广东省自然科学基金(06021352)
- 作品数：3 被引量：23H指数：2
- 相关作者：李华王欣璐姜楠杨扬汪根树更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院中山大学附属第三医院南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向人端粒酶逆转录酶进行RNAi的逆转录病毒载体的构建被引量：2
- 2006年
- 目的构建靶向性干扰人端粒酶逆转录酶表达的特异性小干扰RNA的真核表达载体。方法采用PCR法分别扩增增强型绿色荧光蛋白的DNA序列、U6启动子序列和靶向性干扰人端粒酶逆转录酶的特异性小干扰RNA对应的DNA序列,随后将与之相应的DNA序列片断依次克隆入真核表达载体pLXSN中,并通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体进行鉴定。以荧光显微镜和利用流式细胞仪分析重组病毒表达EGFP蛋白的情况。以MTT方法检测初步分析重组病毒对人Hela细胞的RNAi效果。结果限制性内切酶酶切和测序结果均表明成功构建了靶向人端粒酶逆转录酶的小干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siTERT。以磷酸钙共转染法制备的重组逆转录病毒滴定了病毒滴度后,重组病毒感染人Hela细胞24h时用流式细胞仪测得EGFP表达的阳性率为24.1%。重组逆转录病毒感染人Hela细胞48h时,MTT实验测得细胞死亡率为53.2%。结论成功构建了针对人端粒酶逆转录酶小干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siTERT,并制备了重组逆转录病毒,初步观察了效应,为进一步利用小干扰RNA技术研究肿瘤的基因治疗奠定了基础。
- 王全师王欣璐李华王巧愚王全颖杨广笑
- 关键词：RNA干扰逆转录病毒载体人端粒酶逆转录酶
- PET/CT imaging of delayed radiation encephalopathy following radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma被引量：9
- 2007年
- 有在有经历放射疗法和复杂成像形式的成长可获得性的鼻咽的癌(NPC ) 的病人的幸存的重要改进的背景，放射 encephalopathy (RE ) 的数字关于 NPC 放射疗法的盒子正在增加。在这研究，我们调查了新陈代谢并且密度用正电子排放在推迟的 RE 期间损害大脑纸巾变化 PET/CT 表明和 53 的临床的数据病理地证实了为为 NPC.Methods 跟随放射疗法的推迟的 RE 的诊断提供临床的证据的计算断层摄影术的断层摄影术( PET/CT )有推迟的 RE 追随者激进分子放射疗法的 NPC 病人并且 15 个健康志愿者被调查。双边的时间的脑叶，枕骨的脑叶和大脑茎的标准化举起价值(SUV ) 分别地被测量；然后 88 片时间的脑叶和 13 大脑茎的新陈代谢的减小率为在二 groups.Results 之间的统计比较被计算在调查病人的推迟的 RE 的最早的案例发生了在放射疗法以后的 1.5 年。推迟的 RE 经常包含了劣等的时间的脑叶。为有临床的症状和成像调查结果证实的推迟的 RE 的病人，宠物与 CT 维持了 100% 巧合率；在 35 个推迟的 RE 病人的 25 片时间的脑叶，而 CT 显示了正常密度，然而爱抚揭示明显的 hypometabolic 变化。大脑茎的发生新陈代谢的减小是 24.5%(13/53 ) 在调查病人，包括 4 个病人， hypometabolic 变化由宠物并且否定发现出现由 CT 出现。邻近在时间的脑叶的 hypometabolic 区域的 granuloma 的发生是 12.5%(11/88 ).Conclusion 推迟了重要 hypometabolic 在劣等的时间的脑叶改变的 RE 病人展览，由比由 CT 早得多的宠物捕获了。PET/CT 在稍尖的阶段和 granuloma 形成为推迟的 RE 的诊断提供一个珍贵工具。
- WANG Xin-luYIN Ji-linLI HuaLI Xiang-dongQUAN Jiang-tao
- 关键词：脑疾病
- PET／CT研究恶性淋巴瘤对肝脏和／或脾脏的侵犯
- 目的研究恶性淋巴瘤侵犯肝脏和/或脾脏的PETICT/CT影像学表现,观察肝脏和／或脾脏内病变累及的特点,为其正确诊断提供依据。方法分析累及肝脏和/或脾脏的恶性淋巴瘤患者41例(52次 PET／CT检查)的临床资料及PET...
- 王欣璐尹吉林李华李向东全江涛蔡超郑辉
- 关键词：恶性淋巴瘤肝脏脾脏
- 文献传递
- RNAi靶向人端粒酶逆转录酶对人肝癌细胞的生长抑制作用被引量：12
- 2008年
- 目的利用RNAi技术降低人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,抑制其活性,研究其对人肝癌细胞的增殖和凋亡影响。方法构建针对hTERT基因的siRNA真核表达载体pLXSN-EGFP-U6-siTERT,制备靶向hTERT的重组逆转录病毒;用重组逆转录病毒感染HepG2人肝癌细胞,以TRAP法检测端粒酶活性变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;MTT法检测肿瘤细胞生长抑制情况。结果成功制备出hTERTsiRNA逆转录病毒表达载体;重组病毒感染HepG2细胞24、48、72h后端粒酶活性分别下降了23.84%、58.03%和85.01%(P<0.05);感染后24h细胞凋亡率29.05%;MTT实验结果显示肿瘤生长受到抑制,并存在一定量效和时效关系。结论hTERTsiRNA能特异性使hTERT基因表达抑制,端粒酶活性下降,肝癌细胞增殖受到抑制。
- 李华王欣璐杨扬张剑汪根树姜楠陈规划
- 关键词：RNA干扰人端粒酶逆转录酶基因治疗
