山东省自然科学基金(ZR2010HQ062)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：山东省医学科学院济南大学山东省寄生虫病防治研究所更多>>
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- 弓形虫关键粘附蛋白在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达
- 2013年
- 目的通过cDNA文库筛选出弓形虫关键粘附蛋白基因—棒状体ROP2基因,在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,以获得重组蛋白。方法根据弓形虫棒状体ROP2基因开放阅读框设计引物,以弓形虫cDNA为模板进行PCR,纯化扩增产物经双酶切,进行TA克隆,再克隆到pET-30a中。重组质粒pET-30a-rop2经PCR鉴定后,转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,用SDS-PAGE电泳鉴定表达产物。结果获得的1223bp的基因片段经PCR和酶切鉴定后与预期大小一致;SDS-PAGE电泳分析显示诱导菌在52ku处出现一条明显的蛋白带,与预期分子量相符。结论成功构建PET30a-ROP2,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,为进一步研究弓形虫粘附关键蛋白基因与肠上皮细胞的关系奠定基础。
- 崔勇仲维霞李瑾赵桂华徐超黄晓丹王洪法
- 关键词：弓形虫粘附蛋白大肠埃希菌
- 济宁城区淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性研究被引量：6
- 2015年
- 目的研究山东省济宁市城区淡色库蚊对常用杀虫剂的抗药性,为城市媒介蚊虫的防治提供参考依据。方法在媒介蚊虫流行季节,采集城区淡色库蚊幼虫,利用幼虫浸渍法,测定淡色库蚊对常用杀虫剂的LC50,计算淡色库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗性指数。结果淡色库蚊幼虫对残杀威、敌敌畏、三氯杀虫酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯的LC50分别为1.240 45、0.473 88、2.153 26、0.048 09、0.040 56 ppm,与敏感品系比较,济宁城区淡色库蚊对残杀威、敌敌畏、三氯杀虫酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯的抗性指数分别为10.93、4.97、10.16、200.38、337.98。结论济宁市城区淡色库蚊对常用杀虫剂均已产生抗药性,其中对菊酯类杀虫剂的抗性水平最高,为延缓媒介蚊虫抗药性的发展,应轮换使用杀虫剂或选择微生物制剂防治蚊幼虫。
- 寇景轩张本光程鹏郭秀霞崔勇王海防杨培培赵玉强王怀位
- 关键词：淡色库蚊杀虫剂抗药性
- 白僵菌对不同生境淡色库蚊的致病力研究被引量：1
- 2013年
- 为了测定球孢白僵菌对不同生境淡色库蚊幼虫的致病力，为白僵菌应用于蚊虫的生物防治提供参考依据，从济宁市唐口镇医院污水（A组）、市郊区养猪场废水沟（B组）、微山湖稻区排水沟（C组）、山东省寄生虫病防治研究所院内水缸（D组）中采集的蚊虫直接用于致病力研究，室内饲养蚊虫作为对照组（E组）。利用白僵菌的孢子悬浮液处理不同栖境的淡色库蚊幼虫，记录幼虫死亡数，计算各处理组幼虫的致死中时LT50.结果显示，经白僵菌处理后，淡色库蚊幼虫均有不同程度的死亡率，试验10d后，淡色库蚊幼虫的累计死亡率均达95％以上。A、B、C、D、E组幼虫的致死中时LT50分别为：6．2、6．4、5．7、5．8、3．8d，野外采集蚊虫比室内饲养蚊虫的死亡高峰期推迟2～3d。结果表明白僵菌有望应用于蚊虫的生物防治中。
- 刘丽娟寇景轩田宝振王海防程鹏崔勇公茂庆
- 关键词：淡色库蚊球孢白僵菌致病力
- 采用弓形虫T7噬菌体文库筛选黏附相关蛋白基因的研究被引量：1
- 2013年
- 目的用原代培养的猫肠上皮细胞(IECs)对已构建的弓形虫T7噬菌体展示文库进行筛选,期望得到将新的弓形虫入侵宿主细胞黏附相关蛋白基因。方法将猫IECs与混有噬菌体文库的DMEM培养基孵育培养后进行洗脱筛选,再与宿主菌BLT5403共同培养扩增文库,筛选噬菌体DNA并进行基因序列测定与分析。结果洗脱下的噬菌体滴度从第1轮7.6×105到第5轮的3.6×107,富集了230倍,非特异性结合和亲和力低的噬菌体被成功去除;核苷酸序列分析表明含插入片段为394bp的噬菌体富集量最大,经检索为弓形虫棒状体蛋白基因,是棒状体蛋白基因ROP2和ROP8的共有序列。结论初步证明弓形虫棒状体蛋白为黏附相关蛋白基因,其表达产物为ROP2。
- 崔勇仲维霞赵桂华李瑾徐超魏艳彬魏冬冬王洪法
- 关键词：弓形虫噬菌体黏附蛋白
