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β2-spectrin的siRNA对AML-12肝细胞增殖特性的影响被引量：1: 2013年; 目的应用特异性siRNA干扰小鼠肝细胞株AML-12中β2-spectrin表达,检测AML-12细胞增殖凋亡以及细胞周期的改变。方法化学合成β2-spectrin特异性siRNA,分别转染AML-12细胞,荧光定量PCR和Western blot确定其抑制效果。AML-12细胞经TGF-β细胞因子处理4h后,转染β2-spectrin特异性siRNA,48h后,BrdU标记法以及流式细胞术检测β2-spectrin沉默前后AML-12细胞增殖、凋亡以及周期变化;共聚焦技术检测干扰β2-spectrin表达对TGF-β/Smad信号通路中Smad3、Smad4核定位的影响。结果 siRNA可以高效特异沉默β2-spectrin的表达。流式细胞术检测显示,β2-spectrin沉默促进AML-12细胞增殖,抑制凋亡,S期细胞比例显著升高。免疫荧光结果显示,TGF-β处理后,Smad3、Smad4表达定位于细胞核,沉默β2-spectrin干扰Smad3、Smad4细胞核内定位。结论沉默β2-spectrin的表达促进AML-12增殖,抑制凋亡,促进细胞向S期转化。其机制可能是通过干扰Smad3、Smad4核定位而抑制TGF-β/Smad信号通路,进而发挥诱导凋亡效应。; 汪志军涂炜刘芳; 关键词：细胞增殖细胞周期

重型乙型肝炎预后荟萃分析被引量：4: 2011年; 目的荟萃分析重型乙型肝炎预后的影响因素。方法检索截至2009年11月公开发表的重型乙型肝炎相关的论文,提取其中反映预后相关的临床资料,包括总胆红素(TBil)、凝血酶原活动度(PTA)、甲胎蛋白(AFP)、肌酐水平、临床生化指标及肝性脑病情况。用随机模型分析以标准化均数差(SMD)和相对危险度(RR)为效应量进行异质性检验和统计量合并。结果 13项研究共包含重型乙型肝炎患者2429例。生存组和死亡组中,TBil、PTA、AFP、肌酐水平在荟萃分析中均存在明显差异(P<0.001)。研究中除肌酐和肝性脑病异质性差异无统计学意义,其他预后变量存在较大异质性,且异质性不能通过荟萃回归和分层降低。结论在荟萃分析中TBil、PTA、AFP、肝性脑病及肌酐在重型乙型肝炎病程中具有良好的预后判断价值。肝性脑病和肌酐水平在各研究中对预后判断的结果一致。然而TBil、PTA、AFP对预后的判断仍然存在较大的异质性。异质性可能来源于研究样本排除标准的差异,对于重型乙型肝炎的诊断需要一个纳入标准(PTA≤40%,TBil>10倍正常值上限),同时也需要相关的排除标准。这将对预后判断的准确性和诊断模型的效能有重要价值。; 彭新国姚津剑于伟玲刘丽凤常莹林园园林菊生; 关键词：预后因素

RNA聚合酶Ⅱ启动子SMP8在活化肝星状细胞中的活性: 2008年; 我们已往的研究已经证实，RNA聚合酶Ⅲ启动子（pol Ⅲ）载体表达的针对TGF β1的核酶，在体外能有效逆转活化HSC的生物学活性。但TGFD1是广泛存在于各种细胞中，并发挥重要生物学效应的细胞因子，因此不具组织和细胞特异性的pol Ⅲ启动子核酶表达系统，在抑制HSC活化的同时会影响到正常肝细胞或其他细胞的功能，这使得基因治疗肝纤维化变得困难。为达到靶向性治疗肝纤维化的目的，我们探讨了在活化HSC中特异性激活的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）启动子SMP8的生物学活性，研究其内含子1中CArG[CC（A／T）6GG]顺式作用元件对HSC中SMP8特异性启动子活性的影响，为下一步改造该启动子中的内含子1，使其作为靶向性基因治疗载体的启动子提供实验依据。; 常莹姜华军孙雪梅艾莉陈婷袁顺玉宋宇虎林菊生; 关键词：肝星状细胞

ELF3多克隆抗体的制备及其免疫定位被引量：2: 2010年; 目的制备并鉴定兔抗小鼠胚肝血影蛋白3(embryonic liver fodrin 3,ELF3)的多克隆抗体,并探讨其在部分小鼠组织中的免疫定位。方法合成ELF3氨基端特异性多肽片段,连接载体蛋白钥孔戚血蓝素(keyhole limpet hemo-cyanin,KLH),免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,用ELISA方法检测抗体效价,Western blot和免疫组织化学方法检测抗体特异性及在小鼠组织中的表达情况。结果合成ELF3特异性多肽,并连接KLH后免疫实验兔,制备得到兔抗小鼠ELF3多克隆抗体,ELISA及Western blot检测结果显示此抗体效价及特异性高;Western blot和免疫组织化学检测结果显示ELF3在心、肝、肾组织中表达,尤其是细胞膜上表达明显。结论本实验成功制备ELF3多克隆抗体,并证实ELF3在小鼠心、肝、肾组织细胞膜表达明显,这将为ELF3功能研究提供有力的工具。; 汪志军常莹吴伟姚津剑何星星林菊生宋宇虎; 关键词：抗体制备免疫定位

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