博士科研启动基金(2009RC03)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
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- 相关领域:农业科学更多>>
- 牛细小病毒VP2基因分段表达及其抗原性分析被引量:1
- 2013年
- 为研究牛细小病毒(BPV)VP2蛋白免疫学相关功能,本研究采用PCR扩增得到BPV-1VR767株VP2基因片段,测序后利用生物学软件分析VP2蛋白的抗原表位,选取抗原表位富集的3个基因片段VP2-1(100 bp~789 bp),VP2-2(898 bp~1 353 bp)和VP2-3(1 450 bp~1 899 bp)分别克隆至原核表达载体pET-28a中,并转化E.coli中进行诱导表达。表达的重组蛋白经western blot和间接ELISA鉴定;用纯化的重组蛋白分别免疫小鼠,并用ELISA检测小鼠多克隆抗体特异性。结果显示:表达的3种重组蛋白分子量分别约为30.2 ku、22.9 ku和22.7 ku,均可以被BPV阳性血清识别。间接ELISA结果表明,3种重组蛋白均能够有效诱导抗体反应。其中,重组VP2-3诱导产生的抗体效价最高,与阳性血清的结合能力最强。该研究结果为研究VP2蛋白功能、建立BPV检测方法提供了基础材料。
- 罗济冠葛俊伟姜艳平崔文乔薪瑗唐丽杰李一经
- 关键词:VP2基因抗原性分析