浙江省科技计划项目(2011C22078)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：金仁耀吴建祥刘欢更多>>
- 相关机构：浙江工商大学浙江大学杭州南开日新生物技术有限公司更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：化学工程农业科学更多>>
- 庆大霉素单克隆抗体的研制及ELISA分析方法的建立被引量：4
- 2013年
- 用与牛血清蛋白(BSA)交联的庆大霉素人工抗原(GM-BSA)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,得到1株能稳定分泌抗庆大霉素单抗的杂交瘤细胞株(6H8),经鉴定6H8的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链。制备单克隆抗体腹水,腹水的间接ELISA效价在1×10-7以上。该单克隆抗体与庆大霉素结构类似物均无交叉反应,具有高度特异性。以制备的单抗建立间接竞争ELISA方法,其线性回归方程为y=16.122ln(x)-2.0143(R2=0.9934),抑制中浓度IC50为25.2μg·L-1,最低检测限IC20为3.9μg·L-1。竞争ELISA方法检测鲜奶中的庆大霉素平均回收率在92%～110%之间。抗庆大霉素单抗的制备和竞争ELISA方法的建立为庆大霉素快速检测奠定了基础。
- 金仁耀吴建祥
- 关键词：庆大霉素单克隆抗体竞争ELISA
- 抗氟喹诺酮类抗生素单抗的研制及其检测应用被引量：7
- 2013年
- 用与牛血清白蛋白交联的环丙沙星免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得1株能稳定传代并分泌抗氟喹诺酮类药物的单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞9H9,用杂交瘤细胞制备单克隆抗体腹水。单克隆抗体对环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、达氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星、麻保沙星、洛美沙星、沙拉沙星、双氟沙星均有免疫反应,且50%抑制质量浓度分别为达到3.21、3.01、8.15、4.85、7.75、3.70、9.83、6.21、11.62、200.70 ng·mL-1。利用单抗建立了检测蜂蜜、鸡肉组织、牛奶中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶联免疫吸附测试(CI-ELISA)和免疫胶体金试纸条法。CI-ELISA方法的IC50及IC10分别为3.21 ng·mL-1和0.42 ng·mL-1。添加试验和特异性分析表明,免疫胶体金试纸条能用于检测蜂蜜、鸡肉组织、牛奶中的氟喹诺酮类药物残留,且检测上述样品中环丙沙星残留的灵敏度分别为5、20、30 ng·mL-1。
- 吴建祥王震成金仁耀刘欢周崇盈张少恩
- 关键词：氟喹诺酮类药物单克隆抗体
