国家自然科学基金(30972898)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：姜涛朴大勋王博吴河水王宁更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学哈尔滨工业大学华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过继免疫治疗中DC-CIK的研究进展被引量：6
- 2015年
- 目前,免疫细胞生物学和免疫分子生物学发展迅猛,由于其具备低毒性和高效率的特性,肿瘤免疫治疗在恶性肿瘤治疗中所起的作用引起了学者们的广泛关注,其中细胞介导的过继免疫治疗为当前研究的热点之一。过继免疫治疗(adoptive cellular immunotherapy,ACI)是目前恶性肿瘤治疗的新方向,它通过向细胞免疫功能低下者回输具有抗肿瘤活性的免疫细胞,直接杀伤或间接杀伤肿瘤细胞,使其获得抗肿瘤免疫力。树突状细胞(Dendritic cell DC)是专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell APC)之一,在机体免疫应答的启始、调节、维持中发挥核心作用。细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer CIK)细胞具有高效的MHC非限制性溶瘤活性,具有极其广泛的杀瘤范围。近年来,国内外大量研究表明,联合培养的DC-CIK抗肿瘤活性提升明显,患者预后生存期延长,效果显著。本文就DC与CIK生物学特点及抗肿瘤作用予以简要综述。
- 王宁宋述安侯国伟姜涛朴大勋
- 关键词：过继免疫治疗树突状细胞恶性肿瘤
- 腺病毒载体介导PDX1在人脐带间充质干细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建含胰十二指肠同源框-1基因（pancreatic and duodenal homeobox factor 1，PDX1）的重组腺病毒载体，并检测其在人脐带间充质干细胞（human umblic cord msenchymal stem cells，HUCM—SCs）的表达情况。方法用BglII／XhoI酶从pUC57-PDX1酶切PDX1，连接到pShuttle—GFP—CMV重组穿梭载体，得到pShutde—GFP—CMV—PDX1重组穿梭质粒，再将pShuttle—GFP—CMV—PDX1转移到pAdxsi载体上，得到pAdxsi—GFP—PDX1病毒质粒，利用脂质体介导重组腺病毒载体转染293细胞，包装出完整的腺病毒。用重组腺病毒感染HUCMSCs 24h后，经荧光显微镜、RT-PCR、免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等检测PDX1基因及蛋白的表达。结果通过测序、酶切等鉴定PDX1基因正确插入穿梭质粒中，并与病毒骨架质粒重组，重组腺病毒可高效转染HUCMSCs，RT—PCR检测到PDX1 mRNA在HUCMSCs中表达，经免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等证实转染PDX1在HUCMSCs胞核中表达。结论成功构建了PDX1腺病毒载体，并在HUCMSCs中有效表达。
- 王博毛明刚吴汉青吴河水万赤丹王春友
- 关键词：间充质干细胞穿梭载体腺病毒载体
- TLR4 shRNA质粒的构建及稳定转染人胰腺癌PANC1细胞株的筛选
- 2012年
- 目的构建靶向人TLR4基因的短发夹RNA（shRNA）真核表达质粒，转染胰腺癌细胞，并筛选出稳定转染的克隆细胞株。方法采用小分子干扰RNA（siRNA）软件设计3个靶向TLR4基因的shRNA，构建3个质粒表达载体，分别命名为TLR4-1、TLR4-2、TLR4—3；选取抑制效率最高的shRNA质粒，采用脂质体法转染胰腺癌PANC1细胞；实时定量PCR和流式细胞技术检测细胞TLR4shRNA基因沉默效率和转染效率；G418抗性筛选和有限稀释单克隆形成法挑选培育稳定转染TLR4shRNA的单克隆细胞系。结果转染48h后PANC1细胞瞬时转染效率为（46．72±5．06）％。转染_rLR4．1、TLR4-2、TLR4—3的细胞的TLR4mRNA表达水平分别为0．025±0．004、0．027±0．003、0．019±0．006，均显著低于未转染组的0．061±0．018和阴性对照转染组的0．057±0．015（P值均〈0．05）。以沉默效果最佳的TLR4—3转染细胞所获得的稳转细胞的转染效率为（82．79±8．16）％，较瞬转细胞显著提高（P=0．001）；TLR4mRNA表达水平为0．010±0．002，较瞬转细胞显著下调（P：0．001）；TLR4蛋白表达率为（0．54±0．32）％，显著低于未转染细胞的（87．42±5．00）％和转染阴性对照细胞的（82．90±5．00）％（P=0．000）。结论成功筛选到TLR4基因沉默的稳转PANC1细胞。
- 张建军王博田元张景辉吴河水
- 关键词：胰腺肿瘤TOLL样受体4转染
- 直肠间质瘤临床病理学及外科治疗的研究进展被引量：2
- 2016年
- 胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)是消化道最常见的间叶组织来源的肿瘤,其标志性地表达KIT蛋白(CD117),目前研究认为KIT或PDGFRα(血小板源性生长因子-α,platelet derived growth factor alpha)基因突变导致了GISTs的发生。直肠间质瘤发病率非常低且多为偶然发现,但其多数属于高危组、易复发和转移。外科手术是治疗间质瘤的最主要方式,但酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)的出现,使无法切除或者转移性GISTs的治疗方式发生了革命性的变化。GISTs的诊治需要包括外科、肿瘤科、病理科以及放射科等多学科协助共同完成,首先对疾病进行初期评估,术前术后的管理,而后对预后进行随访。通过术前的靶向治疗进行减瘤,优化手术的时机,术后TKIs规范化治疗,从而提高患者的生存率,延长其生存时间。本文对直肠间质瘤临床病理学及外科治疗的研究进展进行综述。
- 赵志威朱琳姜涛荆琼优王剑冰朴大勋
- 关键词：直肠间质瘤PDGFRΑ病理学靶向治疗
- 单倍体异基因淋巴细胞输注在小鼠移植物抗宿主病和移植物抗肿瘤效应中的意义被引量：4
- 2014年
- 目的建立小鼠免疫耐受模型，探讨单倍体异基因淋巴细胞输注在小鼠移植物抗宿主病（GVHD）和移植物抗肿瘤（GVT）效应中的意义。方法64只BALB／C雌性小鼠按随机数字表法分为4组，每组16只。对照组：实验第4天接种肿瘤细胞（小鼠大肠癌CT26细胞株配制成1×10^7／mL的瘤细胞悬液，接种到雌性小鼠右腋皮下）后不予任何特殊处理；化疗组：实验第4天接种肿瘤细胞，第7天开始化疗；供体淋巴细胞输注（DLI）组：实验开始时进行预处理，第4天接种肿瘤细胞，第13、15、17天输注单倍体异基因淋巴细胞（雄性BALB／C小鼠制备的脾淋巴细胞）；化疗＋DLI组：实验开始时进行预处理，第4天接种肿瘤细胞，第7天开始化疗，第13、15、17天输注单倍体异基因淋巴细胞。预处理方案为输注单倍体异基因淋巴细胞＋环磷酰胺＋输注单倍体异基因淋巴细胞。化疗方案为小鼠接种肿瘤细胞后第3天给予环磷酰胺腹腔化疗。每日观察各组小鼠临床GVHD的指标，并给予临床评分。观察荷瘤鼠肿瘤生长情况，计算接种成功后首日到小鼠死亡的时间和肿瘤质量，计算抑瘤率。应用流式细胞仪检测各组小鼠外周静脉血中T细胞数量，接种后15d各组处死3只小鼠取瘤体制作成观察切片，HE染色后光镜观察。多组比较采用方差分析，组间比较采用LSD—t检验。结果化疗＋DLI组的小鼠GVHD临床表现轻于其他组小鼠。对照组、化疗组、DLI组、化疗＋DLI组GVHD评分分别为（2．3±0．6）分、（1．5±1．1）分、（6．7±0．9）分、（3．4±0．5）分，4组比较，差异有统计学意义（F=148．68，P〈0．05）。4组小鼠全部接种CT26细胞成功。对照组、化疗组、DLI组、化疗＋DLI组小鼠肿瘤质量分别为（3．40±0．20）g、（0．80±0．10）g、（2．20±0．20）g、（0．50±0．30）g，4组比较，差异有统计学意义（F=149．1
- 张哲男龚海东宋述安姜涛朴大勋
- 关键词：肿瘤移植物抗宿主病淋巴细胞输注移植物抗肿瘤效应
- 腹腔镜辅助直肠癌根治术被引量：1
- 2016年
- 中央入路于乙状结肠系膜内侧切开后腹膜,解剖Toldt’s间隙,分别向左、向尾侧、向头侧进一步游离、扩大该间隙,显露并注意保护左侧输尿管、左侧生殖血管。充分游离Toldt’s间隙后,放入小纱布以作标记。提起肠系膜下血管根部系膜组织,彻底分离清扫肠系膜下动脉根部淋巴脂肪组织。夹闭、切断肠系膜下动脉,注意保护生殖神经。向下游离,首先游离后方的直肠后间隙和前方的邓氏间隙,然后离断直肠侧韧带。最后按腹腔镜下全直肠系膜切除法+双吻合器法切除直肠肿瘤及重建肠道。
- 朱安龙朱跃坤刘天佑官文龙
- 关键词：直肠肿瘤肠系膜下动脉
