国家自然科学基金(30972895)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- 体内基因转染技术在肝再生研究中的应用
- 2012年
- 肝脏是一个特殊的器官,不仅因为它独特的解剖结构和生理特征,而且它还具有无限的再生能力。在各种动物模型中,应用病毒或非病毒载体将肝细胞生长因子等基因转入体内,能增强肝再生能力,这就是肝脏基因转染技术在肝再生研究中的应用。未来的研究目标就是消除病毒载体的毒副作用和增加非病毒载体的转染率,这也是目前肝内基因转染技术中面临的主要难题;另一个研究目标就是用受体介导基因靶向肝转染,使转入基因在肝细胞中特异高表达。这些研究成果将有助于肝再生基因机制研究,以及将来临床基因治疗提供参考。
- 王保林陈平
- 关键词：基因转染肝再生
- 染色体结构维持蛋白4在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2010年
- 目的研究染色体结构维持蛋白4(SMC4)在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2009年9月-2010年1月原发性肝癌组织和正常肝脏组织各36份,原发性肝癌患者和健康人血清各36份,通过免疫组化、酶联免疫吸附实验分别检测原发性肝癌组织、正常肝脏组织及血清中SMC4蛋白的表达情况,分析检测结果及其与临床参数之间的关系。结果 SMC4在原发性肝癌组织中呈较强染色,其中88.9%(32/36)的肿瘤组织表达阳性,仅11.1%(4/36)的肿瘤组织表达呈阴性,而在正常肝脏组织中未见其染色反应,阴性表达率100%(36/36)。原发性肝癌患者血清中SMC4浓度(255.75±26.59ng/L)远高于健康人(205.89±18.55ng/L,P<0.05)。统计学分析显示,SMC4的表达与患者肿瘤组织的细胞分化、TNM分期及血管浸润相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别无关(P>0.05)。结论 SMC4在原发性肝癌患者中表达增高,测定其水平有助于原发性肝癌的诊断,并可作为判断肿瘤恶性程度和预后的重要指标。
- 周波陈平袁涛刘宏鸣刘孟刚王晓枫
- 关键词：肝肿瘤免疫组织化学酶联免疫吸附测定
- 慢病毒介导的大鼠肝BRL-3A细胞Tmub1基因沉默及稳定感染细胞系的建立
- 2012年
- 目的:构建Tmub1基因慢病毒干扰载体,建立稳定转染细胞系,检测大鼠肝BRL-3A细胞中Tmub1基因表达的干扰效果。方法:设计并构建4对针对大鼠Tmub1基因的特异性shRNA干扰质粒,酶切鉴定、DNA测序所得质粒。将由pRSV-Rev、pMDLg-pRRE、pMD2G和pll3.7干扰质粒组成的包装系统共转染293T细胞,产生慢病毒。所得慢病毒感染大鼠正常肝细胞BRL-3A,Western Blot检测不同靶点RNAi后Tmub1蛋白表达情况,确定有效靶点。针对有效靶点大量包装慢病毒。测定病毒滴度并以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染BRL-3A细胞后,G418抗生素筛选稳定感染细胞系BRL-3A/256。RT-PCR和Western Blot检测各组细胞Tmub1 mRNA和蛋白质的表达差异。结果:结果显示Tmub1 RNAi慢病毒载体构建成功,C0020Sh2-Hops-256干扰靶点RNAi效果最强。成功包装Tmub1基因RNAi慢病毒,测定病毒滴度为2.3×108TU/ml,对293T细胞的最适感染复数为60。成功建立Tmub1 RNAi慢病毒载体稳定感染细胞系BRL-3A/256,且在该细胞系中Tmub1 mRNA和蛋白质表达明显降低。结论:成功构建Tmub1 RNAi慢病毒载体,有效干扰BRL-3A细胞中Tmub1 mRNA和蛋白表达;成功筛选出Tmub1RNAi慢病毒稳定感染细胞系BRL-3A/256。
- 王晓枫刘孟刚刘宏鸣周波王宝林陈红旭陈平
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体
- 利用基因芯片重注释筛选肝细胞肝癌术后复发相关lncRNA被引量：2
- 2017年
- [目的]利用基因芯片重注释寻找肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)术后复发相关lncRNA(long non-codingRNA)。[方法]首先利用生物信息的方式重新注释35/41例复发/未复发HCC病例的基因表达谱数据,筛查与HCC术后复发相关的差异表达lncRNA。然后利用ROC曲线评价差异lncRNA的术后复发预测效能。最后利用基因共表达网络与功能富集分析探究差异lncRNA具体的生物学功能。[结果]差异表达分析发现3个lncRNA(LINC00342,LINC00607,LINC01553)显著差异表达[|log(fold change)|>1,q value<0.05]。ROC曲线分析发现该3个差异lncRNA的AUC值为0.693。基因共表达网络分析发现LINC00342相关共表达网络显著富集到"细胞周期"相关功能;LINC00607相关的共表达网络中基因主要富集到"炎症反应"与"免疫反应"相关的生物学功能与通路;LINC01553相关的共表达网络中基因主要富集到"DNA复制与修复"相关的生物学功能与通路。[结论]3个lncRNA与HCC术后复发显著相关,可作为一种潜在的诊断标志物组合,值得进一步的挖掘与研究。
- 曾玮陈平
- 关键词：肝细胞肝癌术后复发预后
