广东省自然科学基金(07002329)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：万根平顾晓琼曾华松张小玲吕回更多>>
- 相关机构：广州市儿童医院广州市妇女儿童医疗中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基质金属蛋白酶-9靶向RNA干扰重组载体的构建和效应检测
- 2009年
- 目的:构建针对人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察其对川崎病(KD)血清诱导的血管内皮细胞MMP-9高表达的干扰效果。方法:依据siRNA设计原则设计两对MMP-9基因的特异性干扰序列,体外分别合成两端含BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火后与pSilencer3.1-HI neo线性质粒连接,转化DH5α感受态菌株,筛选阳性克隆,提取质粒进行双酶切及琼脂糖电泳鉴定。阳性重组质粒测序。将构建的两个MMP-9 siRNA质粒以KD血清作为诱导因子,用脂质法转染内皮细胞ECV-304,应用RT-PCR法测定各实验组血管内皮细胞MMP-9mRNA表达、Western blot检测各组MMP-9蛋白表达情况,对所构建的MMP-9 siRNA质粒进行效应检测。结果:DNA测序证实合成的并被克隆入pSilencer3.1-HI neo表达质粒siRNA插入序列与设计完全符合。KD血清组MMP-9蛋白及mRNA表达水平均较正常血清组明显升高(P<0.05);而所构建的两个MMP-9 siRNA及人血丙种球蛋白均能显著抑制KD血清的上述诱导作用(P<0.05)。结论:成功构建的两个MMP-9 siRNA比人血丙种球蛋白更能高效、特异地抑制MMP-9的表达,为进一步研究MMP-9基因对KD冠状动脉病变的影响及其临床应用奠定了基础。
- 顾晓琼万根平陈兆鸿
- 关键词：基质金属蛋白酶-9RNA干扰靶向冠状动脉扩张川崎病动脉瘤
- ACE基因多态性及血清ACE水平与婴幼儿肺炎的相关性被引量：2
- 2008年
- 目的研究血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(insertion/deletion,I/D)多态性及ACE水平与婴幼儿肺炎的相关性。方法采用PCR方法对73例儿童肺炎及137例新生儿肺炎和98例正常儿童ACE基因多态性进行检测,并用酶动力学法测定血清ACE水平。结果①73例儿童肺炎及137例新生儿肺炎患儿中ACE基因型DD型、ID型、II型频率分别为24.7%(18/73),11.0%(8/73),64.4%(47/73);35.0%(48/137),14.6%(20/137),50.4%(69/137),98例正常儿童ACE基因频率分别为25.5%(25/98),29.6%(29/98),44.9%(44/98)。②肺炎患儿和正常儿童之间ACE基因I/D多态性频率差异有统计学意义(2=10.309,P=0.006),II型基因的发生频率明显高于正常儿童。③新生儿肺炎患儿和正常儿童血清ACE活性比较差异有显著性。结论儿童肺炎、新生儿肺炎患儿ACE基因多态性与正常儿童分布有差异,II型基因可能与肺炎的发病有关。新生儿肺炎患儿血清ACE水平低于正常儿童。血清ACE水平与急性肺损伤的严重程度相关,随病情好转逐渐上升到正常水平。
- 顾晓琼万根平吕回曾华松张小玲
- 关键词：血管紧张素转换酶基因多态性新生儿肺炎
- 超敏C反应蛋白定标方式对检验结果影响的比较研究
- 2009年
- 目的探讨超敏C反应蛋白（hsCRP）在日立7170A生化分析仪和贝克曼DXC800生化分析仪上的定标方式与检验结果的关系，以实现两台仪器检验报告的一致性。方法在日立7170A生化分析仪上分别采用Spline和Exponential的定标方式定标，在贝克曼DXC800生化分析仪上采用Math Model1和Math Model3的定标方式定标，分别测定各浓度水平的hsCRP标准品3次和50份血清标本。结果测定hsCRP标准品时，除零点以外，Math Model1定标方式的测定值与标准品浓度之间的差异有统计学意义（P〈0．05），而其他三种定标方式的测定值与标准品浓度之间的差异无统计学意义（P〉1．05）。测定hsCRP血清标本时，采用Math Model3定标方式与Exponential定标方式的测定结果之间的差异有统计学意义0—2．731，P〈0．01），与Spline定标方式的测定结果之间的差异无统计学意义（f一0．946，P一0．349）。结论测定hsCRP时日立7170A采用Spline定标方式与贝克曼DXC800采用MathModel3定标方式时的结果具有可比性，且能够满足临床诊断的需要。
- 杨丽媛顾晓琼万根平
- 关键词：超敏C反应蛋白全自动生化分析仪
