国家自然科学基金(30872361)
- 作品数：11 被引量：36H指数：4
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- LPS-TOLL样受体-4在急性前葡萄膜炎发病机制中的研究进展被引量：4
- 2009年
- 急性前葡萄膜炎,特别是与HLA-B27相关的急性前葡萄膜炎是常见的非感染性葡萄膜炎。临床和实验已证明一些G-细菌如克雷白杆菌、沙门菌、志贺菌和耶尔森菌可能诱发此类葡萄膜炎。G-细菌细胞壁的脂多糖是第一个被发现的Toll样受体-4(Toll-like receptor4,TLR-4)的外源性配体,TLR-4是人Toll样受体蛋白,属于I型跨膜蛋白,是细菌脂多糖介导的信号跨膜转导的主要受体,对于天然免疫系统识别病原微生物有至关重要的作用。近些年随着眼科学的发展,对其在人眼免疫学方面的研究逐渐增多,本文着重综述了TLR-4的在眼部的转导路径及其在急性前葡萄膜炎中研究进展。
- 李上卢弘
- 关键词：脂多糖TOLL样受体-4急性前葡萄膜炎
- Toll样受体4对HLA-B27相关前葡萄膜炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子的影响被引量：1
- 2012年
- 目的通过对比正常人与HLA-B27相关前葡萄膜炎恢复期患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)受脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激及抗Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)抗体(HTA125)干预后分泌细胞因子的变化,探讨TLR4在HLA-B27相关前葡萄膜炎发病机制中的作用。方法选取HLA-B27阳性前葡萄膜炎恢复期患者10例,相同性别及年龄段的HLA-B27阴性正常人10例作为对照。抽取研究对象外周血分为以下5组体外培养PBMC:(1)正常人非LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的PBS进行培养;(2)正常人LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的LPS进行培养;(3)HLA-B27阳性患者非LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的PBS进行培养;(4)HLA-B27阳性患者LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的LPS进行培养;(5)HLA-B27阳性患者LPS+HTA125干预组:终浓度为5mg·L-1的HTA125预先干预PBMC 30 min后再加入1mg·L-1的LPS共同培养。分别于培养4h、8h、12h、24h后,利用ELISA法测定细胞培养上清液中的TNF-a、IL-10和(4)(5)组中IL-6的浓度。结果 LPS未刺激组,PBMC培养4h、8h、12h、24h后,HLA-B27阳性患者TNF-α浓度分别为(1329.46±155.09)ng·L-1、(1926.76±163.28)ng·L-1、(1424.61±141.63)ng·L-1、(526.98±112.29)ng·L-1,正常人分别为(562.83±106.45)ng·L-1、(839.57±73.98)ng·L-1、(559.60±88.48)ng·L-1、(200.81±51.39)ng·L-1,两组各时间点相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);HLA-B27阳性患者PBMC培养8h、12h、24h后,IL-10浓度分别为(145.51±26.91)ng·L-1、(259.16±32.71)ng·L-1、(435.98±134.54)ng·L-1,正常人分别为(63.57±17.28)ng·L-1、(123.21±15.73)ng·L-1、(247.82±32.10)ng·L-1,两组各时间点相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。LPS刺激后,正常人与HLA-B27阳性患者PBMC分泌TNF-α和IL-10水平在各时间点均比LPS刺激前明显升高,且HLA-B27阳性患者升高更明显。HLA-B27阳性患者PBMC在LPS刺激后与LPS+HTA125干预组相比,后者各时间点分泌TNF-α、
- 刘旭辉张孝生李中秋王婧张晓龙卢弘
- 关键词：脂多糖单个核细胞细胞因子TOLL样受体4
- 细胞因子与急性前葡萄膜炎被引量：4
- 2010年
- 急性前葡萄膜炎发病机制尚不明确,近年来有学者认为细胞因子在急性前葡萄膜炎的发病机制中发挥重要作用。研究细胞因子及其网络的特点为明确急性前葡萄膜炎发病机制、寻求新的治疗方法提供了重要基础。本文就目前肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-6、白细胞介素-10、γ-干扰素在急性前葡萄膜炎发病过程中的作用进行综述。
- 许颖知卢弘
- 关键词：急性前葡萄膜炎肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-1白细胞介素-6白细胞介素-10Γ-干扰素
- TLR-4和CD14在急性前葡萄膜炎小鼠虹膜中的表达被引量：6
- 2010年
- 目的观察内毒素诱导的小鼠急性前葡萄膜炎模型中虹膜Toll样受体-4(Toll-like receptor-4,TLR-4)和CD14的表达。方法C3H/HeN(野生型)和C3H/HeJ(TLR-4基因缺陷型)小鼠足底注射霍乱弧菌内毒素,建立急性前葡萄膜炎动物模型,注射后每隔2h用裂隙灯进行眼前节观察,并做组织病理学检查。用Western blotting及免疫组织化学法检测小鼠虹膜中TLR-4及CD14蛋白的表达。结果C3H/HeN小鼠在内毒素注射后4～6h,小鼠结膜囊内出现大量白色分泌物,12～18h瞳孔区偶见白色渗出,22～24h可见虹膜后粘连及渗出物,36～48h前房内未见炎症消退;C3H/HeJ小鼠未见眼前节炎症反应。通过Western boltting发现正常C3H/HeN小鼠虹膜内有TLR-4蛋白的表达,注射内毒素24h后TLR-4的表达量显著增高,与12h相比差异有显著统计学意义(P=0.009)。免疫组织化学显示在内毒素诱导后24h,TLR-4与CD14在急性前葡萄膜炎模型虹膜组织中大量表达,而在C3H/HeJ小鼠中未见TLR-4蛋白的表达。结论TLR-4在内毒素诱导的C3H/HeJ(TLR-4基因缺陷)小鼠中未见表达,而在C3H/HeN(野生型)急性前葡萄膜炎动物模型虹膜组织中大量表达,TLR-4可能在急性前葡萄膜炎发病环节中发挥着重要作用。
- 李上卢弘陈巍胡小风杨培增Kijlstra A
- 关键词：TOLL样受体-4CD14急性前葡萄膜炎
- 内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎的巨噬细胞中Toll样受体4的表达被引量：3
- 2010年
- 目的探讨在内毒素诱导的Wistar大鼠葡萄膜炎中Toll样受体4（TLR4）阳性细胞与虹膜组织中巨噬细胞的动态变化和分布。方法实验研究。Wistar大鼠50只，用随机数字法随机分为5组，每组10只，分别为正常对照（0h）组、6h组、12h组、24h组及48h组。除0h组外其余各组均足垫部注射霍乱弧菌内毒素200μg，注射后于裂隙灯显微镜下观察双眼前节炎症反应变化。按实验分组于0．6、12、24、48h处死大鼠。取虹膜-睫状体及脉络膜组织。通过葡萄膜铺片免疫组织化学方法检测TLR4和巨噬细胞的标记CD163的表达。人工计数虹膜中TLR4^＋与CDl63^＋的细胞并计算细胞密度，计算圆形和多形性的CD163^＋细胞占所有CD163^＋细胞的百分比。进一步采用免疫荧光双标记检测TLR4和CD163共表达的情况。通过单因素方差分析分别对大鼠虹膜内阳性细胞密度以及圆形、多形性CD163^＋细胞的百分比进行统计学检验。结果正常大鼠虹膜睫状体组织不表达TLR4。6h组有2只大鼠虹膜内可见少量TLR4^＋细胞，12～48h组所有大鼠虹膜内TLR4^＋细胞明显增多（F=167．2，P〈0．001），虹膜内TLR4^＋细胞密度分别为（506．1±39．5）个／mm^2（12h组）、（492．3±54．5）＋／mm^2（24h组）及（663．8±150．2）个／mm^2（48h组）。在注射LPS后12—48h期间TLR4^＋细胞形态无明显变化。0—48h组大鼠虹膜内均有CD163^＋细胞，0h组圆形和多形性CD163^＋细胞百分比为13％，12～48h组其百分比约为80％，且圆形细胞主要位于虹膜基质层。免疫荧光双标记可见TLR4和CD163的共表达，TLR4位于细胞膜，CD163位于细胞质。5组大鼠脉络膜内均未见TLR4表达。结论内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎中虹膜内TLR4表达增高，部分虹膜固有巨噬细胞表达TLR4。TLR4可能在葡萄膜炎的发生发展中起一定作用。
- 陈巍胡小凤赵丽李上卢弘
- 关键词：脂多糖类葡萄膜炎TOLL样受体4
- 细胞因子在内毒素诱导的前葡萄膜炎小鼠房水和血清中的表达被引量：8
- 2010年
- 目的通过分析内毒素诱导的C3H/HeN小鼠的前葡萄膜炎模型中房水和血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的浓度,探讨急性前葡萄膜炎可能的发病机制。方法取180只C3H/HeN小鼠,分为对照组(n=30)和实验组(n=150),将霍乱弧菌内毒素(18001株,古典生物型,小川血清型)溶于无菌生理盐水中,终浓度为2×103g.L-1,实验组小鼠足底注射100μL制作内毒素诱导的前葡萄膜炎模型;对照组注射等量生理盐水。于诱导后4h、8h、16h、24h、48h断颈处死实验组小鼠(各30只),以10只小鼠为一单样本,微量进样器抽取前房水;眼球摘除后微量进样器于眼窝处取外周血。对照组于注射生理盐水后即刻处死小鼠,样本收集方法同实验组。微球流式技术检测小鼠房水及血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10、IFN-γ的浓度。结果所有实验组小鼠均成功诱导出急性前葡萄膜炎。在小鼠房水中,TNF-α于4h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.002);4h、8h、16h及24h时,在房水和血清内的浓度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。IL-1、IL-6在血清中均于16h达峰值,与对照组相比差异均有统计学(P=0.001、0.000);且诱导后各时间点在房水内的浓度均高于血清。IL-10在房水中于24h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P=0.003),与相同时间点血清内的浓度相比差异亦有统计学意义(P=0.003)。IFN-γ于4h、24h在房水和血清中的表达差异有统计学意义(P=0.033、0.032)。各细胞因子在房水中的表达变化基本与炎症进程相符。结论细胞因子在眼内炎症发生过程中起着重要作用,网络调控将成为治疗方向。
- 许颖知卢弘陈巍杨培增李上王婧
- 关键词：前葡萄膜炎房水血清白细胞介素-1小鼠
- Toll样受体-4及其介导的信号转导与急性前葡萄膜炎被引量：3
- 2011年
- 急性前葡萄膜炎是最常见的葡萄膜炎,其发病机制尚不明确。近年来研究认为,G阴性细菌感染启动、Toll样受体-4介导的信号转导在急性前葡萄膜炎的发病机制中发挥重要作用。本文对目前脂多糖-Toll样受体-4信号转导通路及通过对该通路干预来调控炎症的相关研究进展进行综述,以期为前葡萄膜炎的治疗提供新的思路。
- 王婧卢弘
- 关键词：脂多糖TOLL样受体-4信号转导急性前葡萄膜炎
- HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者前房水细胞因子水平的研究被引量：1
- 2010年
- 目的通过分析HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者前房水中细胞因子的浓度,探讨急性前葡萄膜炎的发病机制。方法采用非随机对照临床观察型病例研究,选取2008年10月至2009年3月在我院眼科就诊的HLA-B27阳性前葡萄膜炎患者21例(21眼)为患病组,并选取同期住院行白内障手术的患者19例(19眼)为正常对照组。将所有入选病例通过酶联免疫技术测量前房水中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10的浓度,并进行组间比较。结果TNF-α在患病组患者前房水中的浓度平均为(29.1±13.9)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(19.8±7.2)pg.L-1,2组相比差异有统计学意义(P=0.011)。IFN-γ在患病组患者前房水中的浓度平均为(36.6±27.5)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(14.6±12.9)pg.L-1,2组相比差异有统计学意义(P=0.003)。白细胞介素-10在患病组患者前房水中的浓度平均为(2.4±2.7)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(3.3±3.9)pg.L-1,2组相比差异无统计学意义(P=0.400)。结论急性前葡萄膜炎患者前房水内TNF-α和IFN-γ的浓度明显升高,炎症病理过程是与Thl型细胞免疫应答所释放的炎症性细胞因子TNF-α、IFN-γ等密切相关。
- 杨硕卢弘陈巍
- 关键词：HLA-B27急性前葡萄膜炎干扰素-Γ白细胞介素-10
- HLA-B27相关前葡萄膜炎的研究进展被引量：2
- 2009年
- HLA-B27阳性前葡萄膜炎是前葡萄膜炎最常见的类型,患者多为青壮年,反复发作,常引起一些并发症,严重影响视力,并可伴有其他系统性疾病。但其发病机制目前仍不清楚,尚无特效的治疗方法。近年来,建立了一些前葡萄膜炎动物模型,如内毒素诱导的前葡萄膜炎和HLA-B27转基因动物模型,并进行了一系列的研究。一些新的治疗方法在临床及动物实验中也取得了很好的疗效。就HLA-B27相关前葡萄膜炎的发病机制、流行病学、动物模型及一些新的治疗方法进行综述。
- 胡小凤陈巍卢弘
- 关键词：HLA-B27前葡萄膜炎基因疗法转基因动物模型
- TLR4-MyD88在大鼠急性前葡萄膜炎虹膜中的表达被引量：11
- 2010年
- 目的观察内毒素诱导的大鼠急性前葡萄膜炎(EIU)虹膜组织内Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)及核因子-κBp65(NF-κB p65)的表达。方法Wistar大鼠50只,随机分为5组,0、12、24、48、72h,每组10只,0h组为正常对照组,其余4组均足垫部注射霍乱弧菌内毒素脂多糖(LPS)200μg,建立EIU动物模型,每隔2h用裂隙灯观察大鼠眼前节炎症反应。通过铺片免疫组织化学染色,检测虹膜睫状体组织内TLR4、MyD88和NF-κBp65的表达,并对虹膜内TLR4+和MyD88+及NF-κBp65+细胞进行计数。结果注射后24～48h大鼠眼前段的炎症反应达到高峰,72h炎症反应逐渐缓解。组织病理学检查表明,虹膜睫状体组织的炎性细胞浸润在24～48h达到高峰,与临床反应结果相符。TLR4在模型鼠虹膜睫状体炎复合体中表达的免疫组织化学检测结果表明,0h组虹膜铺片内无阳性细胞,12h后可见细胞形态大多为类圆形的阳性细胞,48h达高峰,72h阳性细胞数开始减少,各组阳性细胞数总体差异有统计学意义(F=46.79,P<0.05)。MyD88和NF-κBp65的表达与TLR4的改变趋势相一致(F=54.37,P<0.05;F=85.32,P<0.05)。结论内毒素诱导的EIU虹膜内,TLR4及其下游信号传导分子的表达量发生改变,提示TLR4-MyD88依赖传导途径可能参与了EIU的发病。
- 李上卢弘胡小凤陈巍杨培增Aize Kijlstra许颖知王婧
- 关键词：葡萄膜炎MYD88P65
