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粒细胞集落刺激因子诱导的供者外周血中两种不同亚群树突状细胞免疫生物学特性的研究: 2008年; 目的从粒细胞集落刺激因子（G—CSF）诱导的供者外周血中分离出CD1c^＋的髓细胞性DC（MDC）、CD304^＋类浆细胞样DC（PDC）两类DC亚群，并对其生物学特性进行分析和研究。方法免疫磁珠法分离出MDC、PDC，分别用TNF—α、CpG2006OND诱导成熟，检测各DC亚群的表型、对同种异基因淋巴细胞的刺激反应。结果分选的DC纯度均〉95％，MDC表达HLA—DR、CD11c、CD33、CD4，PDC表达HLA—DR、CD4、CD45RA，诱导成熟的两类DC的CIM0、CD80表达均明显增高；混合淋巴细胞反应（MLR）显示：MDC具有很强的刺激淋巴细胞增殖能力，PDC刺激能力很弱；各组上清液中IFN-γ均增加，MDC、mMDC组增高最为明显；PDC、mPDC刺激组上清液中IL-10明显增高；MDC、mMDC刺激后，胞浆内表达IFN—γ的CD4^＋T细胞均明显增高；PDC、mPDC有上调CD4^＋CD25^high 调节性T细胞（Treg）作用；Foxp3 mRNA的表达在各组间无明显的差异。结论采集的供者外周血中两类DC亚群虽然HLA—DR高表达，但仍处于非成熟状态，在合适的条件下分化成熟；无论MDC成熟与否均表现出很强的刺激T细胞增殖能力，使T细胞分泌IFN-γ增加，其分泌的增加可能是促进向TH1极化的结果。PDC可能并不像MDC一样有效地捕获、处理和负载抗原到MHC分子上，因此提呈抗原效率低，表现出对T细胞的弱刺激增殖特性；PDC虽然也可以促进T细胞分泌IFN-γ，但似乎并非是通过TH1细胞；PDC并不能促进TH2类因子IL-4的分泌，对TH2的极化作用可能表现在IL-10的分泌上；PDC有诱导CD4^＋CD25^highTreg的作用。; 汪健王保龙叶书来陈家萍王丹廖艳秋汪帮来徐军; 关键词：树突状细胞

应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4^+ CD25^+调节性T细胞被引量：1: 2009年; 目的探讨在人重组的粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血单个核细胞中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞可行性及其表型和功能。方法收集本院外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB组)和动员后的外周血采集物(G-PB组)各10例,用免疫磁珠法分选出CD4+CD25?T细胞,并用转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导,分别应用流式细胞术、RT-PCR和细胞增殖、抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较2组之间CD4+CD25+T细胞转化率、抑制功能的差异。结果1)G-PB和PB来源的CD4+CD25?T细胞在抗-CD3 M cAb和TGF-β1作用下CD25+分子表达不同,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);2)TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3;3)PB、G-PB来源的TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞具有免疫抑制功能,cpm值分别为:11 739±352和18 732±437(P<0.05)。结论G-CSF动员的外周血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。; 上官志敏王保龙梁晓浏叶书来陈家萍应美爱廖艳秋完晓菊; 关键词：CD4^+CD25^+调节性T细胞

S-三苯甲基-L-半胱氨酸对慢性粒细胞白血病K562细胞有丝分裂阻滞和凋亡的影响: 2009年; 目的研究S-三苯甲基-L-半胱氨酸(STLC)对慢性粒细胞白血病K562细胞有丝分裂阻滞和凋亡的影响,探讨药物阻滞和凋亡机制及Eg5与bcr/abl信号通路联系。方法将K562细胞分成不加药对照组和不同剂量STLC加药组,药物作用一定时间后,用MTT法检测其对K562细胞的抑制效应,流式细胞术分析细胞周期和亚二倍体峰的变化,Annexin-v/PI双染检测药物处理前后细胞凋亡比率,共聚焦显微镜观察纺锤体与细胞核空间位置关系及凋亡诱导因子(AIF)位移情况,小分子抑制剂阻断结合RT-PCR研究Eg5与bcr/abl信号通路联系。结果STLC可显著抑制K562细胞生长;药物处理早期可阻滞细胞周期进程于G2/M期,且85.5%细胞纺锤体结构呈单星状排列,处理晚期可致细胞凋亡且不依赖于AIF的参与;K562细胞中Eg5表达由bcr/abl酪氨酸激酶所调节。结论STLC诱导K562细胞阻滞在G2/M期并致其凋亡,显示较强的抗有丝分裂和抗肿瘤效果。; 王伦善任维华王保龙; 关键词：凋亡

G-CSF动员的供体外周血树突状细胞免疫生物学特性的研究: 2009年; 目的探讨从以G-CSF动员、CS-3000 plus血细胞分离机采集的供者外周血中诱导产生不同特性树突状细胞(DC)的可行性及DC的生物学特性。方法实验组为用CS-3000 plus血细胞分离机采集的5名造血干细胞捐献者的单核细胞(PBMCs),PBMCs培养贴壁后,经含IL-4、GM-CSF的无血清培养基诱导培养7 d,进一步分为4组:未刺激、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10+TNF-α、抗胸腺球蛋白(ATG)+TNF-α组;对照组为5名健康献血者周血,亦按上述条件分组,每组复孔。后2组分别为IL-10、ATG诱导1 d后再加入TNF-α诱导1 d;分别测定各组DC的免疫表型、IL-12(P70)分泌、抗原吞噬以及异基因T淋巴细胞刺激反应。结果诱导培养9 d后可获得非成熟DC(iDC),单纯TNF-α刺激后,HLA-DR、CD11c、CD40、CD80的表达均明显增高,IL-12分泌增加,对异基因T淋巴细胞刺激反应性增强;而IL-10可以使CD1a表达上调,IL-10和ATG均抑制HLA-DR、CD11c、CD40、CD80的表达;与诱导的成熟DC相比,IL-10、ATG诱导DC的IL-12(P70)的分泌、对异基因淋巴细胞刺激反应性均减低,抗原摄取能力增强,但ATG、IL-10诱导的DC生物学特性不完全一致;动员的供体与对照健康献血者诱导的DC在产率,HLA-DR、CD11c表达,成熟诱导后CD11c、CD40、CD80表达,IL-12分泌,异基因T细胞刺激反应性等相比均明显减低。结论G-CSF动员的供体单核细胞PBMCs通过常规诱导可以产生iDC,TNF-α可诱导其分化成熟,IL-10、ATG可以使其获得致耐受的特性;与健康献血者相比,G-CSF动员的供体DC表型和功能部分减低,;虽然动员的供体DC产率不及健康献血者,但血细胞分离机可以可采集到大量的单个核细胞(PBMCs),因此G-CSF动员的外周血有望成为不同DC的重要来源途径。; 汪健王保龙叶书来陈家萍王丹廖艳秋汪帮来徐军; 关键词：树突状细胞 IL-10 ATG 混合淋巴细胞反应

在医学检验专业开展实验室生物安全教学的思考被引量：26: 2010年; 本文从当前学校和实习单位实验室生物安全存在的问题入手,探讨在医学检验专业学生中开展实验室生物安全教学的必要性,并提出几点建议,包括完善实验室的设施、设备及布局;理论结合实际,加强对学生实验过程的指导;加强实验室生物安全的规范管理等,提高医学检验专业学生应对实验室生物危害的能力。; 王保龙苏虹伍佳玲; 关键词：生物安全实验室卫生检验教学

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