国家自然科学基金(30972872)
- 作品数：15 被引量：49H指数：5
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- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学云南省第一人民医院更多>>
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- 早期胃癌分化程度与临床病理因素的相关性分析被引量：5
- 2015年
- 目的：探讨早期胃癌分化程度的影响因素,为选择合适的治疗方案提供依据。方法：收集重庆医科大学附属第一医院2009年1月到2014年1月行胃癌D2根治术病例,早期胃癌占11%（97/852）,选97例早期胃癌资料行回顾性分析。对患者的肿瘤大小、大体类型、肿瘤部位、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤标志物、血行转移、性别、年龄与分化程度的关系进行单因素及多因素分析。结果：97例早期胃癌中,未分化型为73%（70/97）。logistic回归多因素分析结果显示：患者女性、年龄小于50岁及胃下1/3部位为未分化型的危险因素（P〈0.05）,OR值、95%CI及P值分别为（4.9、13.7、3.4）、（2.4~13.6、4.2~24.1、1.7~8.4）、（0.019、0.013、0.027）。肿瘤大小、浸润深度、大体类型、淋巴结转移是否与未分化型腺癌无相关性。结论：早期胃癌的分化程度主要与患者的性别、年龄及肿瘤部位有关。
- 李玉强汤玉成孔德全徐维杨书坤王子卫
- 关键词：早期胃癌分化程度影响因素
- 人EGFR显性负性突变体抑制胃癌细胞促血管形成能力
- 2013年
- 目的探讨人表皮生长因子显性负性突变体(dominant negative epidermal growth factor receptor,DNEGFR))对胃癌细胞促血管形成能力的影响及其分子机制,并检测其对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法选用2株人胃癌细胞,分为如下6组:SGC-7901及NCI-N87细胞未转染组(US组,UN组),SGC-7901及NCI-N87细胞pEGFP-N1质粒转染组(ES组,EN组),SGC-7901及NCI-N87细胞pEGFPN1-DNEGFR质粒转染组(DS组,DN组)。采用人脐静脉内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cell,HUVEC)管腔结构形成实验检测体外促血管形成能力,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞培养液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平,建立人胃癌细胞裸鼠移植瘤模型,标本微血管密度(microvessel density,MVD)检测体内促血管形成能力,标本体积检测其对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。结果转染pEGFPN1-DNEGFR质粒的人胃癌细胞株出现HUVEC管腔结构形成抑制,培养液中VEGF水平降低,MVD计数降低,裸鼠皮下移植瘤体积变小。结论 DNEGFR可能通过下调VEGF分泌抑制胃癌细胞体外及裸鼠体内促血管形成能力,最终抑制裸鼠皮下移植瘤生长。
- 廖刚王子卫张能董浦江汤为学
- 关键词：胃癌血管内皮生长因子表皮生长因子受体
- 人表皮生长因子受体显性负性突变体诱导胃癌细胞发生G0／G1期阻滞被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨人表皮生长因子受体显性负性突变体(dominant negative epidermal growth factor recep-tor,DNEGFR)对胃癌细胞细胞周期的影响及其分子机制。方法:选用2株人胃癌细胞,分为如下6组:SGC-7901细胞未转染组(US组)、SGC-7901细胞pEGFP-N1质粒转染组(ES组)、SGC-7901细胞pEGFPN1-DNEGFR质粒转染组(DS组)、NCI-N87细胞未转染组(UN组)、NCI-N87细胞pEGFP-N1质粒转染组(EN组)和NCI-N87细胞pEGF-PN1-DNEGFR质粒转染组(DN组)。采用流式细胞术检测细胞周期,Western blotting检测细胞周期素依赖性蛋白激酶2(CDK2)、cyclin D1、Ser9位点磷酸化糖原合成酶激酶3β[p-GSK-3β(Ser9)]、p21和p27蛋白水平。结果:转染pEGFPN1-DNEGFR质粒的人胃癌细胞株出现G0/G1期阻滞,CDK2、cyclin D1和p-GSK-3β(Ser9)蛋白水平降低,p21和p27蛋白水平则升高。结论:DNEGFR通过激活GSK-3β使cyclin D1蛋白水平降低,并降低CDK2蛋白水平,上调p21和p27蛋白水平,最终导致胃癌细胞发生G0/G1期阻滞。这一结果将为胃癌生物治疗研究提供新思路。
- 廖刚王子卫张能董浦江汤为学
- 关键词：表皮生长因子受体胃肿瘤细胞周期
- 人EGFR显性负性突变体负调控内源性EGFR功能的机制分析被引量：4
- 2010年
- 通过定向克隆法构建真核表达载体pEGFPN1-DNEGFR,脂质体介导下转染体外培养的SGC-7901细胞,应用Western blotting检测DNEGFR-EGFP蛋白的表达,激光共聚焦显微镜对DNEGFR-EGFP亚细胞结构定位检测;并经RT-PCR、Western blotting检测DNEGFR-EGFP对内源性EGFRmRNA水平、蛋白及磷酸化水平的影响.成功检测到DNEGFR-EGFP蛋白的表达,DNEGFR-EGFP蛋白主要定位于细胞膜,DNEGFR-EGFP能降低内源性EGFR蛋白磷酸化水平,而对内源性EGFRmRNA水平及蛋白水平无影响.研究证明DNEGFR通过降低内源性EGFR蛋白磷酸化水平负调控EGFR功能,为靶向EGFR显性负性策略在肿瘤生物治疗中的进一步研究打下基础.
- 廖刚王子卫赵林张能董浦江
- 关键词：磷酸化水平定向克隆
- EGFR和KDR在胃癌组织中的表达及临床意义被引量：4
- 2009年
- 探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和含激酶插入区受体(kinase-insert domain-containing receptor,KDR)的表达与胃癌临床病理特征的关系及其临床意义.应用免疫组织化学PV法,检测60例胃癌组织中EGFR和KDR的表达情况,并且分析其与临床病理特征的关系.胃癌组织中EGFR和KDR阳性表达率分别为48.3%(29/60)、63.3%(38/60),二者的阳性表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),并且存在共表达现象,表达强度呈正相关(rs=0.664,P<0.05).EGFR和KDR在胃癌的进展中起协同作用,为靶向EGFR和KDR生物治疗制剂在胃癌生物治疗中的应用及联合应用提供了一定的理论依据.
- 廖刚王子卫赵林张能汤为学
- 关键词：胃癌表皮生长因子受体肿瘤生物治疗
- 人EGFR显性负性突变体对胃癌细胞在裸鼠体内成瘤性及淋巴结转移的影响
- 2014年
- 为了研究人表皮生长因子显性负性突变体(dominant negative mutant of EGFR,dnEGFR)对胃癌细胞体内成瘤及淋巴结转移的影响,用目的质粒pEGFPN1-dnEGFR,空质粒载体pEGFP-N1分别转染胃癌细胞NCI-N87.筛选出稳定转染株,实验共分3组:NCI-N87细胞未转染组(untreated NCI-N87,UN组),NCI-N87细胞pEGFP-N1转染组(EN组);NCI-N87细胞pEGFPN1-dnEGFR转染组(DN组).将3组细胞接种于裸鼠右后足垫,6周后测量移植瘤大小及对应腹股沟转移淋巴结数目,HE染色验证,real-time PCR和Western印迹检测3组细胞中AKT1、MAPK3 mRNA和蛋白的表达改变.结果发现,DN组移植瘤较UN、EN组明显缩小(P<0.05),且右腹股沟转移淋巴结数目较UN、EN组减少(P<0.05).DN组细胞中,AKT1、MAPK3 mRNA和蛋白水平较UN、EN组降低(P<0.05).提示pEGFPN1-dnEGFR可抑制裸鼠体内胃癌细胞成瘤及淋巴结转移,AKT1及MAPK3信号通路可能参与其中.
- 毛红朝王子卫廖刚查郎黄镇向吉锋
- 关键词：AKT1胃癌淋巴结转移
- 人表皮生长因子受体显性负性突变体对胃癌细胞体外侵袭转移能力的抑制作用被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨人表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)显性负性突变体(Dominant negative epidermalgrowth factor receptor,DNEGFR)对胃癌细胞体外侵袭转移能力的影响及其分子机制。方法:构建pEGFPN1-DNEGFR,转染人胃癌细胞并筛选稳定转染株,采用Transwell侵袭小室模型检测人胃癌细胞体外侵袭转移能力,RT-PCR检测细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA水平,酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测培养液MMP-2和MMP-9蛋白水平。结果:成功构建pEGFPN1-DNEGFR,转染并筛选出稳定转染株,检测到人胃癌细胞体外侵袭转移能力降低,细胞MMP-2和MMP-9 mRNA水平降低,培养液MMP-2和MMP-9蛋白水平降低。结论:DNEGFR通过抑制人胃癌细胞分泌MMP-2和MMP-9,使其体外侵袭转移能力显著降低,将为DNEGFR在胃癌生物治疗中的深入研究打下基础。
- 廖刚王子卫张能董浦江
- 关键词：表皮生长因子受体胃癌基质金属蛋白酶
- 机器人手术系统在胃癌治疗中的应用研究进展被引量：3
- 2015年
- 自1994年日本Kitano等首次报道腹腔镜辅助早期胃癌根治术以来,腹腔镜技术在胃癌中应用得到广泛普及和推广。与传统开腹手术相比,腹腔镜手术具有切口小、并发症少、术后恢复快、住院时间少等优点。但仍然存在二维图形、反向操作、医生体位不适等不足之处。因此,2000年机器人手术系统被引进用于克服传统微创外科的技术缺点。
- 汤玉成王子卫
- 关键词：机器人胃肿瘤淋巴结切除术
- pEGFPN1-dnEGFR对胃癌细胞的放疗增敏作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨人表皮生长因子(EGFR)显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1-dnEGFR)对胃癌细胞放疗敏感性的影响。方法用pEGFPN1-dnEGFR转染人胃癌细胞株SGC-7901和NCI-N87并联合放疗,将两种胃癌细胞分别分为3组,即未处理组、pEGFP-N1空载体质粒转染组(空质粒组)、pEGFPN1-dnEGFR质粒转染组(目的质粒组),用MTT法测定对两种胃癌细胞增殖效应的影响,RT-PCR检测细胞中Bax、Cyclin D1的mRNA表达情况,Western blot检测细胞中Bax、Cyclin D1蛋白表达情况。结果两种胃癌细胞目的质粒转染组的抑制率较空质粒组和未处理组显著提高(P<0.05)。RT-PCR显示两种胃癌细胞目的质粒组Bax mRNA相对表达强度较空质粒组和未处理组升高;目的质粒组Cyclin D1mRNA相对表达强度较空质粒组和未处理组降低(P<0.05)。Western blot显示两种胃癌细胞目的质粒组Bax蛋白表达相对强度较空质粒组和未处理组明显升高;目的质粒组Cyclin D1蛋白表达相对表达强度分别较空质粒组和未处理组降低(P<0.05)。结论 pEGFPN1-dnEGFR能够提高胃癌细胞对放疗的敏感性。
- 秦宇王子卫杨宁波查郎朱代亮
- 关键词：放射疗法CYCLIND1BAX
- 胃癌中HMGA2与HDAC6表达的临床意义及其相关性被引量：7
- 2016年
- 目的检测胃癌中高迁移率族蛋白2(HMGA2)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在胃癌中的表达情况及相关关系,分析其与临床病理特征的关系。方法分别用免疫组织化学法、Western blot和real-time PCR检测82例配对人胃癌、癌旁及正常组织中HMGA2和HDAC6的蛋白及mRNA表达,并分析其与临床病理参数的关系及两者表达的相关性。结果胃癌组织中HMGA2和HDAC6蛋白阳性表达率分别为69.51%(57/82)和65.85%(54/82),明显高于癌旁组织14.63%(12/82)、12.20%(10/82)和正常组织9.76%(8/82)、7.32%(6/82)(P<0.05);胃癌组织HMGA2、HDAC6蛋白和mRNA表达较癌旁组织及正常组织高(P<0.05),且两者表达水平与肿瘤的临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05);HMGA2和HDAC6在胃癌组织中的表达呈明显正相关(r=0.56,P<0.05)。结论 HMGA2和HDAC6基因在胃癌组织中存在高表达且共存现象,可能与胃癌恶性程度有关。
- 李逸王子卫孔德全查郎
- 关键词：胃肿瘤HMGA2
