国家自然科学基金(81272107)
- 作品数：11 被引量：63H指数：6
- 相关作者：李小静陈钊王晖李涛洪学哲更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院浙江大学医学院附属第二医院安徽中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 构建肿瘤坏死因子α刺激基因6慢病毒表达及干扰载体及对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖与凋亡的影响被引量：7
- 2016年
- 背景:研究表明,肿瘤坏死因子α刺激基因6(tumor necrosis factorαstimulated gene 6,TSG-6)具有抗炎作用,早期创面局部注射TSG-6蛋白可抑制瘢痕形成,但其参与瘢痕形成的机制尚不明确。目的:构建人TSG-6重组慢病毒表达载体与干扰载体,建立稳定转染的过表达及干扰细胞株,观察TSG-6对瘢痕疙瘩成纤维细胞株增殖与凋亡的影响。方法:采用酶消化法分离纯化得到人瘢痕疙瘩成纤维细胞,再以免疫组织化学法鉴定。构建p LVX-puro-TSG-6及pL VX-shR NA1-TSG-6重组慢病毒载体,感染人瘢痕疙瘩成纤维细胞,并行RT-PCR和Western blot检验各组细胞中TSG-6的表达。用MTT法和流式细胞术检测转染后不同时间段内各组细胞增殖和凋亡情况。用Western blot检测各组细胞中Bcl-2、P53及Active-caspase-3的表达。结果与结论:(1)成功分离原代人瘢痕疙瘩成纤维细胞,光学显微镜下细胞多呈梭形,传至5代后行波形蛋白的免疫组织化学染色,阳性率为100%,细胞角蛋白染色阴性;(2)重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功,细胞中TSG-6的表达发生明显变化。与对照组相比,TSG-6过表达组细胞增殖减缓,凋亡率显著升高,TSG-6干扰组细胞增殖加快,细胞凋亡率降低(P<0.05);(3)Western blot结果显示,TSG-6过表达组Bcl-2表达显著降低,P53及Active-caspase-3明显上升(P<0.05);(4)结果表明,TSG-6对瘢痕疙瘩成纤维细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,且其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调P53蛋白表达、升高Caspase-3活性有关。
- 陈钊李小静王晖
- 关键词：瘢痕成纤维细胞过表达慢病毒
- 病理性瘢痕与炎性反应被引量：4
- 2014年
- 病理性瘢痕是人体经历各种损伤后通过成纤维细胞和炎性细胞及其产物等之间的相互作用，而表现为成纤维细胞过度的增殖及其产物大量沉积的一种纤维增生性疾病。目前病理性瘢痕的发病机制尚未完全清楚，虽然临床上的治疗方法众多。
- 唐悦玲李小静
- 关键词：病理性瘢痕炎性反应纤维增生性疾病成纤维细胞相互作用炎性细胞
- TSG-6对病理性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响被引量：6
- 2014年
- 目的 在重组人肿瘤坏死因子-α刺激基因-6干扰前后,检测病理性瘢痕成纤维细胞内Bcl-2、Bax的表达情况及细胞凋亡情况,探讨肿瘤坏死因子-α刺激基因-6与病理性瘢痕形成的关系及其机制.方法 增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织各5例,以组织块贴壁法培养成纤维细胞,待细胞培养传代至第3、4代后,以TUNEL法和透射电镜法检测重组人肿瘤坏死因子-α刺激基因-6干扰对成纤维细胞凋亡的影响,以免疫组化法检测各组成纤维细胞内Bcl-2和Bax表达的变化.结果 TUNEL和透射电镜显示,重组人肿瘤坏死因子-α刺激基因-6促进病理性瘢痕成纤维细胞的凋亡.免疫组化显示,病理性瘢痕成纤维细胞内的Bcl-2表达减少,而Bax表达增多.结论 肿瘤坏死因子-α可抑制病理性瘢痕成纤维细胞的增殖,并促进其凋亡,其机制可能与其调节成纤维细胞内Bcl-2和Bax的表达有关.
- 唐悦玲李小静陈钊洪学哲马莉
- 关键词：病理性瘢痕成纤维细胞BCL-2
- 内剥切并局部注射治疗耳郭瘢痕疙瘩被引量：5
- 2014年
- 背景:瘢痕疙瘩是创伤后皮肤异常修复的结果,表现为过度生长且进行性增大、侵犯邻近正常皮肤组织、常扩展到原伤口范围以外,单纯手术切除后极易复发,故需结合其他方法进行综合治疗。目的:探讨耳郭瘢痕疙瘩内核剥除术后及时局部注射的临床疗效。方法:20例耳郭瘢痕疙瘩患者,采用瘢痕疙瘩核心摘除术,并分别于术后逐渐拉长间隔时间,于切口瘢痕组织内注射氟尿嘧啶或曲安奈德加利多卡因混合或单独用药,必要时按瘢痕情况偶加用适量的复方倍他米松,视瘢痕的消退情况及时调节药物的注射剂量,观察治疗12个月到24个月。结果与结论:20例患者36个耳部瘢痕,其中有1个耳部瘢痕为效果有效,35个为耳部瘢痕为治愈。随访12-24个月,均无复发,有效率为100%,其中完全治愈者97%,效果良好者3%。结果表明,瘢痕疙瘩核心切除并利用其上皮瓣覆盖整形,联合氟尿嘧啶与糖皮质激素局部注射治疗耳郭瘢痕疙瘩是安全有效的方法。
- 唐洁李小静唐悦玲宁金龙
- 关键词：瘢痕疙瘩瘢痕皮回植曲安奈德5-氟尿嘧啶
- TSG-6促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及其NF-κB信号通路影响的实验研究被引量：7
- 2017年
- 目的探讨TSG-6预处理对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及NF-κB信号通路的影响。方法标本人瘢痕疙瘩共3例,采用酶消化法分离纯化得到人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs),MTT法检测rh TSG-6蛋白对KFs的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测KFs(空白对照组)与接近IC50rh TSG-6蛋白处理组(rh TSG-6实验组)细胞凋亡情况。Western blot检测各组细胞中IκBα、p-IκBα、活化caspase3及caspase8的表达。凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测各组细胞NF-κB DNA结合活性。结果 rh TSG-6在体外对KFs增殖有明显抑制作用(IC50接近300 ng/ml),细胞凋亡率增高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot法检测显示rh TSG-6实验组KFs中IκBα表达增加,p-IκBα表达减少,活化caspase3和caspase8表达明显增多。EMSA结果显示rh TSG-6实验组NF-κB DNA结合活性明显降低。结论TSG-6在体外可能通过抑制NF-κB信号通路活性进而抑制KFs增殖并促进其凋亡。
- 王佳妮李小静李涛王瑜
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-ΚB凋亡
- 抗炎因子TSG-6抑制兔耳瘢痕增生的实验研究被引量：19
- 2015年
- 目的通过建立兔耳增生性瘢痕模型,研究肿瘤坏死因子α刺激基因-6(TSG-6)在增生性瘢痕形成过程中的作用及机制。方法建立兔耳增生性瘢痕模型,右侧耳创面为实验组,注射TSG-6,左侧均注射等量PBS作为对照组,通过比较各组瘢痕指数(SEI)及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的不同来评价瘢痕增生程度的差异。采用免疫组化法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在各组中的表达;以透射电镜观察及TUNEL法检测瘢痕组织成纤维细胞凋亡的变化。结果与PBS对照组比较,TSG-6治疗组炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α表达减少炎症反应明显减轻,瘢痕组织成纤维细胞凋亡明显增多,且SEI及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗炎因子TSG-6能明显减弱增生性瘢痕的形成,其对瘢痕形成的抑制作用可能与抑制炎症反应及促进成纤维细胞凋亡相关。
- 王晖李小静陈钊
- 关键词：动物模型增生性瘢痕炎症
- TSG-6调控PI3K/Akt-Bcl-2通路影响人瘢痕疙瘩凋亡机制的研究被引量：13
- 2018年
- 目的研究瘢痕疙瘩形成中肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)调控3-磷酸肌醇激酶/丝/苏氨酸蛋白激酶-B淋巴细胞瘤-2基因(PI3K/Akt-Bcl-2)信号通路对成纤维细胞表达和凋亡的关联性。方法构建p LVX-puro-TSG-6、p LVX-shRNA1-TSG-6及其对应空质粒重组慢病毒载体转入人瘢痕疙瘩成纤维(HKF)细胞,建立稳定转染的过表达细胞株、干扰细胞株、过表达对照细胞株、干扰对照细胞株,用流式细胞术和CCK-8法分别检测相应细胞株与HKF细胞凋亡与增殖。应用RT-PCR及Western blot分别检测TSG-6过表达细胞株、TSG-6干扰组细胞株及前两组对应对照组细胞株、HKF细胞株中PI3K、Akt、鼠双微基因2(MDM2)、P53基因、Bcl-2的信使核糖核酸及蛋白表达变化。结果与HKF组对比,TSG-6过表达组细胞增殖减缓,凋亡显著增加(t=-4.443,P=0.011);TSG-6干扰组则相反(t=3.827,P=0.019);其余各组间差异无统计学意义。RT-PCR、Western blot检测结果显示TSG-6过表达组抑制PI3K、Akt、MDM2、Bcl-2的mRNA及蛋白表达,促进P53的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。TSG-6干扰组促进PI3K、Akt、MDM2、Bcl-2的mRNA及蛋白表达,抑制P53的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论 TSG-6负向调控PI3K/Akt-Bcl-2通路促进HKF细胞凋亡,抑制瘢痕疙瘩增生。
- 田小雨李小静李心怡李涛
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞
- 四肢瘢痕挛缩患者手术前后生活质量调查分析被引量：3
- 2015年
- 目的探讨四肢瘢痕挛缩畸形患者术后早期医疗干预及心理指导对生活质量(QOL)的影响。方法 50例患者根据术后恢复期是否以随访的形式定期接受医疗干预情况分为目的组和对照组,使用SF-36量表记录两组患者术前和术后1年QOL变化,量化评分后分析其变化趋势。结果通过手术治疗,对照组患者生理机能、生理职能、一般健康状况、社会功能4个维度较术前有所提高;躯体疼痛、精力、情感职能、精神健康4个维度较术前差异无统计学意义。目的组生理机能、生理职能、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康7个维度较术前明显提高,躯体疼痛较术前差异无统计学意义。两组术后对比,生理职能、精力、情感职能、精神健康4个维度差异有统计学意义。结论通过手术治疗能够明显提高四肢瘢痕伴有功能障碍患者总体生理健康水平。术后恢复期间相关因素对总体精神健康产生的负面影响,可通过增加术后随访次数,及时给予患者康复指导及医学、心理辅导的方式改善,对患者术后QOL的进一步提高产生积极作用。
- 李红红曹东升李小静张志华谢娟鲍琼陈增红朱邦中娄寅丁以春
- 关键词：瘢痕挛缩医疗干预生活质量
- 兔耳瘢痕模型的研究与应用进展被引量：2
- 2015年
- 病理性瘢痕一直困扰人们,尚无有效的治疗措施,重要原因是对其产生机制尚不明了.长期以来由于缺乏一种理想的动物实验模型,制约了对病理性瘢痕的研究,直至人们发现兔耳创面可产生类似人类的瘢痕组织,并进一步建立了兔耳瘢痕模型,才取得一些进展.近年来,兔耳瘢痕模型已被应用于瘢痕机制的探索、瘢痕治疗方法和疗效的判定甚至基因治疗等多个方面,也有很多学者为模型的改进进行了相关探索.我们仅就兔耳瘢痕模型的建立、应用和发展现状作一综述.
- 王晖李小静
- 关键词：瘢痕模型兔耳病理性瘢痕动物实验模型基因治疗瘢痕组织
- TSG-6在病理性瘢痕中的表达及意义被引量：8
- 2013年
- 目的观察肿瘤坏死因子-α刺激基因-6(TSG-6)在病理性瘢痕组织中的表达,并探讨其在瘢痕形成中的作用。方法收集临床标本30例,其中增生性瘢痕10例(A组)、瘢痕疙瘩10例(B组)、正常皮肤10例(C组),采用免疫组化法以及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TSG-6在各组中的表达并进行统计学分析。结果 A、B组中TSG-6蛋白及mRNA呈高表达,与C组比较,差异有统计学意义(P<0.05),TSG-6主要定位于成纤维细胞。结论 TSG-6的表达与病理性瘢痕的形成机制有密切关系,这为防治病理性瘢痕形成提供了新的治疗靶点。
- 洪学哲李小静宁金龙
- 关键词：病理性瘢痕瘢痕疙瘩增生性瘢痕成纤维细胞
