingproteinε,C/EBPε)是一种在髓系细胞中特异性表达的核内转录因子,可能是髓系细胞分化过程中重要的调控因子,并且参与了一系列髓系细胞特异性基因的转录激活。本研究拟探讨C/EBPε的细胞特异性表达,研究过量表达C/EBPε对人粒-单核性白血病细胞U-937中c-Myc表达、细胞周期及细胞分化的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测五种不同类型的造血系细胞中C/EBPε的表达水平。根据RT-PCR的结果,选择人粒-单核性白血病细胞U-937作为过量表达C/EBPε的对象。电穿孔转染C/EBPε表达质粒pcDNA3.1-C/EBPε,G418筛选稳定表达细胞并命名为U-937-C/EBPε32。RT-PCR与Westernblot检测转染细胞内C/EBPε与c-Myc的表达水平,流式细胞仪检测过量表达C/EBPε对U-937细胞周期及细胞分化的影响。结果:过量表达C/EBPε可以显著增强转染U-937细胞表面粒细胞特异性表面抗原CD11b的表达,U-937-C/EBPε32细胞表面CD11b的阳性率达92.56%,而在U937与U-937-pcDNA3.1细胞表面分别为77.46%与74.81%,但c-Myc的表达与细胞周期分布未受影响。结论:C/EBPε可能是髓系细胞向粒细胞分化过程中非常重要的转录调控因子。
蔡蓉戴冰冰李珂王红洁许伟榕王家敏卢健
关键词:细胞分化
CLONING PROMOTER OF HUMAN SATBl GENE AND EFFECT OF ATRA AND CoCl_2 ON ITS ACTIVITY
2006年
Objective To explore the structure and activity of SATB1 promoter in different cells, ATRA and CoCl2 effect on its activity. Methods Using luciferase system to assay the promoter activity of human SATB1 gene, three luciferase reporter vectors were constructed which driven by different regions of 5' untranslated sequence from human SATB1 gene , called pGL3-SP2946-luc , pGL3-SP1718-luc and pGL3-SP751-luc , and transfected into Jurkat T, K562, U937 and Hela cells transiently using lipofectinamine, the expression activity was detected at different dosage of A TRA and CoCl2treatment for different time course. Results The reporter gene expression from SATB1 promoter were high activity in U937 cell, moderate in Jurkat T cell, low activity in K562 cell and showed no obvious activity in Hela cell, the reporter gene expression from pGL3-SP751-1uc kept on the higher lever in Jurkat T, K562 and U937 cells than the other two vectors. We also found that the repressive effect of CoCI2 on SATBI's mRNA expression and the relative luciferase expression from pGL3-SP751-luc in U937 cell was down-regu- lated obviously by ATRA and CoCI2 in the concentration- and time-dependent manners. Conclusion SATB1 pro- rooter drives gene expression with cell-specificity and its core promoter region maybe exist in the - 751 - - 9bp of 5' untranslated region of human SATB1 gene. Combined with the experiment result we found before that SATB1 was down-regulated by ATRA in U937, the results imply that STAB1 maybe is down-regulated by ATRA and CoCl2 through its promoter in the differentiation of myeloid cell line-U937.
李颖戴冰冰蔡蓉仇全于丽莉卢健
过表达PTPα促进K562细胞体外增殖能力和体内致瘤性
2007年
探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)中PTPα的表达水平.根据检测结果,选择K562细胞作为研究对象,利用脂质体将PTPα真核表达载体转染K562细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western印迹验证过表达情况;经MTT法检测细胞增值能力的改变;用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞分化状态;并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠,观察PTPα基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力及瘤体的组织化学变化.上述实验结果表明,通过G418压力筛选获得了PTPα高表达多克隆细胞系K562-PTPα;经体外增殖实验分析,实验组K562-PTPα细胞与未转染组细胞K562和转染空载体组细胞K562-splice相比,细胞生长速度增快,G2/M期细胞比例增加(P<0.05),而细胞分化状态无明显变化;裸鼠体内致瘤实验显示,K562组、K562-splice组和K562-PTPα组平均瘤重分别为(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g和(2.5±0.5)g;病理切片显示,K562-PTPα组瘤体组织分化程度较对照组低、恶性程度高,细胞的致瘤能力增强(P<0.01).综上所述,过表达PTPα使K562细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤性,表明PTPα可能在造血系统恶性肿瘤的发生发展中发挥促进作用.
王红洁蔡蓉李珂许伟榕乔福峰郑新民卢健
关键词:人红白血病K562细胞
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