河北省自然科学基金(302318) 作品数:10 被引量:50 H指数:4 相关作者: 董金皋 张利辉 刘云惠 李正平 王绍新 更多>> 相关机构: 河北农业大学 河北大学 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 高等学校骨干教师资助计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 更多>>
高效液相色谱对玉米大斑病菌毒素的分离与制备 被引量:2 2005年 建立了以高效液相色谱分离制备玉米大斑病菌2号小种毒素的方法,研究了以Nova-PakC18分析柱、制备柱对检测波长、流动相、pH值对分离和制备的影响.结果表明5-羟甲基-2-呋喃甲醛的检测限为0.017 mg/L,其他组分的相对偏差为0.09%~1.9%.在0.005~0.10 g/L范围内,标准毒素的线性回归良好,相关系数和回收率分别为0.971 3和98.2%.该方法快速、准确且重现性好,适于毒素的分离制备. 刘云惠 张利辉 董金皋关键词:高效液相色谱 玉米大斑病菌 毒素 玉米大斑病菌HT-毒素特异性组分与原生质膜蛋白互作研究 被引量:5 2006年 以玉米叶片原生质为研究对象,以ANS(1-苯胺基-8-萘磺酸)作荧光探剂,用荧光标记法研究了毒素与质膜蛋白的互作.在被ANS标记后的原生质悬浮液中加入不同浓度HT-毒素后,ANS荧光强度明显增加,呈现出了剂量—效应关系,表明HT-毒素与质膜上ANS某些受体发生了互作.本实验采用2种试剂,从2个角度表明了ANS受体和质膜上存在的毒素受体具有蛋白特性.初步推测HT-毒素特异性组分的原初作用位点在质膜外侧. 王绍新 刘颖超 李正平 董金皋关键词:玉米大斑病 膜蛋白 作用位点 玉米大斑病菌特异性毒素组分分离条件的优化研究 被引量:3 2006年 把从玉米大斑病菌的1号小种菌株(99-2)中提取的粗毒素进行硅胶TL层析,分离到Ⅰ(Rf0·06)、Ⅱ(Rf0·21)、Ⅲ(Rf0·45)、Ⅳ(Rf0·60)、Ⅴ(Rf0·75)5种组分,分别对此5组分进行生物测定,发现组分Ⅱ对带Ht1基因的玉米具有较强的特异性。经对组分Ⅱ进行HPLC的进一步纯化,又可得到3种组分Ⅱ-1、Ⅱ-2、Ⅱ-3,其中只有Ⅱ-3具有特异致病活性。对Ⅱ-1、Ⅱ-2、Ⅱ-3进行紫外-可见全波长扫描,发现只有Ⅱ-3在300nm处有吸收峰,Ⅱ-1和Ⅱ-2的峰形相似,可能为类似物。 王绍新 董金皋关键词:玉米大斑病 真菌毒素 玉米 玉米大斑病菌特异性毒素组分的分离与纯化 被引量:25 2003年 玉米大斑病菌的 2号小种菌株用改良Fries培养液进行体外培养 ,培养滤液经 - 40℃冷冻干燥 ,加等体积甲醇去除沉淀后用乙酸乙酯提取 ,粗提物经HPLCC18柱可以分离出 8个组分 (峰 3~ 10 )。经生物测定发现 ,7号峰和 10号峰的纯品对玉米叶片有明显的毒性 ,其中 7号峰对带有Ht1基因的玉米表现出了一定的特异性。制备所得毒性组分分别进行红外光谱扫描 ,发现 2个毒性组分的红外吸收光谱基本一致 ,吸收峰形状基本相同 ,只是其波数稍有变动。 张利辉 刘云惠 董金皋 李正平关键词:玉米 大斑病 高压液相色谱 红外光谱 大斑病菌 纯化 Purification and Structural Analysis of a Selective Toxin Fraction Produced by the Plant Pathogen Setosphaeria turcica 被引量:3 2007年 Thirteen fractions from the pathogenic plant fungus Setosphaeria turcica race 1 were separated and collected using high performance liquid chromatography (HPLC). Their toxic activities were assayed through leaf puncturing on corn differentials (OH43, OH43Ht1, OH43Ht2, and OH43HtN), and the results revealed that eight fractions were toxic and fraction 6 was specifically toxic to OH43Ht1, which could be taken as a gene-selective toxin fraction. Fraction 6 was finely purified via HPLC and condensed by freeze desiccation. Its chemical structure was analyzed with EI-MS, IR, HMBC, ^1H-NMR, and two-dimensional NMR. The results suggested that fraction 6 contained an unsaturated double bond, carbonyl and methylene groups with molecular weight of 142. ZHANG Li-hui DONG Jin-gao WANG Chao-hua LI Zheng-ping植物病原真菌毒素结合蛋白研究现状 被引量:5 2002年 植物病原真菌毒素结合蛋白的研究是近年来毒素研究中的热点及难点之一。本文介绍了真菌中广义蠕孢菌属 (Helminthosporium)、链格孢属 (Alternaria)、壳梭孢属 (Fusicoccum)、轮枝孢属 (Verticilium )等 10余种真菌毒素在结合蛋白研究中的最新进展 ,尤其是较为详细地介绍了甘蔗长蠕孢毒素、燕麦维多利亚毒素、玉米长蠕孢T小种毒素、玉米炭色蠕孢菌毒素结合蛋白研究的技术与方法。提出毒素结合蛋白的研究应采取同位素技术与免疫化学相结合的技术路线。 王朝华 董金皋关键词:真菌毒素 同位素技术 免疫化学 玉米大斑病菌毒素对玉米叶肉细胞脂氧合酶活性的影响 被引量:7 2003年 玉米大斑病菌 2号小种粗毒素 (HT C)和标准毒素 (5 羟甲基 2 呋喃甲醛 ,HT I)处理玉米叶片 ,都能诱导 3种供试基因型玉米叶片中脂氧合酶活性增高 ,但是不同基因型玉米对HT C和HT I的反应不同 ,HT I对含有Ht1基因的品系诱导时间早 ,水平高 ,HT C对于不带Ht基因的品系LOX的影响略高于HT I;不同浓度的HT I在OH4 3和OH4 3Ht1玉米叶片中诱导的LOX酶活性不同 ,高浓度HT I和HT C对LOX酶活诱导时间早 ,水平高 ,浓度降低诱导水平降低 ;外源H2 O2 对HT I和HT C在OH4 张建成 范永山 董金皋关键词:玉米 大斑病菌 叶肉细胞 脂氧合酶 毒素 玉米大斑病菌毒素的液相色谱分离及7种纯组分的活性监测 被引量:4 2003年 由玉米大斑病菌(HT-毒素)引起的玉米大斑病是世界玉米产区的重要病害之一,罹病的玉米植株叶片迅速萎蔫死亡,严重地威胁着玉米的产量,造成很大的经济损失.近年来由于大面积种植的玉米品种不抗病,大斑病日趋严重[1]. 刘云惠 张利辉 董金皋 吴国江关键词:玉米 大斑病 HT-毒素 液相色谱分析 玉米大斑病菌菌丝蛋白单克隆抗体制备 被引量:2 2006年 邢继红 董金皋关键词:玉米大斑病菌 单克隆抗体 菌丝蛋白 抗体制备 HT-毒素 受体蛋白 生化过程 玉米大斑病菌菌丝蛋白电泳分析及抗体检测 被引量:3 2003年 邢继红 徐淑华 董金皋关键词:玉米 大斑病菌 菌丝蛋白 电泳分析 抗体检测 分子量测定