国家自然科学基金(30971329)
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
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- 脯氨酸羟化酶在缺血缺氧性疾病治疗中的研究进展被引量：1
- 2013年
- 低氧诱导因子（hypoxia—induciblefactor，HIF）是细胞低氧应答反应中的核心因子，通过对下游靶基因的调节维持氧稳态。脯氨酸羟化酶（prolylhydroxylases，PHDs）和天冬酰胺酰羟化酶自身催化活性受细胞内氧浓度的调节被称为细胞氧感受器。它们通过调节HIF的稳定性和转录活性参与调控氧供与氧耗、能量代偿与能源补充、氧顺应性与缺氧耐受力等代谢保护机制。缺血缺氧性疾病是一类以氧的供需失衡为特点的疾病，研究发现抑制PHDs可加强HIF信号通路，在缺血缺氧性疾病的治疗和愈后中发挥作用。
- 周芳戴爱国蒋永亮胡瑞成朱黎明
- 关键词：低氧诱导因子缺血缺氧性疾病低氧
- 多种翻译后修饰对低氧诱导因子-1α稳定性调控的机制被引量：7
- 2011年
- 低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是组织细胞对缺氧感应和调控的一类关键转录因子,在机体中广泛表达.作为细胞低氧应答反应中的重要调节因子,HIF-1能够调节100多种涉及低氧应激下细胞适应和存活的靶基因.HIF-1是由氧依赖的α亚基和细胞内稳定表达的β亚基构成的异源二聚体.其中α亚基对氧浓度变化敏感,是HIF-1的功能性亚基,它的表达活性决定了HIF-1的生物学活性.近期研究发现,HIF-1α的一系列翻译后修饰可改变其稳定性,进而调控其转录激活活性,从而参与肿瘤、低氧性肺动脉高压以及心血管疾病等的发生与发展.本文主要就HIF-1α的一列系翻译后修饰,如羟基化、泛素化、磷酸化、乙酰化、SUMO化修饰作一综述.
- 王静戴爱国
- 关键词：低氧诱导因子-1Α翻译后修饰缺氧乙酰化
- Siah1对大鼠低氧性肺动脉高压发病的调控机制被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨Siah1对大鼠低氧性肺动脉高压（HPH）发病的调控机制.方法 40只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为对照组和低氧3、7、14、21 d组,每组8只,常压间断低氧复制HPH大鼠模型,对照组大鼠常氧下饲养.测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、右室肥厚指数（RVHI）、管壁面积与血管总面积比值（WA％）、管腔面积与血管总面积比值（LA％）;原位杂交检测肺内低氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF） mRNA相对表达量,免疫组化检测其蛋白质相对表达量;原位杂交、逆转录-PCR检测肺内低氧诱导因子抑制因子（FIH）、Siah1 mRNA相对表达量,免疫组化、Western印迹法检测其蛋白质相对表达量.结果 低氧7d组mPAP、WA％、LA％显著高于对照组[（21.3±1.6） mmHg比（15.9 ±1.3）mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）、（41.4±2.8）％比（35.0±2.2）％、（58.6±2.8）％比（65.0±2.2）％,均P＜0.05],低氧14 d组达高水平并维持.低氧14d组RVHI显著高于对照组[（27.0±1.8）％比（23.2±2.1）％,P＜0.05].低氧14 d组HIF-1αmRNA相对表达量显著高于对照组[（0.188 ±0.014）比（0.150 ±0.014）,P＜0.05];低氧3d组HIF-1α蛋白相对表达量显著高于对照组（0.186±0.014比0.067±0.008,P＜0.05）.低氧7d组VEGFmRNA、蛋白相对表达量显著高于对照组（0.152±0.019比0.057±0.007、0.176±0.017比0.083±0.010,均P＜0.05）.FIH mRNA表达在低氧后无显著变化,低氧7d组FIH蛋白相对表达量显著低于对照组（0.166 ±0.015比0.200 ±0.017,P＜0.05）.低氧7d组Siah1 mRNA、蛋白表达均显著高于对照组（0.144 ±0.014比0.067 ±0.010、0.136±0.017比0.084±0.019,均P＜0.05）.HIF-1α蛋白与VEGF mRNA、VEGF蛋白表达均呈正相关（r=0.545、0.523,均P＜0.01）;FIH蛋白与VEGFmRNA、VEGF蛋白表达均呈负相关（r=-0.785、-0.788,均P＜0.01）;Siah1 mRNA与Siah1蛋白表达呈正相关（r =0.823,P＜0.01）;Siah1蛋白与FIH蛋白表达呈�
- 符代炎戴爱国胡瑞成田华陈云荣朱黎明
- 关键词：高血压肺性缺氧诱导因子1
- 原代大鼠肺动脉平滑肌细胞的提取和鉴定以及缺氧对其增殖的影响被引量：14
- 2012年
- 目的提取SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)并原代培养,为研究肺血管疾病提供体外模型,研究缺氧对大鼠PASMCs增殖的影响。方法组织贴壁法分离大鼠PASMCs,光镜观察细胞形态、透射电镜、α肌动蛋白(α-SM-actin)细胞免疫化学和细胞免疫荧光法进行鉴定。原代培养的PASMCs分别于常氧和/或低氧下培养2、6、12、24及48 h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和增殖细胞核抗原(PCNA)细胞免疫化学法检测细胞增殖情况。结果光镜下PASMCs细胞为长梭形,呈典型的"峰-谷"状结构。免疫学检测显示胞浆被染成棕黄色,阳性率达96%以上。透射电镜下细胞呈长梭形,胞浆内有密斑、密体和大量肌丝,细胞器较少。MTT检测结果示各时间点缺氧组PASMCs吸光度(A值)均高于相对应的常氧组;与常氧组比较,低氧组A值在12 h时开始增加(P<0.05),24 h时增加最显著(P<0.01)。与缺氧2 h组比较,A值在缺氧12 h开始增高(P<0.05),缺氧24 h增高最显著(P<0.01),而缺氧48 h与缺氧24 h基本一致。PCNA免疫学结果与MTT结果基本一致。结论用组织块贴壁法提取PASMCs,简单易行,且能得到纯度高、稳定生长的PASMCs。缺氧可以促进PASMCs的增殖。
- 王静戴爱国
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞缺氧缺氧性肺动脉高压增殖
- SENP1在大鼠低氧性肺动脉高压形成中肺血管壁中表达及可能作用被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)形成过程中SENP1在肺小动脉的动态表达变化及作用。方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为5组(n=8):对照组和缺氧3 d、7 d、14 d2、1 d组,常压间断低氧复制HPH大鼠模型。测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;原位杂交、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺内SUMO特异性蛋白酶-1(SUMO-specific proteases-1,SENP1)mRNA表达,免疫组化、Westernblot检测其蛋白质水平。结果:①缺氧7 d后,肺小动脉出现血管重塑,且mPAP明显上升;低氧14 d后,肺小动脉重塑更明显,mPAP达高峰。RVHI在低氧14 d后明显增加。②原位杂交显示,SENP1 mRNA在对照组肺小动脉壁呈阳性表达,低氧后其相对量无明显变化。RT-PCR显示肺组织SENP1 mRNA表达与原位杂交所观察到的肺小动脉壁SENP1 mRNA变化趋势一致;SENP1蛋白在对照组呈阳性表达,低氧7 d后其表达量开始呈进行性下降。Western blot显示肺组织内SENP1蛋白表达与免疫组化观察到的肺小动脉壁SENP1蛋白变化趋势一致。③SENP1蛋白与mPAP、重塑指数、RVHI均呈负相关。结论:慢性低氧诱导肺小动脉壁SENP1蛋白降解,进而可能在HPH发病过程中发挥一定的作用。
- 田华戴爱国符代炎胡瑞成朱黎明
- 关键词：低氧
- Siah2负调控脯氨酰羟化酶3表达在大鼠低氧性肺动脉高压中的意义被引量：2
- 2016年
- 目的探讨Siah2及低氧诱导因子(HIF)脯氨酰羟化酶(PHD)3的表达变化趋势在大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义。方法 40只成年雄性SD大鼠随机划分常氧正常组和低氧3 d、7 d、14 d和21 d组,每组8只,常压低氧制作HPH大鼠模型。RT-PCR检测Siah2和PHD3 mRNA表达变化,Western印迹检测上述两指标的蛋白质表达,并分析其表达变化与大鼠HPH的关系。结果常氧正常组Siah2 mRNA表达水平较低,低氧7 d后显著增高(P<0.05),低氧14 d达高峰;常氧正常组及低氧3 d组Siah2蛋白表达亦较低,低氧7 d后显著增高(P<0.05),低氧14 d达高峰。常氧正常组PHD3 mRNA和蛋白质表达均不明显,低氧3 d mRNA明显增高(P<0.05),同时随低氧时间延长其mRNA表达逐渐升高并保持在高水平;PHD3蛋白质低氧3 d明显增高(P<0.05),低氧7 d保持高水平,低氧14 d和21 d下降。相关分析表明,肺小动脉壁Siah2蛋白质表达水平与Siah2 mRNA呈正相关(r=0.87,P<0.01),与PHD3蛋白表达水平呈负相关(r=-0.44,P<0.05)。结论 Siah2与PHD3均在大鼠HPH的发病机制中发挥作用。Siah2可能从蛋白水平下调PHD3的表达水平,导致HPH的发生发展。
- 潘坤戴爱国张泽明陈云荣尹文斌杜宇
- 关键词：低氧性肺动脉高压
- 小泛素蛋白样修饰蛋白1在大鼠低氧性肺动脉高压发病中的作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)形成过程中小泛素蛋白样修饰蛋白1(SUMO-1)在肺内表达的动态变化规律及在HPH发病机制中的作用。方法40只Wistar大鼠随机分为常氧对照组、低氧3d组、低氧7d组、低氧14d组及低氧21d组,每组8只。常压间断低氧暴露复制HPH大鼠模型。检测各组大鼠的平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标[管壁面积/管总面积(WA%)];原位杂交、RT-PCR检测肺内SUMO-1 mRNA表达,免疫组化、Western blot检测其蛋白表达水平。结果低氧7d至21d,大鼠肺小动脉开始出现明显血管重塑并逐渐加重,低氧7d时WA%和mPAP显著高于对照组;低氧14d时WA%、mPAP较7d时进一步增加,RVHI显著高于对照组;低氧21d时WA%、RVHI较14d时进一步增加。SUMO-1 mRNA和蛋白在对照组肺小动脉壁呈弱阳性表达;低氧3d后显著增高;低氧14d达高峰;低氧21d后mRNA表达减弱但仍然高于对照组,蛋白表达继续保持高水平。SUMO-1 mRNA和蛋白表达与mPAP、WA%、RVHI均呈正相关(P均<0.01)。结论慢性低氧诱导肺内SUMO-1表达增加在HPH的发病过程中发挥一定的作用。
- 田华戴爱国符代炎谭双香胡瑞成朱黎明
- 关键词：低氧肺动脉高压
