国家自然科学基金(30971324)
- 作品数：8 被引量：50H指数：4
- 相关作者：罗百灵何白梅张立袁浩马苗更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅二医院长沙市第四医院更多>>
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- AMPK在香烟烟雾提取物诱导的支气管上皮细胞凋亡中的调节作用被引量：1
- 2014年
- 目的内质网应激是导致慢性阻塞性肺疾病病程中细胞凋亡的重要机制之一,该研究探讨AMPK在香烟烟雾提取物诱导的支气管上皮细胞凋亡中的调节作用。方法实验分四组:空白对照组、AMPK特异性抑制剂(Compound C)组、CSE组、CSE+Compound C组,体外培育人支气管上皮细胞(NHBE)并分别给予CSE及Compound C处理。采用Western blot法检测CHOP、Caspase 4及p-AMPK蛋白表达水平,Hoechst33342染色观察细胞形态学改变及流式细胞学检测细胞凋亡率。结果与正常对照组相比,CSE干预组中p-AMPK/AMPK蛋白表达下降,差异具有显著性(P<0.05);CHOP、Caspase4蛋白表达增加,差异具有显著性(P<0.05);Compound C+CSE组与正常对照组比较,p-AMPK/AMPK显著下降,Caspase4/GAPDH、CHOP/GAPDH显著增加,差异具有显著性(P<0.05);流式细胞学检测显示:无论早期凋亡率还是总凋亡率,CSE组、Compound C+CSE组与正常对照组对比均增加,差异有显著性(P<0.05)。予以Hoechst 33342进行细胞核染色显示:与对照组相比,CSE组、Compound C+CSE组细胞均出现典型的凋亡特征,细胞核呈现浓染、颗粒块状荧光及明显的形态裂化;各实验组均出现不同程度凋亡,以早期凋亡为主,流式细胞学检测显示:空白对照组、CSE组、Compound C+CSE组流式细胞学检测的早期凋亡率依次为(1.480±0.217)%、(26.860±2.946)%、(43.620±2.536)%,细胞凋亡率依次递增(P<0.05),而Compound C组早期凋亡率(3.560±1.209)%与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论 CSE能诱导NHBE细胞发生凋亡,并呈时间浓度依赖性;AMPK的表达对细胞抵抗CSE诱导的内质网应激可能具有一定的保护效应。
- 谢旺罗百灵张立郭现玲
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病腺苷酸活化蛋白激酶内质网应激
- 老龄慢性阻塞性肺疾病大鼠模型中内质网应激介导细胞凋亡的研究
- 2014年
- 慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）是一种慢性进行性发展的疾病,与吸烟有关,可诱发肺实质破坏产生肺气肿[1].本课题组已从细胞和动物实验水平证实,慢阻肺模型中持续的内质网应激反应可启动细胞凋亡程序,表现为内质网应激特异凋亡分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase-12）表达增加[2].
- 马苗罗百灵张立李玉屏郭现玲
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病内质网应激反应细胞凋亡大鼠模型增强子结合蛋白蛋白水解酶介导
- 血红素加氧酶-1对烟草烟雾提取物诱导健康人支气管上皮细胞凋亡的作用被引量：2
- 2012年
- COPD是严重危害人类健康的常见疾病,其主要的病理特征为气流受限不完全可逆并呈进行性发展.烟草中含有4000多种化学物质,是导致COPD的主要元凶之一.我们在前期的研究中发现,过度的内质网应激可启动细胞凋亡[1].分子伴侣葡萄糖调节蛋白78 （glucose regulated protein,GRP78）与生长停滞DNA损伤可诱导基因153（ C/EBP homologous protein/growth arrest-and DNA damage-inducible gene 153,CHOP/GADD153）表达显著增多是发生内质网应激的2个经典标志物[2-3].内质网应激时,CHOP是由抵抗细胞凋亡向促进细胞凋亡转换的重要信号分子[3-4].血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）是广泛存在的抗氧化酶,具有抗炎、抗氧化、抗凋亡和抗增生的细胞保护效应.
- 张立罗百灵何白梅袁婷
- 关键词：血红素加氧酶-1上皮细胞凋亡支气管健康人葡萄糖调节蛋白78内质网应激
- 慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的肺组织内质网应激与细胞凋亡被引量：28
- 2011年
- 目的观察COPD大鼠模型肺组织内质网应激的发生及肺泡上皮细胞凋亡。方法24只Wistar雄性大鼠分为对照组和COPD模型组（简称模型组），每组12只。采用香烟烟雾暴露加气管内滴注脂多糖法建立COPD大鼠模型。造模完成后测定各组大鼠的肺功能，观察肺组织病理学变化，逆转录PCR法检测分子伴侣葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）mRNA水平，Westernblot法检测GRP78、CHOP和活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶一12（caspase．12）蛋白水平，原位缺口末端标记法检测大鼠肺泡上皮细胞凋亡。组问两两比较采用t检验。结果模型组大鼠FEV。／FVC[（60±6）％]和动态肺顺应性[（0．17±0．02）cmH20·ml^-1·s^-1，1cmH2O=0．098kPa]均明显低于对照组[（83±7）％和（0．31±0．03）cmH2O·m^l·s^-1，气道阻]力（0．64±0．07）mL／cmH20]明显高于对照组[（0．32±0．03）mVcmH：O]，差异均有统计学意义（t值为一14．532—11．619，均P〈0．05）；模型组大鼠支气管肺组织中GRP78和CHOPmRNA表达量的吸光度值（0．65±0．07和0．79±0．06）均明显高于对照组（0．21±0．04和0．07±0．04），差异均有统计学意义（t值分别为-19．102和-32．573，均P〈0．05）；模型组大鼠肺组织中GRP78、CHOP和活化的caspase．12蛋白的吸光度值（0．83±0．06、0．82±0．06和0．81±0．07）均明显高于对照组（0．33±0．05、0．05±0．03和0．24±0．06），差异均有统计学意义（t值为-40．866～-22．070，均P〈0．05）；模型组大鼠细胞凋亡指数[（32．4±3．7）％]明显高于对照组[（6．2±0．9）％]，差异有统计学意义（t=-23．852，P〈0．05）。结论COPD大鼠模型的肺组织发生内质网应激，肺泡上皮细胞凋亡增加。内质网应激可能是介导肺泡上皮细胞凋亡的重要途径。
- 何白梅罗百灵彭振宇袁浩
- 关键词：肺疾病慢性阻塞性内质网细胞凋亡
- 毒胡萝卜素诱导A549细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin TG)对体外培养人肺泡II型细胞来源的A549细胞生长及凋亡的影响。方法:体外培养A549细胞,经不同浓度TG(1μM、5μM、10μM)干预24小时,MTT检测细胞存活率、Hochest/PI染色观察细胞凋亡形态学、Wersten-blot检测活化caspase-3水平。结果:与对照组比较,经TG作用24小时后,活化caspase-3表达显著增加,细胞存活率下降,凋亡率增加,均呈浓度依赖性,P<0.005。结论:毒胡萝卜素能抑制A549细胞生长,诱导细胞凋亡。
- 何白梅罗百灵袁浩
- 关键词：毒胡萝卜素慢性阻塞性肺疾病A549细胞凋亡
- Salubrinal对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织内质网应激凋亡的保护作用被引量：4
- 2012年
- 既往COPD的发病机制主要以炎症学说、蛋白酶失衡学说及氧化应激等为主，最近的研究结果表明，除上述机制外，内质网应激导致肺泡上皮细胞凋亡也是COPD发病的重要机制之一。Salubrinal是一种研究内质网应激的有用工具，是从19000多种保护小鼠嗜铬细胞瘤发生内质网应激所致凋亡的化合物中筛选出的一种小分子物质。
- 袁婷罗百灵魏天虹张立何白梅牛瑞超
- 关键词：上皮细胞凋亡内质网应激慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织炎症学说
- 白藜芦醇减轻慢性阻塞性肺疾病大鼠内质网应激诱导的肺泡上皮细胞凋亡研究被引量：10
- 2014年
- 目的探索白藜芦醇对减轻慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠内质网应激诱导肺泡上皮细胞凋亡的保护作用。方法将48只雄性SD大鼠分为正常对照组、白藜芦醇对照组、慢阻肺组和白藜芦醇干预组，每组12只。慢阻肺组和白藜芦醇干预组采用反复烟草烟雾暴露联合气管内注入脂多糖法制备大鼠慢阻肺模型，白藜芦醇对照组和白藜芦醇干预组大鼠采用白藜芦醇25mg·kg～·d。灌胃。造模后进行肺功能、肺组织病理学、免疫组织化学和Westernblot检测，观察肺组织内质网应激凋亡分子CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12（caspase-12）蛋白的表达。采用原位末端标记法检测细胞凋亡。多组问比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD—t检验。结果慢阻肺组大鼠FEV。／FVC[（59±4）％]和动态肺顺应性[（0．154±0．013）ml／cmH，O，1cmH，O=0．098kPa]显著低于正常对照组[（82±4）％和（0．401±0．033）ml／cmH2O]，气道阻力[（0．651±0．046）cmH：O·ml-1·s-1]显著高于正常对照组[（0．404±0．033）cmH2O·ml～·s-1]（t值为-14．48～16．48，均P〈0．05）；白藜芦醇干预组大鼠FEV。／FVC[（71±5）％]和动态肺顺应性[（0．302±0．023）ml／cmH2O]显著高于慢阻肺组，气道阻力[（0．442±0．036）cmH，O·ml-1·s-1]显著低于慢阻肺组（t值为-10．02～10．37，均P〈0．05）。慢阻肺组大鼠肺组织中可见明显的支气管炎症和肺气肿改变，较白藜芦醇干预组的程度重；肺组织中CHOP和caspase-12的积分吸光度值分别为9778±217和12009±346，显著高于正常对照组（960±94和1124±112），白藜芦醇干预组（5799±177和6720±173）显著低于慢阻肺组，差异均有统计学意义（t值为-100．43—45．32，均P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，慢阻肺组大鼠肺组织中CHOP和caspase-12相对表�
- 李玉屏罗百灵张立马苗郭现玲
- 关键词：细胞凋亡上皮细胞
- 红霉素对慢性阻塞性肺疾病大鼠转化生长因子-β1和分泌型白细胞蛋白酶抑制剂表达水平的影响被引量：7
- 2011年
- 目的 探讨红霉素在COPD发病过程中的保护性作用.方法 健康SPF级雄性Wistar大鼠36只,体重（220±20）g,用随机数字表法分为模型组、干预组和对照组,每组12只.采用香烟烟雾暴露及气管内滴加脂多糖复制COPD大鼠模型.观察3组大鼠在红霉素干预前后的肺功能及病理变化,免疫组织化学及逆转录PCR法检测支气管肺组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）和分泌型白细胞蛋白酶抑制剂（SLPI）表达的变化.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验,采用直线相关分析进行相关性检验.结果 模型组大鼠的饮食和活动逐渐减少,平均体重较对照组减轻,后期可见毛发干枯、发黄,可有明显喘息音;干预组大鼠的症状较轻,对照组大鼠未出现上述情况.模型组大鼠FEV0.3/FVC[（58±7）%]和动态肺顺应性[（0.16±0.07） L/cm H2O,1 cm H2O=0.098 kPa]均明显低于对照组[（83±7）%和（0.33±0.16） L/cm H2O],气道阻力[（0.69±0.14） cm H2O·L-1·s-1] 明显高于对照组[（0.33±0.11） cm H2O·L-1·s-1];干预组大鼠FEV0.3/FVC[（65±9）%]和动态肺顺应性[（0.23±0.08） L/cm H2O]均明显高于模型组[（58±7）%和（0.16±0.07） L/cm H2O],气道阻力[（0.50±0.13） cm H2O·L-1·s-1]明显低于模型组[（0.69±0.14） cm H2O·L-1·s-1];干预组大鼠支气管肺组织中TGF-β1的蛋白（积分吸光度值×103）和mRNA（吸光度值）表达（6.7±1.5和0.45±0.13）均明显低于模型组（10.7±1.9和0.66±0.18）,SLPI的蛋白和mRNA表达（9.9±1.7和0.69±0.34）均明显高于模型组（8.1±1.7和0.41±0.27）;TGF-β1与SLPI表达呈显著负相关（r=-0.686,P〈0.05）.结论 COPD大鼠的支气管肺组织中SLPI 表达明显减少,TGF-β1表达明显升高,两者呈负相关.红霉素可以抑制大鼠的气道炎症反应,使TGF-β1对SLPI的抑制作用减弱,提示红霉素可能具有局部保护作用.
- 袁浩罗百灵何白梅
- 关键词：转化生长因子Β1红霉素
