吉林省科技发展计划基金(201101076)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 相关作者：闫广谋崔敏薛雨佳吕岩谭为更多>>
- 相关机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 引发仔猪水样腹泻的多重耐药、高致病性大肠埃希菌的分离与鉴定被引量：7
- 2013年
- 近来,长春地区多个养猪场发生高致病性、高死亡率的仔猪水样腹泻,腹泻仔猪经多种药物反复治疗,均无疗效。试验从发病仔猪肠壁内膜分离到2株大肠埃希菌(Escherichia coli),经鉴定,分离菌株为多耐药、高致病性菌株。将分离株进行生化试验及其16S rRNA序列的克隆、测序,并与GenBank中的序列进行对比,结果显示,分离菌株16S rRNA与GenBank登录的大肠埃希菌序列同源性达99%。动物回归试验结果显示,该大肠埃希菌能引起仔猪水样腹泻。药敏试验结果显示,常用治疗大肠杆菌病的药物如庆大霉素、氧氟沙星、环丙沙星等均对其无效。
- 薛雨佳于大勇崔敏吕岩闫广谋
- 关键词：RRNA药敏试验水样腹泻
- 牛型结核分枝杆菌MPT64蛋白的原核表达及纯化
- 2011年
- 目的原核表达并纯化牛型结核分枝杆菌MPT64蛋白。方法以牛型结核分枝杆菌Vallee株全基因组DNA为模板,PCR扩增MPT64基因,克隆至pET-28a(+)载体,构建重组原核表达质粒pET-MPT64,转化至E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE鉴定后,用Ni-NTA亲和层析纯化,Western blot鉴定纯化蛋白。结果获得的MPT64基因测序结果与GenBank中登录的MPT64基因核苷酸序列同源性为100%;重组表达质粒pET-MPT64经酶切鉴定表明构建正确;表达的重组MPT64蛋白相对分子质量约为26 000,主要以可溶性形式表达,表达量约占全菌总蛋白的11%;纯化的重组MPT64蛋白纯度达93%,可与抗结核牛血清发生特异性反应。结论 成功原核表达并纯化了牛型结核分枝杆菌MPT64蛋白,其可作为诊断抗原用于新型牛结核病的检测。
- 谭为聂映吴仁彪程黎庆闫广谋张西臣张瑞
- 关键词：原核细胞基因表达纯化
