国家自然科学基金(30772086)
- 作品数：12 被引量：39H指数：4
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- 异氟烷麻醉对发育期大鼠神经元凋亡及远期学习记忆的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察异氟烷麻醉对发育期大鼠神经元凋亡及远期学习记忆能力的影响,明确两者的关系。方法 7日龄SD大鼠32只,随机分为对照组(C组)和异氟烷麻醉组(A组)。A组大鼠在35℃恒温下1.5%异氟烷麻醉6 h,C组自主吸入空气6 h。每组取3只大鼠,行动脉血气分析。每组各另取3只大鼠用免疫组织化学法检测大脑皮层activeCaspase-3阳性神经元,计算阳性率。其余大鼠继续饲养至出生后60 d,行Morris水迷宫实验。后用免疫组织化学法检测大脑NeuN表达,比较两组大鼠皮层神经元密度。结果两组大鼠动脉血气分析结果差异无统计学意义。A组大鼠皮层active Caspase-3阳性神经元数量明显多于C组(P<0.05)。水迷宫实验结果显示,两组大鼠在寻台潜伏期、目标象限停留时间和穿越平台次数等指标上的差异均无统计学意义。两组大鼠皮层神经元密度相当。结论 1.5%异氟烷麻醉6 h能诱导发育期大鼠皮层神经元凋亡增加,但是对远期学习记忆能力没有影响。
- 施庆余李世勇罗爱林
- 关键词：异氟烷细胞凋亡发育期
- 细胞实验时异氟醚鼓泡给药法的可靠性被引量：4
- 2008年
- 目的评价细胞实验时异氟醚鼓泡给药法的可靠性。方法取直径8．6cm的大培养皿100个，每个大培养皿内置3个直径3．5cm用于细胞培养的小培养皿，大培养皿置于37屯、5％CO2培养箱中。使用ABV—A麻醉机给药，氧气：氮气比为1：4，混合异氟醚后（鼓泡气），经人工鼻过滤，接21G针头置于大培养皿中央底部持续鼓泡，气体流量与培养液容积比例为0．25L／min：80ml。按鼓泡气异氟醚浓度将大培养皿随机分为10组（n=10），Ⅰ组-Ⅷ组鼓泡气异氟醚浓度分别为0．2％、0．4％、0．8％、1．6％、2．0％、2．4％、3．2％和4．0％；Ⅸ组鼓泡气内未混合异氟醚；Ⅹ组未通人气体。Ⅰ组～Ⅷ组分别于鼓泡通气5、10、15、30、60和120min时（T1-6）于小培养皿的底部取细胞培养液7ml，采用气相色谱法测定异氟醚浓度。结果与T3时比较，Ⅰ组～Ⅷ组T1，2时异氟醚浓度降低（P〈0．05），T4-6时差异无统计学意义（P〉0．05）；异氟醚浓度（Y）与鼓泡气异氟醚浓度（X）直线回归方程为Y=1．5652X-0．1252。结论细胞实验时鼓泡给药法可提供稳定、可靠的异氟醚浓度。
- 向强陈映红陈罡谭蕾赵以林罗爱林
- 关键词：异氟醚
- 氯胺酮对新生大鼠海马CREB磷酸化水平的影响被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨氯胺酮对新生大鼠海马环磷腺苷反应元件结合蛋白（CREB）磷酸化水平的影响.方法 SD大鼠75只,日龄7 d,雌雄不拘,随机分为对照组（C组）、氯胺酮10 mg/kg组（K1组）和氯胺酮20 mg/kg组（K2组）,每组25只.K1组和K2组分别皮下注射氯胺酮10、20 mg/kg,C组注射等容量生理盐水,每间隔90 min注射1次,共注射7次.于首次注射后24 h时断头取脑,分离海马,采用TUNEL法检测凋亡神经元,计算凋亡指数;免疫荧光双标法检测p-CREB表达水平;RT-PCR法半定量检测CREB下游基因BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达水平;于首次注射后6周时采用Morris水迷宫实验测定各组大鼠认知功能.结果 与C组相比,K1组和K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调（P〈0.05）;与K1组相比,K2组大鼠海马神经元凋亡指数升高,p-CREB、BDNF mRNA及Bcl-2 mRNA表达下调（P〈0.05）;与C组和K1组相比,K2组逃避潜伏期延长（P〈0.05）.结论 氯胺酮10、20 mg/kg均可诱导发育期大鼠海马神经元凋亡,而氯胺酮20 mg/kg可导致大鼠发育成熟后认知功能降低,可能与其抑制CREB磷酸化后BDNF及Bcl-2表达下调,导致神经元凋亡,影响大鼠神经系统发育有关.
- 谭蕾罗爱林赵已林向强
- 关键词：氯胺酮海马CAMP反应元件结合蛋白
- 氯胺酮对大鼠海马神经元CREB磷酸化水平的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨氯胺酮对大鼠海马神经元cAMP反应元件结合蛋白（CREB）磷酸化水平的影响。方法原代培养1d龄SD大鼠海马神经元5d，随机分为对照组（C组）和氯胺酮组（K组），每组6孔。K组在终浓度为1000μmol／L氯胺酮的Neurobasel培养液中孵育3h，C组不做任何处理。采用流式细胞仪Annexin V—PI共染法检测凋亡神经元，计算神经元凋亡率；采用免疫组化法测定神经元ser-133位点磷酸化的CREB（pCREB）表达水平；采用RT-PCR法半定量测定CREB下游基因脑源性生长因子（BDNF）mRNA和抑凋亡基因Bcl-2mRNA的表达。结果与C组相比，K组神经元凋亡率升高，pCREB、BDNF mRNA及Bcl-2mRNA的表达均下调（P〈0．01）。结论氯胺酮可能通过抑制CREB磷酸化，下调BDNF及Bcl-2表达，诱导新生大鼠海马神经元凋亡。
- 谭蕾罗爱林王金韬罗辉宇施庆余
- 关键词：氯胺酮海马神经元CAMP反应元件结合蛋白
- 褪黑激素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨褪黑激素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响。方法原代培养孕16—18dSD大鼠胎鼠海马神经元5d，采用随机数字表法，将神经元随机分为5组（n=6）：对照组（C组）、氯胺酮组（K组）和不同浓度褪黑激素组（M。组，浓度分别为1．0、2．5和5．0mmol／L），K组加入氯胺酮（终浓度为1000μmol／L）孵育3h，M1-3组给予氯胺酮前60min时加入褪黑激素，使各组褪黑激素浓度分别为1．0、2．5、5．0mmol／L，C组加入等量生理盐水。采用MTY法检测发育期神经元活性，流式细胞仪检测线粒体膜电位（ψm），Westernblot法测定cAMP反应元件结合蛋白[p-CREB（Serl33）]、Bcl．2、Bax、细胞色素C表达。结果与C组相比，K组神经元活性降低，神经元线粒体膜电位（ψm）明显降低（P〈0．05），p-CREB（Serl33）和Bcl．2表达下调，Bax和细胞色素c表达上调（P〈O．05）；与K组相比，M2和M3组神经元ψm升高，M1-3组神经元活性增加，Bcl-2表达上调，Bax和细胞色素c表达下调（P〈0．05），p-CREB（Serl33）表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论褪黑激素通过调节Bcl-2和Bax表达，稳定ψm，抑制线粒体内细胞色素c释放，阻止凋亡复合体的形成，进而抑制氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡。
- 李世勇赵以林杨柳陈晔凌蔡放王金韬罗爱林
- 关键词：褪黑激素氯胺酮海马神经元
- 米诺环素对异氟醚诱导的发育期大鼠神经元毒性的保护作用被引量：4
- 2011年
- 目的观察米诺环素对异氟醚诱导的发育期大鼠神经元毒性的保护作用。方法取新生SD大鼠皮层,随机分为四组,每组10只。正常对照组(C组)神经元在37℃空气处理6 h,异氟醚麻醉组(A组)神经元在37℃下用1.5%异氟醚处理6 h,米诺环素1μmol/L组(M1组)和米诺环素10μmol/L组(M2组)神经元分别在异氟醚处理10 min前加入米诺环素1μmol/L、10μmol/L。相差显微镜下观察四组神经元形态,TUNEL法检测神经元凋亡,MTT法检测神经元活性。结果 A组神经元胞体肿胀、变形且与M1组神经元形态接近;M2组神经元形态改变不明显且与C组相近。MTT结果显示,与C组、M2组相比,A组、M1组神经元活性显著降低(P<0.05),凋亡神经元数目显著增多(P<0.05)。结论米诺环素能减轻异氟醚诱导的发育期大鼠神经元毒性,具有保护作用。
- 施庆余罗爱林李世勇赵以林
- 关键词：米诺环素异氟醚神经毒性
- CREB磷酸化在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元凋亡中的作用
- 目的:探讨CREB磷酸化在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元凋亡中的作用。方法:将原代培养第5天大鼠海马神经元分为两组:对照组C组以及实验组K组(与含1000μmol/L氯胺酮培养基共培养3 h),以Annexin-V加PI...
- 谭蕾罗爱林王金韬罗辉宇施庆余
- 关键词：氯胺酮海马神经元CAMP反应元件结合蛋白脑源性神经生长因子
- 文献传递
- 吸入性全身麻醉药对发育期神经元的电生理功能影响的研究进展被引量：2
- 2011年
- 临床常用吸入性全身麻醉药异氟烷、七氟烷和地氟烷等均能增强机体对外源性氨酪酸(GABA)的电反应,通过GABAA发挥生物学效应。而在发育期神经元电生理功能具有阶段特异性:GABAA受体介导的氯离子外流引起神经元去极化;α氨基羟甲基唑丙酸受体尚无完整功能,N甲-基-D-天冬氨酸受体的激活依赖GABAA受体,在神经元突触形成方面起着重要的作用。此外,氯离子引导的除极还可以激活细胞膜上电压依赖性钙通道引起钙内流。发育期神经元电生理特点使其在生长发育过程中容易受到吸入性全身麻醉药的影响。
- 赵以林罗爱林
- 关键词：GABAA受体电生理
- 吸入麻醉药作用的新靶点--双孔钾通道被引量：1
- 2011年
- 背景 尽管吸人麻醉药在临床上应用已久，但其作用的分子机制不是很清楚。双孔钾离子通道（two pore potassium channels，K2P）足新发现的钾通道超家族的一员，它被认为是吸入麻醉药敏感性钾通道的分子基础。目的 综合K2P通道相关文献，阐述K2P通道在吸入麻醉药作用机制中的研究进展。内容 简要概述K2P通道结构、功能及分类，重点介绍吸人麻醉药敏感性钾通道作为吸人麻醉药作用靶点的实验室依据。趋向 通过进一步阐释K2P通道在吸入麻醉药伞身麻醉中的作川，有且力于阐明吸人麻醉药分子作用机制和开发作用于K2P的新麻醉药物。，
- 李世勇罗爱林
- 关键词：麻醉药双孔钾通道作用靶点
- 氯胺酮、咪达唑仑及丙泊酚对发育期神经元细胞内钙的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨氯胺酮、咪达唑仑及丙泊酚对大鼠发育期海马神经元细胞内钙浓度的影响.方法:将原代培养第5日的大鼠海马神经元用10μmol/L的Ca2+指示剂Fluo-4共孵育30 min洗涤后,分别加入150μmol/L氯胺酮,咪达唑仑3μmol/L,丙泊酚10μmol/L,采用激光共聚焦显微镜选定多个细胞分别测定荧光强度的变化.结果:氯胺酮使体外培养第5日的海马神经元代表钙浓度的荧光强度明显下降[(987±307)vs(766±226),P<0.05],咪达唑仑,丙泊酚均使体外培养5 d的海马神经元荧光强度明显升高[(1707±514)vs(2663±572),(1057±353)vs(1749±708),P<0.05].结论:阻滞NMDA受体的氯胺酮降低发育期海马神经元细胞内钙浓度,而兴奋GABAA受体的咪达唑仑,丙泊酚则会升高细胞内钙浓度.
- 谭蕾罗爱林向强赵以林何璇
- 关键词：氯胺酮咪达唑仑丙泊酚钙离子浓度
