吉林省科技发展计划基金(201101077)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：俞先峰朱拓张嘉保刘殿峰陈健更多>>
- 相关机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 猫多能性基因慢病毒表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2014年
- 从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。
- 樊晓烨俞先峰袁宝陈健朱拓袁龙马云青栗楠谢珊姗刘殿峰张嘉保任文陟
- 关键词：慢病毒载体胚胎干细胞
