海口市重点科技计划项目(2012078)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：马燕琳黄元华赵星蒋伟民刘鸿燕更多>>
- 相关机构：海南医学院附属医院郑州大学第一附属医院贵阳中医学院更多>>
- 发文基金：海口市重点科技计划项目国家重点基础研究发展计划海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚胎干细胞建株与维持培养条件的优化被引量：4
- 2014年
- 人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESCs)是早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,它具有无限增殖、自我更新和全能分化的特性。无论在体内还是体外环境,人胚胎干细胞都能分化为机体几乎所有类型的细胞。基于其全能分化性,胚胎干细胞成为治疗各种退行性疾病的理想细胞来源。然而,在目前培养条件下所建立的胚胎干细胞株,仍然存在动物源性物质潜在污染的问题。因此,更优化的建株及培养条件十分重要。
- 蒋伟民黄元华马燕琳
- 关键词：内细胞团饲养层细胞
- 诱导多能干细胞与细胞重编程技术的研究与未来被引量：6
- 2013年
- 背景:目前重编程技术的快速发展为干细胞的研究提供了广泛的前景。诱导多能干细胞避免了胚胎干细胞在研究及应用过程中面临的伦理问题,通过重编程技术可以获得患者特异性诱导多能干细胞和疾病特异性诱导多能干细胞,显著减少了免疫排斥反应。然而重编程技术还存在一些难题:如效率低、安全问题等。目的:以诱导多能干细胞特点及重编程的基本原理为出发点,从细胞来源、载体、转录因子、microRNA、信号转导通路等5个方面,论述重编程技术的研究进展。方法:以"重编程,诱导多能干细胞,信号转导通路,表观遗传,microRNA,转录因子,载体,体细胞,小分子化合物,安全性"为中文检索词,"reprogramming,induced pluripotent stem cell,signal transduction pathway,epigenetics,microRNA,transcription factor,vector,somatic cell,small molecule compound,safety"为英文检索词,应用计算机检索维普(VIP)期刊全文数据库、万方全文数据库、中国知网全文数据库、PubMed数据库、Springer数据库1990年1月至2013年4月有关诱导多能干细胞与细胞重编程技术的文献,排除与研究目的无关及重复性研究,保留67篇文献进一步分析。结果与结论:通过尝试运用不同种类的细胞、载体、转录因子、microRNA或抑制信号转导通路,重编程效率有所提高,安全问题有所改善。但目前这些技术难题仍然未被解决,诱导多能干细胞仍不能用于临床。要实现诱导多能干细胞在临床上的应用,必须进一步明确重编程的机制,优化重编程策略。
- 赵星黄元华马燕琳
- 关键词：干细胞重编程诱导多能干细胞信号转导通路表观遗传小分子化合物
- 两种培养条件下人胚胎干细胞生长状况的比较
- 2013年
- 目的:比较胚胎干细胞株在两种不同培养体系下生长状况,验证两种不同培养体系对于人胚胎干细胞全能性的维持与延续。方法:将人类胚胎干细胞株分别接种于传统的培养体系以及mTESR1的培养体系,观察在不同培养体系下人类胚胎干细胞状态及克隆形态之间的差别。对生长于不同培养体系下的胚胎干细胞进行碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色以及用RT-PCR的方法检测人胚胎干细胞全能性。结果:生长在传统培养体系中的胚胎干细胞,细胞克隆薄且扁平,与周围的饲养层细胞边界清晰,克隆中心的细胞容易出现分化。单个胚胎干细胞核质比高,核仁明显。生长mTESR1体系中的胚胎干细胞,细胞克隆较传统培养体系下的大,呈单层细胞生长,细胞排列紧密,单个胚胎干细胞的细胞核大,核仁明显,核质比高。生长在不同培养体系下的人胚胎干细胞碱性磷酸酶染色均呈现阳性,免疫荧光染色及RT-PCR均验证了细胞的全能性。结论:两种不同培养体系均能维持胚胎干细胞的全能性。mTESR1培养条件更加简便,能更清楚观察与分析单个细胞的形态,适合人胚胎干细胞的维持培养。
- 蒋伟民赵星李崎张宇周知马宁李林江徐雯卢伟英黄元华马燕琳
- 关键词：人胚胎干细胞饲养层细胞MATRIGEL
- 人多能干细胞的冷冻与保存被引量：1
- 2014年
- 背景:人多能干细胞的出现与发展是近年来生物医学研究领域的重大突破。但其在基础/临床研究中的广泛应用还有诸多限制,建立安全有效标准化的冷冻保存方案是人多能干细胞广泛应用面临的重大挑战。目的:回顾人多能干细胞冷冻领域的研究进展,探索造成冷冻损伤的原因和机制及改进方式,致力于促进新的更有效的冷冻方案形成。方法:以"人多能干细胞、人胚胎干细胞、人诱导多能干细胞、玻璃化、程序化冷冻、慢冻法、冷冻保存"为中文检索词,以"human pluripotent stem cells,human embryonic stem cell,human introduced pluripotent stem cell,vitrification,programmed cryopreservation,slow-freezing,cryopreservation"为英文检索词,应用计算机检索中国知网全文数据库、万方全文数据库、维普(VIP)期刊全文数据库、PubMed数据库有关人多能干细胞冷冻保存技术的文献,排除与研究目的无关及重复文献,保留58篇文献进一步总结分析。结果与结论:了解人多能干细胞冷冻过程中造成冷冻损伤的原因和机制,是寻找高效的冻存方案的关键。需要更清晰的了解冷冻过程中损伤的原理,改进和创新低温生物技术来避免各种冷冻损伤的发生并致力于探讨可重复的,高效的,符合GMP要求的,能大规模冻人多能干细胞的方案。
- 刘鸿燕黄元华马燕琳
- 关键词：冷冻保存技术多能干细胞冷冻损伤人胚胎干细胞PUBMED冷冻过程
