国家自然科学基金(39893290)
- 作品数：33 被引量：437H指数：11
- 相关作者：刘秀梵吴艳涛金宁一丁壮王兴龙更多>>
- 相关机构：扬州大学解放军军需大学山东农业大学更多>>
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- 传染性支气管炎病毒中国和东南亚分离株的分子流行病学被引量：11
- 2003年
- 对 2 4个鸡传染性支气管炎病毒中国和东南亚分离株的 S1基因 5′端 (含 HVR 和 HVR )和 N基因 3′端进行了扩增和序列分析 ,通过与公开的其他毒株序列间的比较和分析 ,对分离毒株的分子流行病学进行了研究。结果表明 ,2 4个分离毒株分属于美洲、亚洲和欧洲 3个基因群。其中一些毒株形成一相对独立的亚洲基因群 ,提示 IBV在亚洲已存在相当长时间 ;另一些毒株则可能来源于欧洲和美洲或来源于不同毒株 (包括疫苗株 )
- 蒋贻海陈溥言
- 关键词：传染性支气管炎病毒中国分离株分子流行病学S1基因N基因鸡病毒
- 传染性法氏囊病病毒野毒株的致病性及其vp2基因比较被引量：12
- 2004年
- 对4个IBDV野毒株的致病性和它们的vp2基因高变区序列同时做了比较分析。结果表明,4个IBDV毒株在致病性程度上存在较大差异。其中有一个是真正的超强毒,即GX8/99,其他几个虽然达不到真正超强毒的毒力,但也比经典的标准毒的致死性高得多。在vp2基因高变区,这4个IBDV野毒株与超强毒参考株HK46同源性很高,在DNA水平为96.8%～99.5%,在氨基酸(aa)水平为96.6%～100%。而与疫苗毒D78有很大差异,分别只有91.7%～93.6%和91.8%～93.2%。说明IBDV毒株的vp2基因高变区确实与其致病性有一定关系。特别是SD-1/97、SD-3/98、JS-30/99株之间及其与HK46在DNA和aa水平的同源性高达98.4%和98.6%以上,SD-3/99、JS-30/99株之间及其与HK46的氨基酸同源性为100%。然而,致病性特别高的GX8/99株病毒与其他3个野毒株及HK46在DNA和氨基酸水平的同源性相对较低,在DNA和aa水平的同源性只有96.8%～97.2%和96.6%～97.9%。相对于国内的流行毒株和香港超强毒参考株HK46,GX8/99株在致病性和VP2高变区都已发生了一定的变异。
- 孙淑红崔治中丁家波朱瑞良
- 关键词：VP2基因高变区
- 鸡新城疫病毒HN基因亚单位疫苗诱导免疫保护的实验研究被引量：21
- 2002年
- 实验分别将应用Ｂａｃ ｔｏ Ｂａｃ系统表达的新城疫病毒四平株和长春株血凝素－神经氨酸酶基因（ＨＮ基因）蛋白的重组杆状病毒感染Ｓｆ－９昆虫细胞后，２８ ℃培养７２ ｈ后，洗涤、收集昆虫细胞，离心浓缩，－２０ ℃冻融３次。用ＨＡ－ＨＩ实验和ＨＮ单抗中和试验测定表达产物的活性。将表达的重组蛋白作为亚单位疫苗免疫鸡。用间接ＥＬＩＳＡ和ＨＩ试验测定鸡体内抗体效价。免疫后第１５ ｄ用国家标准强毒ＮＤＶ Ｆ４８Ｅ８攻毒，统计免疫保护率。结果表明，表达的ＮＤＶ ＨＮ重组蛋白能够诱导鸡体产生抗ＮＤＶ 特异性ＩｇＧ抗体和ＨＩ抗体。实验Ⅰ组（四平株）雏鸡保护率为６５％，实验Ⅱ组（长春株）雏鸡保护率为１００％。
- 丁壮金宁一王兴龙米志强夏志平王承宇
- 关键词：新城疫病毒亚单位疫苗免疫保护率
- 新城疫病毒F基因在新型杆状病毒表达系统中的表达及重组病毒的免疫原性被引量：19
- 2001年
- 将新城疫病毒 (四平株 ) F基因插入到 p Fast Bac 质粒中 ,构建了重组质粒 p FF。 p FF转化大肠杆菌 DH10 Bac后 ,F基因在助手质粒 (helper plasmid)提供转座酶的情况下 ,通过转座进入 Bacmid,构建了重组 Bacmid(re- Bacmid)。在含有 X- gal/ IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上 ,筛选白色菌落后 ,提取 re- Bacm id转染 Sf- 9昆虫细胞。在昆虫细胞内 ,re- Bacm id经复制、表达、装配 ,形成重组杆状病毒 ,并表达 F蛋白。经 SDS- PAGE和 Western- blot分析 ,表达的 F蛋白的分子大小为 6 30 0 0 ,并证明在昆虫细胞内表达的蛋白能部分糖基化。表达的 F蛋白约占细胞总蛋白的 10 %。动物试验证明 。
- 王兴龙金宁一丁壮金扩世米志强王宏伟郭志儒殷震
- 关键词：新城疫病毒F基因杆状病毒重组病毒免疫原性
- 我国新城疫病毒HN基因背景分析及其亚单位蛋白诱导免疫实验研究
- 从我国部分地区分离、鉴定了23株新城疫病毒(NDV).并对其部分生物学特性进行了研究。这23株NDV均能凝集鸡和人(O型血)的红细胞.对猪、山羊、绵羊、牛和马的红细胞凝集作用有差异.分离、鉴定的23株NDV.电镜下呈现圆...
- 丁壮金宁一王兴龙金扩世郭志儒米志强王承宇殷震
- 文献传递
- 4株鹅源新城疫病毒融合蛋白基因的克隆及序列分析
- 测定了4株鹅源新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因5’端170O核苷酸片段的序列,分析测定的序列和由其推导的F蛋白氨基酸序列,并对鹅源NDV的基因型分类地位进行探讨。结果表明,4林病毒F基因的同源性大于97,与NDV标...
- 万洪全吴艳涛刘秀梵张如宽
- 关键词：新城疫病毒融合蛋白基因基因型
- 文献传递
- 新城疫病毒四平株HN蛋白基因的克隆与序列分析被引量：6
- 2000年
- 新城疫病毒 (NDV)四平株在鸡胚增殖后纯化 ,提取RNA ,然后利用特异性引物 ,经RT_PCR一次性扩增出了NDV四平株的全长HN基因。将该HN基因插入pKS(_)后测序。序列分析表明 ,该HN基因核苷酸长度为 1 742bp ,编码 5 71个氨基酸 ,序列中有 5个糖基化位点 ,1 2个半胱氨酸残基。同源性分析表明 ,四平株HN基因与目前国外发表的其他NDVHN基因相比 ,核苷酸序列同源性在 83.4%_89.2 %之间 ,推导的氨基酸序列同源性在 87.6 %_91 .1 %之间。
- 丁壮金宁一王兴龙金扩世罗坤王宏伟殷震
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白基因克隆
- 新城疫病毒(青岛株)F蛋白基因的克隆和序列分析被引量：9
- 2001年
- 参考新城疫病毒 ( NDV)长春株的 F基因序列设计了 1对特异性引物 ,应用 RT-PCR对 NDV青岛株(野毒 )的 F基因进行了扩增 ,扩增产物克隆后测序。扩出的 F基因核苷酸长度为 792 bp,编码 2 6 1个氨基酸 ,包括完整的 F2片段和部分 F1片段。裂解位点区 ( 1 1 2～ 1 1 7aa)氨基酸序列为 Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Phe,与国外发表的强毒株序列相符 ,证明青岛株为强毒株。根据该基因推导的氨基酸序列 ,与国内外发表的 NDVF蛋白氨基酸序列相比 ,同源性为 88.1 %～ 94 .3%。
- 王兴龙金宁一丁壮金扩世米志强郭志儒李太元吕杰殷震
- 关键词：新城疫病毒F蛋白基因RT-PCR基因克隆
- 四个新城疫病毒强毒株HN基因的同源性分析被引量：2
- 2000年
- 新城疫病毒（ＮＤＶ）四平株、昌黎株、青岛株、Ｆ４８Ｅ８株分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚增殖，蚀斑纯化（３代），生物学特性鉴定及结合基因序列分析，表明ＮＤＶ四平株、昌黎株、青岛株均为强毒株。经差数、蔗糖密度梯度离心提纯病毒，分别提取ＲＮＡ，利用一对特异性引物及ＲＴ－ＰＣＲ方法，一次性扩增出 ＮＤＶ四平株、昌黎株、青岛株和 Ｆ４８Ｅ８株的全长 ＨＮ基因，分别将该ＨＮ基因克隆入载体ｐＫＳ（－）并进行测序。序列分析表明，这４个毒株ＨＮ基因核苷酸长度均为１７１３ｂｐ，编码５７１个氨基酸，其中四平株和 Ｆ４８Ｅ８株含有５个糖基化位点，青岛株和昌黎株含有 ６个糖基化位点，四平株含有 １２个半胱氨酸残基，而昌黎株、青岛株和Ｆ４８Ｅ８株含有１３个半胱氨酸残基。３个野生毒株与Ｆ４８Ｅ８相比较，核苷酸序列同源性为８５．７％－９９．３％，推导的氨基酸序列同源性为 ８９．５％－９８．８％，其中 ＮＤＶ四平株与标准强毒 Ｆ４８Ｅ８同源关系最近，核苷酸同源性为 ９９．３％，推导的氨基酸同源性为 ９８． ８％。
- 丁壮金宁一王兴龙金扩世李太元吕杰米志强夏志平殷震
- 关键词：新城疫病毒强毒株HN基因同源性分析
- NDV长春株生物学特性及与国外毒株HN蛋白基因的同源性比较被引量：4
- 2000年
- 以新城疫病毒 ( NDV)长春株接种 9日龄 SPF鸡胚增殖后 ,进行了蚀斑纯化 (三代 )鉴定 ,差数、蔗糖密度梯度离心提纯和生物学特性鉴定。结果表明 ,该病毒的鸡胚平均致死时间 ( MDT)大于 1 6 8h,雏鸡脑内致死性 ( ICPI)为 0 .2 5,雏鸡静脉致死性 ( IVPI)为 0 ,血凝解脱时间超过 1 2 0 h,血凝素热稳定性 56℃ 5min仍具有血凝活性。系统发育进化树分析表明 ,NDV长春株与 La Sota株亲缘关系最近 ,为弱毒株。参考多株 NDVHN基因序列设计了 1对特异性引物 ,应用 RT-PCR一次性扩增出 NDV长春株的全长 HN基因。将该 HN基因插入 p KS( -)后 ,进行了序列测定。序列分析表明 ,该 HN基因核苷酸长度为 1 731 bp,编码 577个氨基酸 ,序列中有 5个糖基化位点 ,1 2个半胱氨酸残基 ,与国外发表的 NDV毒株序列相符 ,核苷酸同源性为88.1 %～ 98.8% ,推导的氨基酸同源性为 91 .1 %～ 98.8%。
- 丁壮金宁一王兴龙金扩世李太元吕杰米志强夏志平殷震
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白基因同源性比较
